荆条蜜的理化性质及其抗氧化活性研究 67页

．，’．－ｆ；．Ｉ■？Ｊ分类号：Ｓ８９６．１学校代码：１０６９７密级：公开学号；２０１２２０７４８．ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ硕±亨恆巧交ｉＭＡＳＴＥＲ＇ＳＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ荆条蜜的理化性席及其抗氣化活性研究学科若称：食品科学作者：王远指导老师：曹讳教授西北大学学位评定委员会二〇－五年 西北大学学位论文知识产权声明书本人完全了解西北大学关于收集、保存、使用学位论文的规定。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可ｙｊｌ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可１＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后适用本声明。苗＾＾指导教师签名学位论文作者签名；；如Ｋ《／。口年月日立如ｊ：年＾月／日西北大学学位论文独创性声明本人声明；所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：之〇＆年＾月日 摘要荆条蜜产量丰富一口感，是我国四大名蜜之，具有独特的香气和，在市场上很受欢迎一一。荆条蜜的色泽般为较浅的號巧色，般的保存条件下比较容易形成结晶，形成的一晶体为白色，质感细腻，荆条蜜的主要产地在我国华北五省的些地区及太行山脉附近区域。本文着重对荆条蜜的理化性质及矿物元素等基础信息、抗氧化活性成分的含量及荆条蜜的抗氧化活性和其对于由扑热息痛诱导的小鼠肝脏的急性损伤的抑制和保护作用进行了分析和研究。１、荆条蜜的理化指标和矿物元素测定：理化指标的测定包括荆条蜜的水分含量、灰分、电导率、Ｈ值、色值、游离酸、内酷和总酸度白质和脯氨酸含量基ｐ；蛋；径甲辕酵的（ＨＭＦ）含量、淀粉酶活性、葡萄糖和庶糖含量的测定Ｗ及１２种矿物；果糖；元素的测定。结果显示所测蜂蜜理化指标均符合我国对于蜂蜜制定的各项标准。荆条蜜－中主要的矿物元素分别是钟、摸、巧、钢，其中钟含量最高，为９４．２２４４．５ｍｇ／ｋｇ，占总矿物元素含量的６８．４％。２－－、荆条蜜总筋和总黄爾含量分别是３４４．１５２０．６ｍｇＧＡＥ／和１９．８３３１．１９ｍＲｕｔｉｎ／。ｇｇｇ？－６／３、荆条蜜均能有效地清除ＤＰＰＨ自由基（４１．７２５５２．１３ＩＣｓｏｍｇｍｌ），总抗氧化能－－亚铁离子的養合活性为３－。力为９６．的１３２．３６Ｔｒｏｌｏｘ／ｋｇ，１．１８３６．３６ｍｇＥＤＴＡＮａｓ／ｋｇ荆条蜜对ＤＰＰ吐的清除能力、荆条蜜的总抗氧化能力与其总酪酸的含量息息相关，相关系Ｒ＝＝数分别为０．９４１５和Ｒ０．９６４９，度表明酷类化合物是荆条蜜主要的抗氧化成分。４、荆条蜜对于由Ｈ２０２诱导的小鼠淋己细胞的ＤＮＡ损伤有很强的抑制作用－（（７０．０９％），并且能够抑制８ＯＨｄＧ的生成３９．２５％），抑制率与蜂蜜所含总龄含量相关。一一５、给小鼠饲喂定量的荆条蜜，段时间后发现小鼠血清的氧自由基吸收能力有所提升（１５．０７％），同时能够极大程度地抑制血清的脂质过氧化（８０．０７％）；饲喂荆条蜜还能够抑制小鼠血清中ＡＬＴ（７５．７９％）和ＡＳＴ（７４．５２％）水平的升高，提高肝脏中抗－３６．１５％）８ＯＨｄＧ生成９６％）。氧化酶的活化减少ＭＤＡ生成量（；抑制（１．关键词：荆条蜜；理化性质；抗氧化；护肝作用ｉ ＡｂｓｔｒａｃｔＭｔｅｘｉｓｔｈｅｄｏｍｉｎａｎｔｓｐｅｃｉｅｓａｎｄｗｉｄｅｌｙ化ｓｔｒｉｂｕｔｅｄｉｎｔｈｅｍｏｕｎｔａｉｎｌａｎｄｏｆｎｏｒｔｈＣｈｉｎａ＾ｖｉｔｅｘｈｏｎｅｙｉｓｏｎｅｏｆ化ｅｆｏｕｒｍｏ巧ｆａｍｏｕｓｈｏｎｅｙｓ，ｂ说ａｕｓｅｉｔｓｆｌａｖｏｒａｎｄｔａｓｔｅｉｓｈｉｇｈｌｙａｐｐｒｅｃｉａｔｅｄｂｙｔｈｅｃｏｎｓｕｍｅｒ：ｌｉｇｈｔａｍｂｅｒｃｏｌｏｒｅｄａｎｄｗｈｉｔｅｃｒｙｓｔａｌｓｗｉｔｈｓｌｉｈｔｌ，ｇｙｓｗｅｅｔｔｉｎｅ．