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- 2022-06-16 12:40:23 发布
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■。'.‘.'心二i一方:一,。;片:、、'、'…‘1、.-户V、,V;.,:、、:省'‘‘*.?j’、户三,r乂'‘JPJ‘、’-’‘"”…气’'‘唯 ̄’:二’1*;少v令‘\v—乃/V\;:换,货銭八处禱屬、;紫’'*?>、f\:知:、、片、全日制硕:t专业学位论文_咏:、’■'、'’鸣,、心、‘;,:,;决.,’矣'.’,'‘‘'‘^’.;^巧读掏亦v;v靴!鐵,辜’不同助郝.j暗虫膊对蜜蜂风检影响的硏究y’>’、、。|’,濟-;:—崩敵茄C记;i鼓4^;yV;V*'―’‘、''、‘一、‘.'':>’r、;:‘V,..:-V4.)VV.,、'、4s‘?、'X研究生姓名严清平、打、這:J’一'.‘—,、r- ̄?,-知"'.二…■ ̄-:'!.,‘,':r'产,;‘r為;,严二趴y?巧‘,—?‘,..v指哥教师戴良英教授.>,',、’一 ̄‘一、*:-….…—.’-、冷?、产/二:、"r八"*'‘矣‘、?、、:■.、:公、.;:、-.张德咏研究员.7>校外指导教师、<>-节、.;..学位类型专业硕十汝‘’‘k-‘1学科领减植物保巧/乂/:‘—??*,?.、、?、,-?护农药环境女全<TJ硏究方巧,/、,...、;苗/<%.;—-;卢打.J皆萬-;..-扣靴.嘴与献;成V竹记瑪鸣诚都J聲记识;,纪抑捧松:茜娘神‘'..’‘:-:三^-‘片,,:,,,./,;;//:;知'‘'—邱V.V*、'/yr,;占产—瓜、:‘/.:户?一三,/C巧VV;VW’‘'一-"一’'1,,^户;,碱.心V\..,‘‘—;、一-’、,"-''、?、>‘‘V、:,'、.、所-—V;;^5、….’t'‘,.vv;>、y,,?‘、-、"、-.、…?、、、k.,巧v八rV\,?'■、\,-*,.;-'■’..、‘’‘'护■矿户‘?*棘、;A‘.一、-V、/、1*止兴一—二系巧:,.‘、‘一‘’.,'J'―—',-.‘"乂_‘:、..-:产心-.4;-v一‘Vu,>:?::公/、V.rv-句,‘备‘,、?',‘"?‘ViT.A、‘户二‘沪、斗-、’,一、‘、'一一-V一.一t一心?K議麵誦晴機S师spil禱麵瓣.雜蕉麵載簿藤乾八?-V;於-,、、八.f、>巧产;卢4,祭,’*於'"?、■!*’-、如?‘'1r,*产VV//.,為rV,-‘*‘,。’’、?,严,f‘‘參V,:j,<V‘/读‘乂又;
分类号密级UDC10537单位代码觸斋浪朵夫緣全日制硕±专业学位研究生论文不同助剂蜡虫膊对蜜峰风险影响的研究Stud〇打theeffectofagriculturaladuvantsontheyjh’oneybeesenvironmentalriskofacetamiridp研究生姓名严清平指导教师戴良英教授校外指导教师张德咏研究员学位类型专业硕±学科领域植物保护硏究方向农药环境安全—w’fr1鐵搔员会主席论文答辩日期1/小又^论文评阅人、欲狄1\巧阿罕句谭1二〇—五年六月
独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在指导老师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加W标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证一书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。少6/研究生签名崎时间:年月巧关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留送交论文的复印件和电子稿,允许论文被查阅和借阅,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可W用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容,并同意将由此产生的收益捐赠给学校教育基金会用于发展研究生教育。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)■谷/J研究生签名;。T年月/i日:时间杂导师签名;时间:年/巧曰IJ
摘要摘要助剂可影响农药在田间的防治效果,同时也可改变农药的环境行为。新烟碱类杀虫剂因对蜜蜂的毒性较高而备受关注,本研究选择该类杀虫剂中对蜜蜂毒性相对较低一-甲基化咯烧丽(NM巧的品种巧虫脉,方面研究N、SiIwetL77、聚乙二醇辛基苯基一Tri-tonX100)等常用农药助酸(剂在室内对巧虫棘蜜蜂急性毒性的影响;另方面,研究上述3种助剂在半田间条件下睹虫脉对蜜蜂死亡、飞行强度、行为、幼虫及蜂群发育情况等方面的影响。本研究旨在明确农药助剂对巧虫鮮蜜蜂安全风险的影响,从而为从农药制剂加工源头上控制农药的环境风险提供参考。本论文研究表明,所选3种农药助剂对蜜蜂无明显急性毒性,对巧虫脉的蜜蜂急性经口毒性无明显影响,但显著提高了巧虫脉的蜜蜂急性接触毒性。在半田间试验条件下,分别含有3种不同农药助剂的5%巧虫滕可溶液剂(T1/T2/13)对蜜蜂的死亡、飞行、花粉采集、蜂群数量、蜂群发育(卵、幼虫、蛹所占比例变化趋势)与清水对照和阳性对照(乐果)相比均有不同程度的影响。T2(巧虫脉+SilwetL77)处理组在-4时蜜蜂死亡数显著高于清水对照组-DAA,在DAA28时蜂群数量显著低于阳性对照组,且在蜂群死t数、种群数量W及种群发育等3方面与T1/T2处理组存在显著差异。综上所述,非离子型有机娃类农药助剂Silwet以77(三括氧掠系列)对巧虫脉的蜜蜂环境安全具有潜在的风险。关键词,,:农药,农药助剂蜜蜂急性毒性,环境风险I
湖南农业人学全[l:i制专业硕7学位论文AbstractAculturaladuvantscanafecttheeficacofesticideintihe巧eldandalsochanegrijyp,gitsbehaviorintheenvironmentsuchassoil,lant.Neonicotinoidinsecticidesarefamousfor,p*化eirhih化xicitiestohonebeeandacetamiridwi化ielativelowacute1:oxicittogy,pyho打ebeeamo打thisrouofinsecticides.Inthisroectthreecommo打lusedesticideyggppj,yp--aduvants-methNMPt1tNirrolidoneSilweL77TritonX00willbesudied1:heir,j,ypy(),effectsontheacutetoxicittohonebeeinthelaboratoraswellaseffectsonthemortalityyy,y^me打-flightintensitybehaviorbroodandcolondevelotofhonebeesundersemifield,,ypycondtions.Oectivesofthisresearchis1:0understandtheefectofariculturaladuva打tsonibjgjthehoneybeetoxicityofacetamiprid,whichwillhelpustotakemeasurestomanagethee打vomnentariskofesticiderinfomulationrocessinirldugrpg.pTheresultsindicatedthat3typesofpesticideadjuvantshavenoacutetoxicitytohoneybeeinsignificant,aswellasefectso打化eac山etoxicitytoho打eybeeofacetamipridbyfeed.However,increasedcontacttoxicitytohoneybeeofacetamipridinsig打iScant.I打〇-semi打eldlttLonltemixedwit3dtest;es5/〇aceamiridSsolubleccenrahiferenicide,p()paduvantsi打resectivelCO打trastto化eurewateranddime化outeasositiveCK化edeathjpy,pp,rateflinabilitollencollectionandoulationanditsdevelomentelarvaua,ygy,p,ppp(gg,,pp)tt-wereaffecedi打sini巧can.Intherou2acetamirid+SilwetL77testthedeathrateofggpT(p),honebeewerehtttDAA-4tiherhanCKinsinificanaandheoulationnumberwereygg,ppost-28tteststtlowerthanitivecontrolaDAA.Inallhreethemoralioulationnumberp,y,ppanddevelopmentofhoneybeesweredifferentinsignificant.InconcusionteesticeaduvantSilwetL-i打creasedtheaceamiridrisko打lhid77t,pjpewonme打o化打trticuinebee.iirti打ialalarlhonsppyyKeyWords:pesticides,pesticideadjuvants,Honeybee,aciUe1:oxic,environmentalrisk.II
