UPLC同时测定风味饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸方法研究 3页

UPLC同时测定风味饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸方法研究苏建国，彭进(淮安市产品质量监督检验所，淮安223001)摘要：建立了超高效液相色谱法(UPLC)同时测定风味饮料中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸4种食品添加剂检测技术。实验采用WatersACQUITYBEHC18色谱柱(1OOmmX2．1mm，1．71xm)，以0．02mol／L的乙酸铵一甲醇(95：5)为流动相，柱温25％，二极管阵列检测器在波长230nm进行检测。整个分离过程在3min内完成，HPLC检测方法至少需要12min，大大节约了检测时问。安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸的回收率分别为98．5％～101．3％，相对标准偏差小于0．90％。方法快速准确。关键词：超高效液相色谱法；风味饮料；安赛蜜；糖精钠；苯甲酸；山梨酸中图分类号：TS202．3文献标识码：A文章编号：1006—2513(2011)02—0243—03Simultaneousdeterminationofacesulfame—K，Saccharinsodium，Benzoicacidandsorbicacidinflavored·--BeveragebyUPLCSUJian—guo，PENGJin(HuaiAnInstituteofSupervisionandInspectiononProductQuality，Huai’an223001)Abstract：UPLCmethodisproposedforthesimultaneousseparationanddeterminationoffourfoodadditives．acesul—fame—K，saccharinsodium，benzoicacidandsorbicacid．Theseparationwasachievedwithin3minbyusingaWa．tersACQUITYBEHC18column(1OOmm2．1mm，1．7m)with0．02mol／LNH4Ac—methanol(95：5)asmobilephaseandcolumntemperaturewas25％，theexperimenthadbeendetectedat230rimthroughaphoto—diodearrayde—tector．thedetectiontimeneed12minatleastforHPLCmethod．However．thetimeiSreducedshortlybyUPLCmeth—od．Theaveragerecoveriesforsamplesrangedfrom98．5％～101．3％．TherelativestandarddeviationiSlessthan0．90％．TheUPLCmethodiSrapidandaccurate．Keywords：UPLC；Flavored—beverage；acesulfame—K；saccharinsodium；benzoicacid；sorbicacid风味饮料是指以食用香精、食糖和甜味剂、山梨酸是常用的防腐剂，这几种食品添加剂是监酸味剂等作为调整风味的主要手段经加工制成的督检查必检项目，而苯甲酸、山梨酸、糖精钠的饮料。安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸这四种检测方法均有国标方法_】J，但还没有同时测定食品添加剂在饮料中均得到普遍使用，四种食品这四种食品添加剂的国标方法。目前，有人研究添加剂超标现象在一些劣质的风味饮料中屡见不用HPLC同时测定这四种食品添加剂方法，分析鲜。安赛蜜、糖精钠是常用的甜味剂，苯甲酸、时间至少12min¨4。为方便测定，提高检测效率，收稿日期：2010～1l一11作者简介：苏建国(1978一)，男，工程硕士，工程师，主要从事产品化学方法检测。 史邑ChinaFoodA胁坌塑：：：===篓本文研究建立一种能够同时、快速测定食品中多动相。从实验可以看出，甲醇：乙酸铵水溶液为种食品添加剂的方法。本文探索了风味饮料中495：5时，时间较短，且分离效果理想。甲醇：种添加剂同时测定的UPLC试验条件，建立了能水溶液为80：20和90：10时，时间较长，虽然分够同时且快速检测上述4种物质的方法。离效果更好，但是峰形展宽，不利于积分，且达不到快速测定的效果。