目录目录摘要IAbstractII一第章绪论1第二章不同助剂瞎虫脉对蜜蜂急性毒性的研究61#料61.1试验药剂61.2主耍仪器设备61.3试验用蜜蜂62方S62.1试验处理姐62.2试验方法728.3蜜蜂急性毒性评价3结果与分析83.1蜜蜂急性经曰毒性(48h)83.1蜜蜂急性接触毒性(4化)94小结10第H章不同助剂巧虫滕在半田间条件下对蜜蜂影响评估121欄121.1试验药剂121.2试验蜜蜂121.3试验地点及作物12III
湖南农业火学全日制专业硕±学位论文2巧裙132.1田间药剂处理132.2评估方式133结果与分析143.1田间实际施药量143.2蜜蜂飞行强度和蜂群死亡评估153.3蜂群发育评估183.4蜜蜂采集花粉量224小结23结论25参考文献如致谢30作者简介31IV
第一章绪论第一章绪论农药助剂(Pesticideaduvants)是在农药剂型的加工和施用中,使用的各种辅助物j一一料的总称,但是在剂型配方中或施药时,虽然是类助剂,其本身般没有生物活性:有的起稀释原药的作用是不可缺少的添加物。每种农药助剂都有特定的功能;有的可帮助原药均匀地分散在制剂中;有的可防止粒滴凝聚变大;有的可增加粒子的湿涧性,、粘附性或渗透性;有的可防止有效成分的分解;有的可增加施药的安全性等等。总之,农药助剂的功能,不外乎改善农药的物理或化学性能,最大限度地发挥药效或有助于安全施药。助剂通常在使用之前加入农药中,起润湿、展布、附着、乳化、分散、防漂移、消泡及增渗等作用(Stevens,19%)。农药助剂是随剂型加工和施药技术的进步而发展的。早期的无机农药很少使用助剂。自有机农药发展W后,各种助剂也随之发展起来。随着剂型的多样化和性能的提高,助剂也向多品种、系列化发展,W适应不同农药品种不同剂型加工的需要,并出现了专口的配方加工技术。农药助剂接来源大体可分为:①无机矿物类;②生物来源的天然物质;⑤有机合成化合物,其中又可分为表面活性物质和非表面活性物质两类。农药助剂的发展日趋精细化。中国已建立一定规模的农药助剂工业。常用助剂有W下几类。填料和载体在剂型加工中用于稀释原药的惰性固体填充物称为填輯;能吸附或承载有效成分的填料称为载体。填料不仅起稀释作用,而且还能改善物理性能,有利于原药的粉碎和分散。填料的理化性质与制剂的稳定性有关,应选择使用。粉剂加工多采用中性无机矿物如陶止、高岭±(见粘±)、娃藻±、滑石粉等。浸溃法颗粒剂采用吸油性强的活性白±、膨涧±(见枯止)等。包衣法颗粒剂采用非吸油性的粒状插砂为载体。一一一类表面活性剂乳化剂,能使种流体W极微小的液珠稳定地分散在另种与么互不相溶的液体(例如油在水中)中,形成乳浊液。常用的有聚氧石巧基的醋及酸等非离子表面活性剂和焼基苯横酸盐等阴离子表面活性剂一。般采用非离子型和阴离子型复合配制的乳化剂,其比例调节到最适宜的亲水亲油平衡值(HLB值),得到最佳乳化效果。一类表面活性剂分散剂,其功能是保持粉粒分散,防止凝聚结团。常用的有烧基1
湖南农业大学全日制专业硕上学位论文芳基横酸盐及其甲酸缩合物、木质素横酸盐、焼基龄聚氧己稀基職甲醇缩合物、硫酸盐等。湿涧剂一类表面活性剂,其功能是降低药液的表面张力,使药粒迅速湿润,并使药液容易在施用目标的表面湿涧和展布,帮助药剂渗透。常用的有含皂素的皂角粉、茶子饼粉和含木质素的亚硫酸纸浆废液,W及合成的表面活性剂如聚氧乙烁基焼基芳基趟、聚氧乙稀基烧基礎、晓基苯横酸强、焼基蔡横酸盐等。一展着剂类表面活性剂,其功能为增强药剂在施用目标表面的固着能力,抵抗风,使药效充分发挥雨吹洗,兼有湿展、渗透能力。常用的有非离子或阴离子表面活性剂一、木质素横酸盐、乳酪素等。在某些情况下药液中添加些矿物油或植物油也可起展着作用。助剂可W提高农药在田间的防治效果SharmaWC/.,2001也可改变农药的环境(),'einbe./.Ku2007行为(WierWa/1984Kucharski6a/2006charskiW幻/.。Gaskine',,,)g;;^^/.2000研究表明,助剂对易于润湿的植物叶片如黄瓜上的农药残留滞留量没有()显著影响,助,尤其当喷雾容量较大的时候,而对于疏水性较强的婉豆叶片表面剂能显著增加药剂的残留量,有机娃和附着剂可W增加农药在不易涧湿的蔬菜表面的农药残留量;HollowayWa/.口00叫等研究了Agral(聚氧乙炼壬基酷)、ToU(月旨肪酸甲醋andBondstrene-butadienecoolmers等3种助剂对禾草灵和丙环哇)(ypy)在小麦和魏豆上的残留影响,结果表明,35天后在小麦上均未检测到禾草灵和丙环哇的残留,均检测到禾草灵代谢物二氯苯氧基丙酸,但在添加Agral和Bond的处理中的浓度显著低于添加Toil和没有助剂的处理,而就豆中的情况不同,在收,但对于二氯苯氧基丙酸残留获物中均检测到二氯苯氧基丙酸和丙环哇的残留,与小麦中的情况相反,添加Agra巧日Bond的处理中的浓度显著高于添加Toil和没有助剂的处理;Ku油arskiW如.口009)研究发现助剂可W提高甜菜宁在±壤和甜菜中的残留量,同时油性助剂可减缓甜菜宁在田间的分解速度,在±壤中的半衰期(公750)与不添加助剂相比(3化2,.1天)可W延长11天而其他试验表面活性剂则无显著影响charskiefa/.011等研究表明,;Ku口)表面活性剂可W增加甜菜田除草剂环草定在±壤和甜菜根中的农药残留量,分别可平均提高45%和41%。上述研究表明,助剂对农药在植物及±壤中的残留及代谢行为具有不同程度的影响作用,但不同助剂种类对不同农药和在不同植物中的残留影响情况不同。农药中的助剂不仅可影响药效和农药残留,已有研究还表明助剂本身对环境生物具有毒性或者可W提高农药的毒性(Abdelghanief〇/.,1997;AnastacioWa/.,2000;Henry2
第一章绪论e/幻/.1994Liue/a/.2000ananW幻/.001PurcellW口/.1996Sha^naWal2001。农M.;,;gッ;,;,,)药助剂在农药制剂中所占比例很大,从百分之几到百分之九十几不等,但研究者多注重农药本身的安全性及其对人类,却忽视了农药助剂及其降解产物是否对、环境影响人类、有益生物W及环境造成危害,尤其是在许多国家比并未对农药助剂进行严格管理。,,因此缺乏足够的安全性数据另外农药助剂在农药制剂当中的大量使用对生物及环境的危害是缓慢的,因此更加未引起人们的高度重视。直到近年来,农药助剂及溶剂对生物及环境的影响才越来越引起人们的关注,在美国和加拿大等国家开始将助剂纳入登记管理范畴,1继忠,20,并进行分类管理(刘步林99806)。有关农用及;申非农用助剂对环境生物的直接毒性研究较多(BaldwinWa/.,1997;Comberef〇/.,1993;DelVa化6/幻/.2002Dome/a/.1993Lewise/a/.W81如Cowlesefa/.2000等测定了,;,;,),()王赶氧焼类助剂SilwetL77、Silwet408、Silwet806、SilwetL7607、SiIwetL7200对二斑叶瞒(re化awcAww化ae)的毒性,结果表明前巧巾有机娃助剂具有相似的毒性=--=-(L55.9m)7607C50.8,而SilwetL4800m)SilwetL7200pp毒性较低(LC50,pp,)?没有影响81姐]<;^〇/.003研究了8种农用助剂对圣状蚕(1?/^说?/?似:)的急性毒性;口)巧(4化)和慢性毒性(lOd),试验助剂对其都有不同程度的影响;脂肪胺聚氧乙締类助,对鱼毒性高(华乃震剂是草甘麟的标准助剂,对皮肤、眼睛有刺激作用,2002)除;草剂中应用最为普遍的是含有拐基酪聚氧占稀基的助剂,这类农用表面活性剂在环境一定程度时中生成并累积的代谢产物浓度到达,对野生动物和人类的内分泌功能造成干扰,并且它们对鱼的毒性较大、降解速度很慢,有研究表明壬基酪聚氧己婦醜的生〇% ̄9%物降解率为,其最终降解物烧基酪(NP)的毒性高于未分解前的表面活性剂,一且为低溶解度、低极性的化合物,不易进步降解,因此在欧洲从2005年1月开始禁止销售NPE(壬基酪聚氧乙帰)和NP含量超过0.1%的农药产品(金鲜花,2006);Mullin6-/姑(2011,2012研究表明,非离子表面活性剂TritonX100和SilwetL77对蜜蜂成蜂具)-)虽,甲基化咯院丽然对成蜂影响较小有很高的毒性而NMP(N,但对幼虫有较高的急性毒性,此外,SilwetL77在5)ig/bee经口浓度下,能显著影响蜜蜂的学习能力,激活剂90也有类似的影响一些研究。农药助剂除对环境有益生物具有直接的毒性外,表明其还会影响农药的环境安全性,如赵帅等(2011)年研究比较了300个农药制剂对蜜蜂的急性毒性,结果表明相同含量、相同有效成分、相同剂型的不同生产厂家的产品由于生产加工工艺及所使用助剂的不同,从而对蜜蜂的急性毒性出现非常显著的差异。W上研究说明,农药助剂对环境有益生物的直接毒性W及对农药环境毒性的影响因助剂的种类和农药种类而异。3
湖南农业大学全日制专业硕±学位论文一蜜蜂护Swe//矿era是种重要的经济屋虫,可为人类提供大量蜂产品如蜂蜜、花)一粉、王浆、蜂胶和蜂蜡等。除此之外,蜜蜂对人类的最大贡献在于其是种重要的传粉昆虫,全世界有上万种植物可靠蜜蜂进行传粉。自2006年冬W来,欧美相继出现蜂群大量减少的情况,科学家们称之为蜂群崩溃失调病(ColonyCollapseDisorder,简称2006- ̄CCD2007年的冬天,估计在美国有65.187.5万蜂群消失,0),如在而这之前有24auzatW口/.2006UnderwooWa/.2007。引起蜂群衰退的因素有很多,其中农万蜂群(Ch,;,)一个重要诱因法国西南部就发现用化虫晰处药的大量使用被认为是,如早在19%年,理向日葵种子后导致大量蜜蜂死亡的情况,并在后来取消其在向日葵上的使用。FrazierW細2008从108份蜂花粉中检测出46种不同的农药及6种农药代谢产物1份样),其中在(7种农药,品中最多检测出1,平均每份样品中检出巧中农药只有3份样品中未检测出农药残留,此可见农药己对蜜源造成了广泛而严重的污染,势必会影响蜜蜂的健康。研究表明,还、生长发育、繁殖、记忆、,农药除直接杀死蜜蜂外可能会对蜜蜂的行为D现象方面一学习、免疫等方面造成影响。在造成蜜蜂CC,新烟碱类杀虫剂直被认为""法是罪魁祸首,在国、德国等国家先后限制用作种子处理剂巧onmatinw2005VL2010。新烟碱类杀虫剂目前商品化的品种有7个1可W看出大多数巧,从表也,)品种对蜜蜂表现出较高的急性经口毒性,其中巧虫脉和嗟虫晰对蜜蜂的毒性相对较低。一一一但事实上并没有足够的证据证明蜜蜂的CCD现象是因单种或类药剂引起的,如Mullinw〇/.(2012)从采自美国和加拿大的887个蜂蜡、蜂花粉、蜂胶、蜜蜂等样品中检测出121中不同的农药及其代谢物,有的高达214mpp,很难证明新烟碱类杀菌剂是造成CCD的原因,只是不可否认的是新烟碱类农药的确对蜜蜂具有较高风险。目前在欧美等发达国家,农药对蜜蜂的风险已成为农药环境风险评估的重要内容,并已建立了成""""""熟的从室内急性毒性到半田间试验、田间试验的逐级风险评价程序和相关试验准则和方法。表1新烟巧类杀虫剂主要品种及其对蜜蜂的急性毒性Table1Mainvarietyofneonicotinoidinsecticidesandacutetoxicityonhonebeey中文通英文通急性经口毒性急性接触毒性^(x..)(a..ee)用名称用名称i/beei/b|ga鸭巧虫脉Acetamiprid14.538.09EU--ianidin0.002800.044可尼下Clo化.00370.022EPArainoteflin0230.047EPA巧虫胺D.0nImacr.0.EPA比虫嘟idlopid00038078-帰晚虫胺Niteyram0.138Iwasa別口/.004叩口)嗟虫嘛Thiaclorid17.3238.82EUp嗟虫嗦Thiamethoxa0.0050.024^4
第一章绪论油菜是我国传统的蜜源和粉源植物,油菜蜜源和粉源稳居我国春季主要蜜源和粉源的首位。油菜蜜是我国出曰的主要蜂蜜品种,而油菜花粉不仅是治疗前列腺疾病的有效药剂一,也是种天然的营养保健品。此外,油菜花蜜和花粉还是蜜蜂冬季缺乏食物阶段最重要的蜜源和粉源。因此,油菜蜜粉的丰歉直接关系到养蜂效益的高低。在油菜生长的各个阶段,都离不开农药的使用,其中油菜花期用药对蜜蜂的影响最大,如花期油菜菌核病和财虫的防治。近年来,油菜花期病虫害严重、施药次数多,剂量大的地区,造成大量蜜蜂中毒死t:,如呼盟地区,2004年中毒的蜂群达2000多箱,给养蜂业造成重大损失,2006)。(董坤等惦虫脉等新烟碱类杀虫剂在实际生产中被广泛、大量用于油菜喊虫防治,并鉴于助剂对农药在环境中的残留代谢行为W及环境安全性具有潜在的影响作用,本项目拟选择已证明对蜜蜂具有影响且实际生产中应用较广的3种农药助剂N-甲基化咯爲厕-NM巧、SilwetL77、打itonX100,研究他们在油菜上对瞎虫脉蜜蜂安全性的影响。(5
湖南化业大学全日制专业硕7tr学位论文第二章不同助剂晚虫脉对蜜蜂急性毒性的研究化学农药对蜜蜂的危害表现为急性毒性和慢性毒性两方面,常通过室内的毒力测定来完成对蜜蜂急性毒性的危害评价3-。为明确种常用农药助剂N甲基化咯烧丽(et以77)-NMP、有机珪表面活性剂(Silw、聚己二醇辛基苯基職(TritonX100)对)瞎虫睐的蜜蜂急性毒性影响,参照《化学农药环境安全评价试验准则》GB/T""-201431270,.10蜜蜂急性毒性试验的方法在室内条件下对比测定添加不同比例;种助剂后瞎虫脉对蜜蜂的急性毒性,比较研究王种助剂对巧虫脉蜜蜂急性毒性的影响。1材料1.1试验药剂-1)农药助剂(按100%含量计算):NMP(N甲基化咯焼丽),简写;NSilwetL77,;町itonX-T。:S100,简写简写:;2)巧虫腺原药;97.4%,简写;D。3)畦虫滕制剂:5%巧虫脉可溶液剂,含10%NMP;5%瞎虫脉可溶液剂,含〇1TtX-110/〇Silwet以775%0%rion00。;巧虫脉可溶液剂,含1.2主要仪器设备万分之一电子天平(岛津企业管理(中国)有限公)、电子温湿度计(北京北方华瑞测控技术有限公司)、移液器(Eppendorf公司)、量筒、烧杯、容量瓶、加湿器、除湿机、空调、蜂笼等。13.试验用蜜蜂意大利蜜蜂(冷we化/eraL.),试验用蜂由湖南省植物保护研究所实验室繁殖饲一养,。,选用强势群中的成年工蜂健康无寄化虫、活泼好动、大小均2方法2.1试验处理组31.1将惦虫脉原药与上述种农药助剂按1:0.001、1:0.01、:0等3种比例进行混配,6
第二章不同助剂巧虫照对蜜蜂急性毒性的研巧共计9个组合(样品),见表2。表2巧虫脉与3种农药助剤的混配配比T"able2Acetamiridwith化ieetesofesticideaduvantsmixedinroportionpyppjp农药助剂药剂NMPS"wetL77Tr-1itonX001;0.0011;0.0011:0.001晦虫脉1;011:.011:.1.00001:0.11:0.11:0.15Ix称取1.0267g97.4%瞎虫脉原药,丙厕溶解定容至lOmL容量瓶,得lOmg/L试验药剂储备液,DS;4,00mL容量瓶m/,称取1.化助剂蒸馈水溶解定容至1,得レ10gL助剂母液ZS;===巧虫化:助剂l:〇DS^Sl:(.l)(1);===巧虫脉:助剂1:001DS^S1:0.1(.)();===(惦虫脉:助剂1:0.001)(DS:ZS1:0.01);2.2试验方法°?试验温度为25±2C,相对湿度为50%70%,微光条件下进行,试验用蜜蜂在试验前饥饿化。2.2.1蜜蜂急性经口毒性50、141494、32/L试验设置2167、11、7.、..9mga.i.(W睹虫脉计算),同时设空31.1白对照组。每个处理次重复,每次重复0只蜜蜂。即用蒸馈水稀释上述2中不同500222488mL配比的试验药剂,得到浓度为、333、、1、98.ga.i./的药液,再与50%的糖水W1:1漏匀,配制成2.2丄4中所列浓度的含药糖水,再将6mL含药糖水装入1OmL小烧杯中,杯内浸溃化3g脱脂棉,杯口向下倒置于试验笼纱网上,通过网眼供蜜蜂摄食。于药剂处理后24h、4化观察并记录受试蜜蜂的中毒症状和死亡数。用统计软件DPS9.5计算24h、4化半数致死浓度(LDso)和%%置信限。2.2.2蜜蜂急性接触毒性试验设置40、20、10、5、2.5、1.25a.i.ug/蜂巧虫脉计算),同时设空白对照2(CK)。每个处理3次重复,每次重复10只蜜蜂。分别取配制好的各试验药液叫^点于麻醉后试验用蜂的前胸背板处,得到所设试验剂量,待其完全恢复之前及时装入蜂笼中,用脱脂棉浸泡适量糖水饲喂。于药剂处理后24h、4如观察并记录受试蜜蜂的中7
湖南农业大学全日制专业硕±学位论文DPS9524hL〇毒症状和死亡数。用统计软件.计算、4化半数致死浓度(和95%置5〇)信限。2.3蜜蜂急性毒性评价依据中华人民共和国农业部《化学农药环境安全评价试验准则》第10部分,农药对蜜蜂的急性接触毒性按LDso(48h)的大小划分为四个等级;低毒(LDs〇>11.0^iga.i./—3蜂),中毒(2.00a.i./蜂<LD£11.0a丄/蜂),高毒(l.OOxlOa.i./蜂CLD谷.00帖5〇峭帖so-3axl.i./蜂),剧毒化〇.0〇〇a.i./蜂帖5幻帖;农药对蜜蜂的急性经口毒性按LCso(4化)(的大小划分为四个等级:低毒(LC5〇>200mga丄化),中毒(20.0mga.i./L<LC5〇谷00ai/L).m,0.500ma.i/L<LC含20.0ma丄/L,00mai/)。g..高毒(g5og)居リ毒(LC5o绅.5g..L3结果与分析3.1蜜峰急性经口毒性(4化)在实验室条件下分别测定了巧虫脉原药、3种农药助剂、巧虫献原药与3种助剂不同配比混合物3种农5%唆虫脉可溶液16个试验药剂(试验处、W及含药助剂的剂共理组)对蜜蜂的急性经口毒性。根据试验所测LCso值,并依据中华人民共和国农业部《化学农药环境安全评价试验准则》第10部分中农药对蜜蜂的急性毒性划分标准确定了不同药剂处理对蜜蜂的急性毒性等级。试验结果(4化)表明(见表3),3种农药助剂对蜜蜂的急性经口毒性LCso值均4xll〇ma.i大于g./L,低于200mga.i./L的低毒标准值,属低毒。13个含有惦虫脉成-口95174ma.分的药剂处理对蜜蜂的急性经毒性LCso值分布在i./L。g,均属于中毒8