如果甲醇比例更低时，安赛蜜和苯甲酸将出现重叠，分离效果差。本文选1试验部分择0．02mol／L的乙酸铵一甲醇(95：5)作为流1．1仪器与试剂动相，分离效果较好，在3rain内可使4种组分完Waters超高效液相色仪(WatersACQUITY全分离，见图1。UPLC)系统(配有二极管整列检测器，自动进样器，色谱工作站，WatersACQUITYBEHC18色0．4谱柱(1OOmm×2．1mm，1．7m)。03超声波清洗器，真空抽滤器，匀浆机甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，试验O．2用水电导率5I~s／cm0．11．2色谱条件流动相为0．02mol／L的乙酸铵一甲醇(95：0．05)，流速0．3mlMmin；柱温25~(2；进样量为lOIxL；紫外波长扫描范围190nm～400nm。以保留时间和紫外吸收谱图定性，峰面积定量。1一安赛蜜；2一苯甲酸；3一山梨酸；4一糖精钠1．3标准曲线的绘制图1四种添加剂的标准谱图准确吸取浓度为lmg／mL的安赛蜜、糖精钠、Fig．1Chromatogramesofstandardsolution苯甲酸、山梨酸各1mL于lOmL容量瓶中，用0．02mol／L的乙酸铵一甲醇(95：5)溶液定容至2．2检测条件的选择10mL，此混合中间液的浓度为0．1Omg／mL。分别本实验对4种食品添加剂在190～400nm之吸取混合中间液0．05、0．1、0．5、2．5、5．OmL间进行全波长扫描，安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、用0．02mol／L的乙酸铵一甲醇(95：5)溶液定山梨酸的最大吸收波长分别在228、205、226、容至lOmL，构成浓度分别为0．5、1．0、5．0、254nm处，为兼顾各组分的灵敏度，本文选择的25．0、50．Omg／L的标准使用液系列。在选定色谱实验波长为230nm，在此波长下各组分均有较好条件下测定。的灵敏度。1．4试样制备2．3线性范围及检出限所有样品均为市场采集的样品，取5．000g样按所选择的色谱条件进样不同质量浓度的标品，用水定容至lOOmL，脱气lOmin，样品稀释准溶液lOixL，获得不同质量浓度下各组分的峰面液最后经0．45m滤膜过滤，其滤液为待测液。积，以质量浓度和峰面积绘制标准曲线。取标品逐级稀释进样lOtxL，检测结果中色谱峰高为噪声2结果与讨论高3倍(S／N=3)相对应的浓度为检出限。各组分的线性方程、相关系数、线性范围及检出限见2．1流动相的选择表1。从表1可以看出各组分在线性范围内，线通过试验比较甲醇和水作为流动相与甲醇和乙酸铵水溶液作为流动相比例为95：5、90、10性关系良好。和80：20时，其分离情况是基本相同的，考虑到2．4样品分析实验室中甲醇和乙酸铵水溶液作为流动相是经常图2为实际样品的色谱图。采用本方法，对用的，故本实验选择甲醇和乙酸铵水溶液作为流果味饮料进行检测，结果见表2。由表2可以看 出，方法重现性好，准确度高，结果满意。表1各组分的线性范围及检测限Tab1Linearrelationship，linearrangeoftest0．00．51．01．52．02．53．0图2实际样品的色谱图(n=5)Fig,2Thedeterminationresultsofrealsamples(n=5)表2实际样品的检测结果(n=5)Tab2Theresultsofrealsamples(n=5)O0OOO4321O2．5方法的回收率行分析，平行测定lO次，结果如表3所示，被测配制一混合标准溶液，连续进样10次，做精样品加标回收率在98．5％～101．3％，RSD小于密度实验。准确称取食品样品10．000g，按线性0．90％，测定结果准确可靠。范围加入一定量的混合标准品，按选定的条件进表3各组分的RSD和回收率Tab3Precisionandaccuracyofthetest3结论参考文献：[1]GB／T5009．140—2003饮料中乙酰磺胺酸钾的测定[S]．本法采用UPLC检测方法，可准确、快速地[2]GB／T5009．28—2003食品中糖精钠的测定[s]．同时测定风味饮料、茶饮料、果汁饮料等饮料中[3]GB／T5009．29—2003食品中山梨酸、苯甲酸的测定[S]．4种常见的添加剂，精密度和准确度高，方法性[4]许龙福．高效液相色谱法同时测定食品中安赛蜜、糖精、苯甲能能够满足实际工作的需要，为执法部门、企业酸、山梨酸和咖啡因[J]．分析试验室，2002，21(2)：36—38．[9]黄百芬，张文娟，沈向红．高效液相色谱法同时测定酱油或等检测机构提供一种新的检验方法。饮料中的8种防腐剂和3种甜味剂[J]．中国卫生检验杂志，2005，15(10)：1208—1211．