第二章不同助剂巧虫脉对蜜蜂急性毒性的研究表3不同助剤瞎虫巧对蜜蜂急性经口毒性试验结果(4化)Table3Acuteorallioxidtyonhoneybeeoface化mipridwith出ferentadjuvants(48h)^teso95%fi{tpg药剂相关系数r=a+bxma..LmL号ygi/a丄/等级g97.4%巧虫脉原=0-1011.77121巧y.667+2.260x9095中毒^042NMPN//>lxl〇/低毒()^->x3SilwetL77(S)//ll〇/低毒^4TrionX-IOT>lxltO//〇/低毒()5%歧虫滕可溶液?5^-0牛.1%02.4;38化0.86135110177中毒A,、}剂(NMP)5%巧虫脉可溶液=+?60.08752.4197x0.8810771193中毒L、y(Silwet77)5%晚虫化可溶液=-巧化?76154117y,.0764.0630.97368中毒、TY-剂(itonX100)==-?8DN1:0.15.8331+4.W83x0.95147口6184:y中毒=-=W--9D.0307+10.040.981241;N1:0.01y90x08137中毒==--0.+4.6909961D:N1:0001y5.292352x.15133191中毒=--=11D:S1.141+425x.141251:0y.948.^097983中毒==-13-2D.5292+3.984化0.971384:S1:0.01y11717中毒==--13D:S10.001.0193+2.7547x0.9115320:1y1229中毒=--14DT=10.12+337125104163:.08巧83X0.95中毒:y==--15DT11.552+52185x.9517114216;:0.0y66.07中毒=--=16D:T111.17W..931741265:0.00y830495x038中毒3.2蜜峰急性接触毒性(4化)畦虫脉与3种农药助剂及其制剂对蜜蜂急性接触毒性试验结果(4化)见表4。3N-et心77种农药助剂甲基化咯烧丽(胃巧、有机桂表面活性剂(Silw)、聚乙二醇辛-100)LD>200035714基苯基酸(TritonX、、ai对蜜蜂急性接触毒性so分别为%mg.yL,a,。D均大于11mg.iVL的低毒标准值属低毒瞎虫脉原药对蜜蜂急性接触Lso值为%mgLD4-a.7910.7.i./L,低毒;含3种助剂的5%瞎虫脉可溶液剂对蜜蜂急性接触so值分布在3mag.i.化,中毒瞎虫化原药与3种农药助剂不同配比的9种混合物对蜜蜂急性接触;-1^〇值分布在化861513..45〇.911131心其中低毒1个,中毒4个,高毒个。9
湖萌农业大学全H制专业硕±学位论文表4不同助剂處虫滕对蜜蜂急性接触毒性试验结果(48h)Table4乂cutecontactt:oxicityonhoneybeeoface化mipridwithdiferentadjuvants(48h) ̄ ̄毒力回归方差相关系LD^95%置信限mg毒性等'^1=a+bxrm..L号y数gai儿a.i/级97’4/〇赌虫脉原药=+?1yl.87202.2120x0.99261834低毒D()2NMP(N)//>2000/低毒?-=-+43SwetL776.3695.4543x0.99357306410低毒il(Wy?--143+4T.4TritonXIOOT8.0306.l73x092612141874低毒()厂53%/n惦疋虫心腺W可溶液剂=_-5Jyi.8723+3.8665x0.896.442胞10.15中毒(NMP)5%捉虫脉可溶液剂=-62.6894+3.3974x.894.519.03y0.790中毒(SilwetL77)5%巧虫化可溶液剂=-72+.1.1y.74542.1873x09010.73648.90中毒(Tr-itonX100)==-8D:N1:0.1y4.0008+0.8316x0.8215.918.23120化毒==+-D24x.0.03191:0.5.02081.100820.961.9:N01y高毒=-=1010.14351+0.7827x.1.21.152.69高毒D:N:00y.90970==-11D:SI:0.1y3.巧91+2.6306X0.994.433.245.70中毒==-4.8543+0047x0.971.52.1.12D:S1:0.01y.806300裔毒==-13D:S1:0.001y4.8573+0.2777x0.873.261.126.05中毒==-14D:T1:0.14.0146+1.14:32x0.92.284.81111y7.0中毒=-15DT=1015.0475+07024x.970.0.0221::0.y.0%.9商毒==-16D:Th0.001y4.3611+1.1445x0.881.255.96中毒^4小结通过采用对比进行室内急性毒性测试的方法3种常用农药助剂N-甲基化,明确了-咯焼丽(NM巧、有机赶表面活性剂(SihvetL77)、聚乙二醇辛基苯基醜(TritonX100)对惦虫脉蜜蜂急性毒性的影响。试验结果表明,:所选3种农药助剂本身对蜜蜂急性经口及接触毒性均为低毒且测定的LCso及LDso值远低于国家标准中规定的低毒标准值,确定3种农药助剂对蜜蜂无明显急性毒性作用。测定的瞎虫滕原药,原药与3种农药助剂9种不同比例混配W及含3种农药助剂的5%惦虫脉可溶液剂对蜜蜂急性经口毒性等级均为中毒,且各处理LCso的95%置信限区间范围均有交集,表明3种农药助剂对巧虫脉蜜蜂急性经口毒性无明显影响。蜡虫脉原药对蜜蜂急性接触毒性等级为低毒,含3种助剂的5%捉虫眯可溶液剂对蜜蜂急性接触毒性等级为中毒,略虫脉原药与3种农药助剂不同配比的9种混合物对10
第二章不同助剂巧虫脾对蜜蜂急性毒性的研究蜜蜂急性接触毒性等级为低毒1个、中毒4个、高毒4个,特别是3种助剂与晚虫脉原药按照1,;化01比例进行混配时均表现为高毒。综合各处理试验结果3种农药助剂均可显著提高瞎虫脉的蜜蜂急性接触毒性,分析其原因,可能是由于非离子表面活性剂类的农药助剂具有可W显著增加农药附着性、渗透性的特性,添加助剂后可能使惦虫脉更加容易通过蜜蜂体表进入体内,从而表现出较高的急性接触毒性。II
湖南农业大学全日制专业硕±学位论文第兰章不同助剂晚虫脫在半田间条件下对蜜蜂影响评估通过室内急性毒性测试研究可W看出助剂对农药的蜜蜂个体急性毒性的影响,但蜜蜂是社会性昆虫,个体的毒性效应是否会对蜂群的正常发育产生影响还有待于更进一步的研究。OECD及美国EPA己经具备了成熟的研究农药对蜜蜂蜂群影响的试验方,(0邸P/EPPOGuidelineNo1:tt法并制定了系列的相关试验准则.704Guidelineones()methodsforevauationthesde乂瓶ctsoflantro1;ectionroctsononeeeslipppduhyb(O卧WEPPO,2010)用于指导、规范此类研究试验。本部分研究采用邸PO推荐的试)验方法-,测试分别含3种不同农药助剂【N甲基化咯焼丽(NM巧、有机娃表面活性剂(Silwet(TronX-5%随虫脉可溶液剂在油菜半L77)、聚芭二醇辛基苯基醜it100)】的田间条件下对蜜蜂的死亡、飞行、花粉采集W及蜂群发育的影响,通过与阴性对照(清水)及阳性对照(乐果)的对比结果,明确3种农药助剂对蹈虫脉蜜蜂环境风险的影响。1材料1.1试验药剂1)5%瞎虫化可溶液剂,含10%NMP;2)5%蹈虫脉可溶液剂,含10%SilwetL77;35〇-)/〇巧虫脉可溶液剂,含10%TrhonX100;〇440/〇乐果EC。)1.2试验蜜蜂试验用蜂来自湖南浏阳市古港镇巧江村长兴养蜂场,品种为意大利蜜蜂?《(令一me侃eraZ35000-8000只.,所有蜂箱的蜂王来自同/),每箱脾,每箱蜂的数量约,母,系,从而保证试验蜂群的遗传背景相同。1.3试验地点及作物湖南省长沙市长沙县春华镇大鱼塘村试验基地。种植的油菜品种为洋油792F1,201304-4月年1月撒播,开花时间201年3。试验地面积2250m2(长50m,宽45m),12
第H章不同助剂巧虫麻在半田间条件下对蜜蜂影响评估划分为15个试验大棚(小区),每个大棚面积80m2,H维分别是长20m,宽4m,高一上搭盖防虫纱网2.5m2m,。。同处理的大棚间距离为不同处理间隔3m。大棚框架2方法2.1田间药剂处理实验巧设计5个处理,分别为T1(5%巧虫脉可溶液剂,含10%NMP)、T2(5%-巧虫脉可溶液剂61以77、了(5%10%町如11又100)、,含10%8;1化)3瞎虫脉可溶液剂,含一艮(40%乐果乳油,阳性对照)和CK(空白对照),各处理施药量见表1,均在同天于盛花期傍晚,采用单嘴手动背负式喷雾器(AgrolexAZ,LP605,AD400,16LtankVO山m一e),在每个实验大棚中间过道个来回,分别喷施左右两边油菜。每次施药前对喷雾器都进行校准。根据配制药液量和剩余药液量来计算实际施药量。各处理施药完一成后当晚,每个实验大棚各放入箱蜜蜂。->.50p.6m图1试验大棚示意图Figure1Thediagramofgreenhouse11,试验大棚如上图所示,长5m,宽6m。油菜为四厢种植中间过道稍宽。2.2评估方式2.2.1蜜蜡飞行强度和蜂群死亡评估--在放入蜂箱后暴露的第1天(DAA1)至第7天(DAA7),对蜜蜂飞行强度和蜂群死亡的评估。13
湖南农业火学全日制专业硕±学位论文飞行强度评估为每小区任选一3个面积为1平方米的区域进行评估,每次观察分一钟内该1平方米区域內觅食和在油菜上方飞行的蜜蜂数量,另外还观察分钟内出入蜂箱口的蜜蜂数量。蜂群死亡的评估是在每个蜂箱出曰前安装一个带有网盖的死蜂收集箱,盖子网格一的孔径大小仅能供只蜜蜂飞出,而死蜂不能被拖出去,记录从蜂箱中拖出的死蜂数,包括成年工蜂,量,雄蜂,幼蜂蛹和幼虫。另外还评估掉落在大棚中间行道上铺好的纱网上的死蜂数量。2.2.2蜂群发育评估蜂群发育评估是为T更好的掌握蜂群的实力及稳定情况。在放入大棚前1天开始一A-第次评估,并挑选合适的蜂群用于试验。在暴露结束的当天上午(DA7对所有蜂群)-4--发育状况做第二次评估,接下来在DAA1、DAA21、DAA28再做H次评估。评估参数包括蜂脾中的蜜蜂数量百分比此估算蜂群数量,调查在蜜蜂活动前或者停止活动后进行);卵占蜂巢的百分比;幼虫占蜂巢的百分比;蛹占蜂巢的百分比。在每次评估中,计算蜂脾上蜜蜂数量、卵、幼虫和蛹区域所占的百分比,此项评估包括了每个蜂箱中的每个蜂脾。2.2.3蜜蜂采集花粉量监测-DAA-2DAA--分别在DAA1,,4,DAA7d蜜蜂开始采集花粉当天在蜂箱外安装-,采后立即保存在2(TC冰箱中花粉收集器,2h后收集花粉,贬存于栋色瓶中,测定各处理区花粉采集量。3结果与分析3.1田间实际施药量.5m/s每次施药的详细情况见表1,实际施药量偏离,施药时大棚内的风速均低于〇目标均小于5%,符合试验标准。14
第H章不同助剂巧虫脉在半田间条件下对蜜蜂影响评估表5各处理小区实际施药量Table5TheapplicationofvariousexperimentaltreatmentsOT1(5/0I拒虫账可溶液剂,含1。。下T---11Tl2Tl3平均值、"%NMP)2"目标施药量/80m4.巧76[g]2目标喷药体积/8〇m[U4.797628〇m4.724.694.694实际喷药体积/叫.72实际施药量/80m[g]4.724.的4.694.7实际偏离目标[%]1.622.242.242.03T2(5%巧虫脉可溶液剂,含1古T2-1T2-2T2-3平均值、〇10/〇Swe以77ilt)2目标施药量/80m4.7巧6[g]2目标喷药体积/80mL4.7976[]280mL4.754>..实际喷药体积/.S254635477[]2实际施药量/80m[g]4.754為254.6354.77-0.992.663.实际偏离目标.巧058[%] ̄ ̄T3(5%瞎虫踩可溶液剂,含平均值10%Tron-X1it00)2目标施药量/80m阁4.巧巧2目标喷药体积/80mL4.7976[]280mL4.64794.894.76实际喷药体积/.[]2实际施药量/8〇1.64.794.894〇[g.%]4%-4.12011.7实际偏离目标.6斯08[]R阳性对照(乐果)民1R2R3平均值2目标施药量/80m[幻4.79762目标喷药体积/8〇mL4.7976[]2实除喷药体积/8〇m[U4.巧4.644.6554.6752实际施药量/80m[g4.734.644.6554.675]实际偏离目标[%]1.413.282.972.%32.蜜蜂飞行强度和蜂群死t评估各处理飞行强度调查结果见表6,变化趋势见图2,差异显著性分析结果见表7。A-理结果表明,DA1,含不同助剂的魄虫棘处(T1\T2\T3煙蜂飞行强度与空白对照(CK)--相比无显著差异,显著高于阳性对照处理民(乐果)DAA2至DAA5\T,T1\T23与;-空白对照CK(清水)相比无显著差异,极显著高于阳性对照处理民(乐果DAA6);及DAA-7,由于雨后阴天,蜜蜂基本未出蜂箱活动,因此各处理的飞行强度无显著差异。15
d湖荫农业大学全口制专业硕:学位论文表6各处理蜜蜂飞行强度Table6Flightfrequencyindifferenttreatments ̄ ̄飞行强度(飞行及采集峰数),次处理组DAA-------1DAA2DAA3DAA4DAA5DAA6DAA7CK11771如58102531315CK2991219113372215CK3153226589037012民1287221019R2273519502R33541110000T-112412401096143011T-210211128253711211T1-3636375764503-T21112169851084473T2-217215486914463T2-3185181881242843T3-1167021411028255T-274957431013108T3-3658087446610飞行强度次mm.mZ/180 ̄j160-140—_黨_^^夺CK120-%-DAA-lDAA-2DAA3DAA-4DAA-5DAA-6DAA-7图2各处理组的蜜蜂飞行强度变化趋势Fiure2ariationtrendofhonebeflihtfruencinegVyeeytstsgq16
第H章不同助剂睛虫脉在半田间条件下对蜜蜂影响评估X表7各处理飞行强度差异显著性分析结果Table7Theresultof幻ihtfreuencvarianceanalsisgqyy时间CK民T1T2T3DAA-16143Aa30AAAAab135a献a9bDAA-2169Aa5Bb138Aa168Aa92ABab-A10DAA3b1041Aa69Aa8BAa86a-108DAA4108Aa17良c54ABA82Abcaab-554DAAAa2Bb42ABa39ABa60AaDAA-265Aa0AAAAa4a6aaDAA-713A14AaAa5Aaa4Aa注采用DPS9.5统计软件,Duncan新复极差法,大写字巧表示极显著差异,小写字母表示显著差异。各处理蜜蜂死亡数调查结果见表8,变化趋势见图3,死蜂数差异显著性分析结果-。--9结果表明,DAA1,各处理组死蜂数无显著差异DAA2AA3T1\T2\T见表,3;及DCK(-与空白对照清水)相比无显著差异,极显著低于于阳性对照组民(乐果)4,;DAAT2死蜂数与阳性对照组艮(乐果)相当,而显著高于空白对照组CK(清水)及T1VT3DAA-5DAA-7处理组,各处理死蜂数无显著差异。;至表8各处理蜜蜂死t:调査结果Table8Theres山tsofoulationmortalityindifferenttestspp处理组DAA-lDAA-2DAA-3DAA-4DAA-5DAA-6DAA-7CKl1119998146CK2‘4746144CK31171189138民126100323151186R264012714102322民360522752462523Tl-11252553186Tl-23018951097T-l317030122T2-161721148516T2-282014257614T2-31211624131215T-31171032201T3-211335445T3-3WH3548^17
湖南农业火学全日制专业硕±学位论文平均死蜂数,只300-j巧0-?吟?〇八<200/\Ht-R/\15Q_\j100-/\\j"时间DAA-1DAA-2DAA-3DAA-4DAA-5DAA-6DAA-7图3各处理组蜜蜂死亡变化趋势Table3Variationtrendinhoneybeesmortalityindifferent化8权X表9各处理组死蜂数差异显著性分析结果Table9Analysisofhoneybeesmortalityindifferenttests时间CK民T1T2T3DAA-19A31Aa1AaAaa9916AaDAA-2llBb64Aa14BbI6Bb5Bb-3242DAA9BbAa12Bb14Bb5BbDAA-44Cb21Aa7BC4Cbb18ABaDAA-56Aa9Aa6Aa9Aa3AaDAA-65ABb3B19Aa8ABblOABabbDAA-7e6Ab17Aa8Aabc15Aab4Ac*注:采用DPS9.5统计软件,Duncan新复极差法,火写字母表示极显著差异,小写字母表示显著差异。3.3蜂群发育评估各处理组试验期间蜂群数量调查结果见表10,变化趋势见图4,差异显著性分析见1DAA-I-表1。结果表明,0(即施药暴露前d),各处理蜂群数量无显著差异。DAA7(即--暴露结束当天),各处理蜂群数量无显著差异。DAA15、DAA21(即暴露结束后8d、d,TVT314)T2处理组蜂群数量显著低于空白对照组,与其他处理组无显著差异1;处理-(21组与空白对照组及阳性对照组无显著差异。DAA28即暴露结束后天,T2处理组)蜂群数量极显著低于空白对照组,显著低于阳性对照组,T3处理组蜂群数量显著低于18
第s章不同助剂旋虫赚在半田间条件下对蜜蜂影响评估阳性对照组;T1处理组与空白对照组及阳性对照组无显著差异。表10试验期间各处理蜂群数畳调査结果Table10Thesurveyresultofulationuantitindifferenttestspopyq处理组DAA-ODA-DAA---A715DAA21DAA28Cl775051259188101889750C262508375103751100011500C3712561251087598759125R1675053758125875010250民272508000於507250如25民351256063743865007875Tl-17750如25775075008875Tl-28750800043811813251096Tl-362504500787591259875-T2>168756688700068756S38T2-266256563700076881齡T2-361256000712568136625T3-16750900075800077501BT3-27560636310063105009125T3-3巧755375600074387750种群数量,只/箱12000]10000->?夺产C8。。。普Rl酵"m麵麵"!■6000-嚇?今今mmJ24000-了32000--011I!II时间DAA-0DAA-7DAA---;L5DAA21DAA28图4试验期间各处理组蜜蜂蜂群巧量变化趋势Figure4Variationtrendincolonypopulationquantityintests19
湖南农业火学全巧制专业硕±学位论文X表11各处理蜂群数虽差异显著性分析结果Table11Theresultofcolonypopulationquantityindifferenttests蜂群数量平均值及差异显著性处理组DAA-0DAA-7DAA-15DAA-21DAA-28C7042Aa6542Aa10146Aa10354Aa10125Aa民6375Aa6479Aa7271A油7500Ab8917ABabT17583Aa7042Aa8688A油9479Aab9458AB油T26542Aa6417Aa7042Ab7125Ab7063BeT36167Aa6813Aa9146Aab8646A化8208ABbc ̄X:采用DPS95Dun注.统计软件,can新复极差法,大写字母表示极显著差异,小巧字母表示虽著差异。试验期间各处理组卵占蜂巢的百分比、幼虫占蜂巢的百分比、蛹占蜂巢的百分比-1^及252幼虫阶段的百分比调查结果统计情况见表1,不同时间段的变化趋势见图8。结果表明,T1和T3处理组变化趋势与清水对照处理组的变化趋势相似,与R处理组T民处理一存在明显差异;2与清水对照处理组及组的变化趋势均具有定的差异。表。各处理麟发育评估调査统计结果Table12Thesurveyresultsofpopulationdevelopmentalassessment ̄DAA-0DAA-7DAA-A-21^AA-15DA28C16.398.614.7210.0010.%民..1...1944889194444639T120.009.443.896.398.33T2244413.333.3310.2818..189了317.221.33613^3.61^幼虫C19.4428.33191717.5.00.030R20.2816.6721.3930.8320.00Tl18.0631.1119.1720.0033.06T217.2230.0031.6728.0621.11T320.5626.1115.831乂1731.94S.4449..C39.176944647257.22民40.834乂4449.1757.5067.22Tl36.3946.39362.50.6.06%39T239.443.897.225052.2233.00了3344441.941.574乂72.667.50幼虫阶段(卵、幼虫及蛹)C75.3.229.2886.11933927.78民80^675.0082.502.789319.6T174.44486.18.899786.918.78T281.1177.2282.2288.3392.22了372.2281.3984.1786.1195.2820
第H章不同助剂巧虫化在半田间条件下对蜜蜂影响评估卵百分比,%30.00]巧-.00X-Wl20.00'"醒RW35-.000.004''I''时间DAA-0DAA-7DAA-15DAA-21DAA-28围5各处理巧群巧平均化例变化趋势FiureViatiinthortionfsg5aro凸trendeaverageropoepgg幼虫百分比,%35-.001二:20-.00m?15.^T2.00"^T310—.005—‘DD时间0Ei.00iIiDAA-0DAA-7DAA-15DAA-21DAA-28图6各处理離幼虫平均化例变鶴势Fiure6Variationtre田dintheaveraeroortionoflarvaeggpp21
湖南农业大学全口制专业硕止学位论文踊百分化,%80.001-60.00—R5誦-音T1誦-?^T23000-.補瞧下娘32000-.1000-时间.000I.1I1IDAA-0DAA-7DAA-15DAA-21DAA-28图7各处理蜂群蛹平均比例变化庭势Fiure7Varia村ontrendintheaveraeroortionofuaggpppp百分化,%12000.1每〔-寺100R.00言n_rr^8000-.til_^T2- ̄60-*T3.004000-.20-.00一时间一0.00I!i!EDAA-0DAA-7DAA-15DAA-21DAA-28困8各处理蜂群幼虫阶段平均比例变化趋势Fiure8Variationtrendintheaveraeroortionofthelarvaestaeggppg3.4蜜蜂采集花粉量139。结果表各试验处理组花粉采集量调查统计结果见表,采集量变化趋势见图明,T1与T,,阳性对照组花粉采集量为03处理纽平均花粉采集量为化5207g和0.5766g与清水对照组的花粉采集量〇.5991无显著差异,与阳性对照组具有极显著差异T2g;0,处理组平均花粉采集量为.1854g与清水对照组具有显著差异,与阳性对照组具有极显著差异。22
第H章不同助剂晚虫賺在半田间条件下对蜜蜂影响评估表。各试验处理花巧采集量调査统计结果Table13Thesurveyresultsofollencollectioncaacityindifferenttestspp量’处理驾鮮DAA----1DAA2DAA4DAA7平均值CK-30.72740.044610668100%..099.;51-20CK.47705315122011..0.69-CK10.186300.42971,0869民100000R20000Be艮30000-Tl1.1372.03862.0794000,30670.5207-Tl20.27990.0230.557610869.AabTl-130.24880.3402151.00T2-10.24690.09;39000.1854-0T22.3774.122200.84230Ab-T230.1617000.3802-T310.91880.32%00.96650.5766T3-20.17520.30351.15060.6281Aab-T330.83890.22251.03270.3539*注:采用DPS9.5统计软件n,,Ducan新复极差法大写字母表示极显著差异,小写字母表示显著差异。花粉量,g-1.401。。--寺从1.00/\化80■/\-0.60\二^-0.40鲁。_。.2。-0.00(JH1■■1■■財间---DAA1DAA2DAA-4DAA7图9不同处理花紛采集呈变化趋势Fiureiollencollecioncaiiff9Variatontrendoftacitnderenttestsgppy4小结本研究选用蜜蜂粉源作物油菜,测试了半田间条件下试验药剂(含3种农药助剂的5%畦虫脉可溶液剂)对蜜蜂的死亡、飞行、花粉采集,蜂群发育的影响情况。设置的阴性对照(清水)和阳性对照(乐果)各项观测指标方差分析结果均表现出显著或23
湖南农业大学全日制专业硕±学位论文极显著差异,符合试验准则(OEPP/EPPOGuidelineNo.1704:G山delineon化St()methodsforevaluation化eside乂fectsofplantprotectionproductsonhoneybees(OEPP/EPPO,2010)有效性规定要求,证明本试验研究系统的科学有效性。数据进行)整理后经DUNCAN新复极差法方差分析,小结如下。一()与清水空白对照相比显示,3个试验处理(T1/T2/T3)造成的蜜蜂死亡(T2DAA-4时蜜蜂死亡数显著高于清水对照外)、蜜蜂的飞行强度处理组在、蜂群食物采集能力(花粉采集量)、蜂群数量无显著差异,种群发育方面表现出相似的发育趋势(T2处理组发育趋势不同)。(二)与阳性对照(乐果)相比显示,3个试验处理造成的蜜蜂死亡、蜜蜂的飞行强度W及食物采集能力均表现出显著甚至极显著的差异,蜂群数量方面无显著差异(T2AA-28时蜂群数量显著低于阳性对照外)处理组在D,种群发育方面表现出不同的发育趋势。(三)3个试验处理(T1/T2AT3)之间相比,T2(Silwet以77)试验处理组在蜂群死亡数、种群数量W及种群发育3各方面与T1/T2处理组存在显著差异。24
结论结论本论文研究表明,所选3种农药助剂本身对蜜蜂无明显急性毒性(测定的试验结果远离低毒标准值),3种农药助剂对巧虫脉蜜蜂急性经口毒性无明显影响,但显著提高了晚虫脉蜜蜂急性接触毒性,试验结果与非离子表面活性剂类的农药助剂可W显著增加农药附着性一、渗透性的特性具有定的相关性。AA-,T2处理组在D4时在半田间条件下蜜蜂死亡数显著高于清水对照组,在DAA-28时蜂群数量显著低于阳性对照组,且在蜂群死亡数、种群数量W及种群发育3各方面与T1/T2处理组存在显著差异。综合室内急性毒性和半田间试验结果,非离子型有机旌类农药助剂SilwetL77(王娃氧焼系列)对巧虫脉的蜜蜂环境安全具有潜在风险。一为更进步的明确农药助剂对农药蜜蜂环境风险的影响,需要扩大研究范围,选择更多具有代表性的农药和助剂开展研究工作,同时开展幼虫毒性试验(OECD237、Aupineltest)、慢性饲喂毒性试验(Oomen化St、A加ItLCSOtest)等研究。此外,在半田间试验研究中,开展助剂对蜜蜂蜜源、粉源作物花粉、花蜜、叶面的农药残留的影响,W及在死亡蜜蜂体内、蜜腺中农药残留的影响等,W期获得更为全面准确的研究结果和结论,为指导农药助剂和农药安全使用提供科学理论依据。25
湖南农业大学全n制专业硕-上学位论文参考文献。]AbdelghaniAA,TchoimwouPB,AndersonAC,SujonoH,H巧巳止民,MonkiedjeA.1997t-.了oxicievaluatio打ofsi打lea打dchemicalmixturesof民oimduGarlo打3_Aygp,,24-DandS打d巧ssurfactanttochannelcat行shctalumsu打ctatusblueill,,yUp),gsu打fishLepomism;chochims)andcrawfishProcambaruss.-EnvironToxicol(,(pp)aterual-W,1997,12:237243.Qnasac-P]AtioPMLutzhoftHCHHallinSorensenBMaruesJC.SurfactantGenaol,,g,q(p--OX80todcit化Selenastrumcaricomutumhemoshere.2000:.yp.Cp40835838),3BaldwinWSGrahamSESheaDLeblancGA.Metabolicandroenizationoffemale[],,,g—Da打/幻m幻w幻bythexc打oestroe打4打cmlhe打olEnviron了oxicolcm.p片gyp.Gh1997g,161—1:905191.[4]BonmatinJM,MarchandPA,CharvetR,MoineauI,BengschER,ColinME.uantificationofltakeaecro.JA2005imidacoduinmizsricFoodChemQprippg,,53-1:5336534'5BVL.BundesamtfurVerbraucherschutzundLebensmittelsicherheit.[]h//www.de/c496790/sid171F1BA7tt:.bvl.bundln007/nnDC149166BO6C97p___80A40B2F7B/EN/08Presseinfb化ekenl/01PresseundHinterrundinformati___g—_—g0打en20099M=/02iaissaatgutMesurolen.htmlnnntrue.Acces化d12___p_____July,2010[6]ChauzatMP,FauconJ巧MartelA。etal.SurveyofPesticideResiduesinPollenec-LoadsColltedbHoneBeesinFrance.EconEntomol200699:253262.yy,,口)[7]ComberMHI,Williams,TD,StewartKM.TheeffectsofnonylphenolonDaphniamagnaR27273—.Wateres1993.:276,,",,Mcdermot.Cowles民SCowlesEAAM,RamoutarDInertfbrmulationinredients問,,gwithactivity:toxicityoftrisiloxanesurfactantsolutionstotwospottedspidermA-i1;escari:Tetran沈idae.EntomoloicalSocietofAmerica200093:1.()y.18088yg,9DomPBSalanitroJIEvansHKravetAsstheathare[],\SzL.essinguaiczadofsom,qbrancheda打dlinear打o打ionicsurfactantsbybiodegradationa打dtoxicity.Environ26
参考文献Toxicol751-1lChem.9%12:1762.,10DelVallsTAFoiaJMGomezPA.Seasonalitofcontaminationtoxicitandualit[],j,y,y,qyvaluesinsedimentsfromlittoralecosstemsintheGulfSW.yofCadizSain(p)-Chemoshere200246.;10331043p,,1FrazierMTFmzierJ.WhatHavePesticidesGot1dowi化itBMullinC:o?.Ameree[U,,,20081487-523:521.,()[12]Gaski打民E,Murray民J,KrishnaH,CarpenterA.Efectofagjuvantsontheretentio打ofectaZealandantPtinsicidesprayoncucumberndeafoliae.NewPlrotecion.pg200053355-:359.,13CJKFBuhlKJX-HenrHiins.Acutetoxicitandhazardassessmentof77Rodeo[]y,gg,y,eader-TsrandChemroltatertebeArchEt1p,:oquaicinvrats.nvironConainToxicol,994.-27.:3923994PesteNank-mtsestcsset1HollowaJWrnM.Tixaduvanandiidereidue;somreulaor[],pyjgyuanttateasectsPeana205911-and:12qiivp.巧MgSci.03,()3744.[15]KucharsldM.Impactofadjuvantson:phenmedipham,desmediphamandethoflimesate--residuesinsoilandantPestc.2:559p.007343.lyydy,()[16KucharskiMSadowskiJ?巨ffectofaduvantsonherbicideresiduesleveli打soiland],j-la打tournalofPlantDiseasesandPro1:ection6:971975.p.J.200[17]KucharskiM,SadowskiJ,Influenceofadjuvantscmbehaviorofphemnediphamin—pantandsoiLPolishJournalofAro打om.20091:3236lgy,[18]KucharskiM,SadowskiJ,WujekBarbara,TrajdosJ.Influenceofadjuvantsaddition-onlenadlresiduesi打lantandsoil.PolishJournalofAronom2011:342.59.pgy,19LiuTXStanslPA.Insecticidalactivitofsurfactantsandoilsaai打Stsilverleaf[],yygwhiteOy(及£/7?/文/幻argeMfzyj?///)nymphsoncollardsand化mato—.PestManaSci56:86.g?20001866,[20]LewisMA,PerryRL.Ac山e1:oxicitiesofequimolarandequitoxicsurfactantmixturesto/?)幻/m/a/w幻and王C70/WZ5所幻I打良ra打scmDUDickso打KLeds■Auaticp/,,,qToxicologyandHazardAssessment,Vol4.STP737.AmericanSocietyforTestingandMaterials,Philadelphia,PA,pp402^18.巧81.21LewisMA.Chro打icandsublethaltoxicitiesofsurfactantstoauaticanimals:Areview[]qriskasstWaterRes—a打dessmen1125:10113...991,[22]ManganRL,MorenoDS.Phot;oactivedyeinsecticideformulations:Adjuvantsincrease27
湖兩农业大学全日制专业硕女学位论文-1Mexicanfruitfl.;oxici1;y1:0yDiptera:TephritidaeJ巨conEntomol,200L94:150156.()23FrazierLFrazierMT,CiarloTJ.APrimeronPesticideFormulationMullinCAJ[],,(,InertsandHoneyBees.ProceedingsoftheAmericanBee民esearch0〇11[£化打ce2011(Abstracts)Mullinf,enfJesicidemulaiaduvanaim24CACiarlofTJZhufWCh.Ptfbrtontsmact[],,jyphonebeehea恤A1y.Procee过insof化emericanBeeResearchConference202g(Abstracts)[2引PurcellMF,SchroederWJ.EfectsofSilwetL77a打dDiazinononthree化phritidfruitfliesDitera:Tehritidaeandassociatedendoarasitoids.JEconEntomol.(pp)p15-1199689:66570.,2Sharmattstt4-SDSinhM.Surfacani打creasetoxicioflhosaeand2DtoBrazil[刮,gygyp,usHrtS2001-728le,ocienceCalcuta.36:726.py(),27rmainhMtst-ShaSD.Surfactani打crease1;oxicioflhosateand2Dtorazil,Sgygyp4B[],us-leortScienceCalcua2006:726.py.H(tt)1.3728,28StarkJWalthallW.Ariculturaladuvants:acutemortalitandefectsonoulation[],gjypprowthrateof£)口片灼/幻户"/e又afterChronicexosureEnvironme打aloxicoloandgpp.tTgyemstr2003221-Ch:31iy056306.,,(巧[29Steve打sPJG,Orga打osilico打esurfactantsasadjuvantsforagrochemicals.Pesticide]cence38-Si:122.l993103.,30Underwood民MVanengelsdroD.ColonCollaseDisorder:HaveWeSeenThis[],pyp-Before?.BeeCulture2007135715.:13,,()*31WeinbeierPGreenhalh民.Someaduvantefectson化efateoffenitrolhionand[]g,gj*-aminocarb.EnvironToxicolChem19843334325.,,32.董坤.[],周丽贞,杨明显,董艳,和绍禹,李正跃我国油莱生产现状及其对养蜂业的影响00657-中国蜂业,2,(6):3637.331.刘步林.农药剂型加工技术.北京:化学工业出版社998:697[],3420022-..农药41:15.[]华乃震草甘麟活性和助剂,,()35-金鲜花:80[].APEO的禁用与环保替代.纺织导报2006(577,)36申继忠5-?澳大利亚拟实行农药助剂登记制度.中国农药2006:2223.[],()[37]赵帅,袁善奎,才冰,等.300个农药制剂对蜜蜂的急性经口毒性.农药,2011,50(4)78-280:2.?38华乃震.49..含氣表面活性剂在农药中的应用J世界农药201402:45[][],,()28
参考文献20113lanKnowles,,,[叫A商墓安全农药剂型和农药助剂的发展趋势抑世界农药?%(04:52.)20062?[40]吴志凤,刘绍仁.加拿大对农药助剂的管理阴.农药科学与管理,,27():5053.?4.200504:1112.[U薛勇农药助剂的应用及市场前景町农药市场信息,,()?204.42华乃震.特种农用助剂应用和增效作用[J].1001:447]世界农药,,()[.91:阳]张宇,张利萍,尹丹狐等有机娃农药超润湿剂的农田应用抓农孰200,。)?808810.[44]郭承毅,胡琼艳,张贵犧.两种増效剂对3%巧虫脉的增效作用阴.甘肃农业科技,?201203:2122.,()45林小丽叶纪明等.农药对蜜蜂的风险评价技术进展[J.农药学学报]正军,[,,单,]2?008,04:404409.()?J1146李旭涛.农药对蜜蜂生态环境的影响及保护对策[.养蜂科技01:69.]],2005,)[(47苍涛,赵学平,张志恒,等.草毒生产中常用农药对蜜蜂的毒性及安全评价[J.浙[]]2?江农业科学,009,(04):785787.[4別容仁学,黄蹄,黄军军,等.农用有机磋助剂+巧虫脉防治梢枯喊虫试验町广西2?植保,008,(02):1315.?49杨光.欧盟新烟碱农药禁令引发全球效应[J].农药市场信息,2013,(19:3334.[])?50]张海滨,杜辉.浅议杀虫剂巧虫脉在我国的发展[J].浙江化工,2004,(07:3233.[)51吴声敢.J.,陈丽萍吴长兴等4种杀虫剂对水生生物的急性毒性与安全评价浙[],,[]2?江农业学报,011,(01):101106.[52]周育,庚琴,侯慧锋,等.新型烟碱类杀虫剂畦虫脉研究进展[可植物保护,2006,?323:1620().-刘国光.,孙德智阴阳离子表面活性剂对巧虫脉在水溶液中光解的扔]谢国紅,,等?J:影响[.007120012005.]环境科学学报,2,(巧[54]张海滨.影响晚虫棘在我国发展的因素及对策[J].农药科学与管理,2004,25(1巧:?%24.55庚琴华等.王静.农[],周,,暗虫化在环境中的降解代谢及其安全性的研究进展机?药200704.:223226,,()29
湖南农业大学全日制专业硕-It学位论文致谢时光若白狗之过隙,转瞬即逝。。回想H年硕±研究生的学习和生活,恍如隔日,随着这篇论文答辩的结束,,这段生活也即将落下帷幕了。H年的生活有许许多多的,许许多多的悲喜得失。从开始进入论文研究到现在论文顺利完成的H年起起伏伏,我所收获的不仅仅是增加的知识,更重要的是在阅读、实践中所培养的思维方式、表达能力和广阔的视野一。现在我所拥有的点点滴滴,直都离不开老师、家人、同事、,感恩之情难W言尽朋友给我的细必指导与热情帮助。千言万语,在这里请接受我最诚孽的谢意!感谢我的导师戴良英教授、张德咏研究员。您们治学严谨,务实上进,宅也仁厚,一,,,在您们身上不慕荣利对学生关也体贴认真负责,我可W感受到个科研工作者的严谨和求实,让我获益菲浅,终生受用无穷。您们身上所具备的品质和优点,让我,在感动之余,更多了几分发自必底的敬意与学习的动力。本篇论文从开题的技术路线构思,到技术上的可行性的研究,到论文实验的顺利进行,再到最后论文定稿,都融入了导师的精也指导,时间精力及也血的投入。感谢我的导师对我工作和学习的精""也指导。中国有句古话叫做经师易得,借此,人师难求机会W这句话向两位老师表示最衷也的感谢与最诚挈的敬意!感谢一直W来对我的研究论文提供过无私的帮助和指导的同事、同学和朋友,是您们,让我的研究生生涯更加的丰富多彩。在今后的工作、学习和生活中,我必将更加的勤奋努力,W良好的工作实绩来回!报您们的关也、支持和爱护,不辜负您们的希望严清平2015年6月15日30
作者简介作者简介,男,1980年12,严清平,汉族月生湖北荆州人,群众。一19%年9月至1W8年6月就读于松滋市第中学,高中。19%年9月至2002年6月就读于湖北农学院(现长江大学),植物保护专业,本科,农学学±。2002年7月至2004年10月于江苏省农科院植物保护研究所工作,从事生物农药研发与应用研究。2005年7月至2011年4月于农业部农药检定所工作,从事杀菌剂抗性及农药环境安全性评价研究。20115月至今,湖南省植物保护研究所工作年,从事农药环境安全性评价研究。2012年9月至2015年6月就读于湖南农业大学植物保护学院,攻读植物保护专业。硕±,研究方向为农药环境安全31
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