Ｉｎｔｈｉｓａｅｒｔｈｅｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｅｒｔｉｅｓａｎｄｍｉｎｅｒａｌｅｌｅｍｅｎｔｏｆｖｉｔｅｘｈｏｎｅｇｐｐ，ｐｙｐｐｙｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｔｈｅｔｏｔａｌｈｅｎｏｌｉｃｃｏｎｔｅｎｔｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔＴＦＣａｎｄ；ｐ（ＴＰＣ），（）ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｉｎｄｅｘｅｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉａｔｅｄｔｈｅｈｅａｔｏｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｖｉｔｅｘｈｏｎｅｉｎｖｉｖｏｇ；ｐｐｙｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｅｄ．１．Ｔｈｅｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（ｍｏｉｓｔｕｒｅ，ａｓｈ，ｅｌｅｃｔｒｉｃａｌｃｏｎｄｕｃｔｉｖｉｔｙ，ｐＨ，ｃｏｌｏｒ，ｆｒｅｅａｃｉｄｉｔｙ，ｌａｃｔｏｎｉｃａｃｉｄｉｔｙ，ｔｏｔａｌａｃｉｄｉｔｙ，ｒｏｔｅｉｎｒｏｌｉ打ｅＨＭＦ，ｄｉａｓｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｆｒｕｃｔｏ化ｌｕｃｏ化ｐ，ｐ，ｙ，，ｇ，ｓｕｃｒｏｓｅａｎｄｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔｓＫＣａ＾Ｎ本ＭＣｕＦｅＺｎＣｏＭｎＣｒＣｄＰｂｏｆ１４ｖｉｔｅｘ）（，ｇ，，，，，，，，）＊ｈｏｎｅｓａｍｌｅｓｗｅｒｅｉ打ｖｅｓｔｉａｔｅｄ．ＴｈｅｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｖａｌｕｅｓｗｅｉｅｉｎｔｈｅｒａｎｅｏｆＣｏｄｅｘｙｐｇｐｙｇ，ＡｌｉｍｅｎｔａｒｉｕｓＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｓｌｉｍｉｔｓ．ＴｈｅｍｏｓｔａｂｕｎｄａｎｔｍｉｎｅｒａｌｓｗｅｒｅＫＭＣ泣ａｎｄＮａｔｈｅ，ｇ，＾６８－Ｋｍａｄｅｕ．４％ｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｉｓ９４．２２４４５ｍ／ｋ．ｐ－ｇｇ２ｌｈｅｎｏｌｏｎｅｎａｎｄｏａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｃｏｎｅｎｔｏｆｖｉｅｘｈｏ．ＴｈｅｔｏｔａｉｃｃｔｔＴＰＣｔｔｔＴＦＣ１４ｔｎｅｓｐ（）（）ｙ－５２０－１Ｋｓｗｅｒｅ３４４．１．６ｍＧＡＥ／ｋａｎｄ１９．８３３．１９ｍＲｕｔｉｎ／ｋｅｃｔｉｖｅｌ＂ｇｇｇ，ｙｇｐ３．ＡｌｌｖｉｔｅｘｈｏｎｅｙｓａｍｐｌｅｓｈａｄｅｖｉｄｅｎｔｓｃａｖｅｎｉｎｅｆｆｅｃｔｓｏｎＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌｇｇ４－－（１．７２５５２．１３６ＩＣｓｏｍ／ｍｌ）ｆｅｒｒｉｃｒｅｄｕｃｉｎａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｏｗｅｒ６．６９１３２．３６Ｔｒｏｌｏｘ／ｋａｎｄｇ，ｇｐ巧ｇ）Ｆｕ－－－ｅｒｒｏｓｉｏｎｃｈｅｌａｔｉｎｇａｂｉｌｉｔ３１．１８３６．３６ｍＤＴＡＮａ／ｋ）．Ａｏｓｉｔｉｖｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗａｓｙ（ｇＥｉｇｐｗ＝＝ｏｂｓｅｒｖｅｄｂｅｔｅｅｎ化ｅＴＰＣｗｉｔｈ化ｅＤＰＰＨｒａｄｉｃａｌａｉｓｓ０．９４１５ａｎｄＦＲＡＰ民０．９６４９巧（民）（），ｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｒｅｔｈｅｍａｉｎａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｏｆｖｉｔｅｘｈｏｎｅ〇ｐｙｅｘｏｎｅ－４．ＴｈｅｖｉｔｈｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄＨ２〇２ｉｎｄｕｃｅｄＤＮＡｄａｍａｅ７０．０９％ａｎｄｔｈｅｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｇ（）ｇ８－ＯＨｄＧｉｎｍｉｃｅ９．２５％ａｎｄｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｒａｔｅｗａｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｈｔｈｅＴＰＣｏｆｈｏｎｅ．口），ｙｔｙ５．Ｔｈｅｖｉｔｅｘｈｏ打ｅｙｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｓｅｒｕｍｏｘｅｎｒａｄｉｃａｌａｂｓｏｒｂａｎｃｅｃａａｃｉｔｐｙｇｐｙ＇＇＾＊ａｎｄｄｅｃｒｅａｕ－ｍ１５．０７％ｓｅｉｎＣｅｄｉａｔｅｌｉｏｒｏｔｅｉｎｏｘｉｄａｔｉｏｎ８０．０７％ａｎｄｓｕｒｅｓｓｉｏｎｉｎ（）ｐｐ（），ｐｐａｌａｎｉｎｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ７５．７９％ａｎｄａａｒｔａｔｅａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ７４．５２％ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｉｎ（）ｐ（），ｔｈｅｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅａｎｄｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｐｅｒｏｘｉｄａｓｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎ，〇－－－ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ口６．１５％）ａｎｄ８ｈｙｄｒｏｘｙ２ｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｉｉｅ（１９．６／〇）ｆｏｒｍａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｅｄｗａｒａｃｅａｍｏ＾ｉｎｔｏｘｉｃａｔｅｄｒｏｕｉｔｈｐｔｇ．ｐ Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｙｉｔｃｘｈｏｎｅｙ；ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ；ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙ；－ｌｉｖｅｒｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｉｉｉ 目录一第胃绪＆１１．１蜂蜜的理化性质１１丄１气味和味道１１丄２色值１１丄３结晶性和吸湿性２１．１．４２讯１丄５水分含量２１丄６碳水化合物２１丄７矿物质２１丄８蛋白质及氨基酸３Ｕ．９抗氧化活性物质３１丄１０錢甲基慷隆（ＨＭＦ）３Ｕ１３．１酶类１２４．荆条蜜的硏究进展１．３５研究內容和意义．１３１．研究ｇ的５１．３．２研究内容５１．３．３研究意义５＾１第二章荆条蜜的理化指标兰及矿物元轰含量的研究７，２．１材輯与仪器７２丄１实验材料７２丄２实验试剂８２丄３实验仪器８２．２实验方法９２．２．１荆条蜜理化性质测定９２．２．２蜂蜜样品中矿物元素的测定１２２．３结果与分析口２．３．１花粉拖子观察１２２．３．２水分含量１３ｉｖ ２．３．３灰分含量１３２．３．４电导率１４２．３．５Ｈ１４ｐ２．３．６超甲基樣醒含量及淀粉酶活性１５２．３．７色值１５２．３．８游离酸、内醋及总酸度１６２．３．９蛋白质及脯氨酸含量１６、２．３．１０果糖葡萄糖及廉糖含量１７２．４矿物元素分析；１８２．５離１９第Ｈ章荆条蜜的抗氧化活性２１３．１实验材料２１３丄１实验试剂２１３丄２实验仪器２２表３－２主要实验仪器２２３．２实验方法２２３．２．１荆条蜜中总酪含量的测定２２３．２．２荆条蜜中总黄爾含量的测定２３？３．２．３荆条蜜对ＤＰＰＨ自由基清除实验２３２＋Ｆ３．２．５荆条蜜对ｅ络合力实验２４３．２．６数据处理２４３．３结果与分析２４３．３．１荆条蜜中的总厳含量２４３．３．２荆条蜜中的总黄丽含量２５？３３．３荆条蜜对ＤＰＰＨ自由基清除能力２６３＋３．３．４荆条蜜对Ｆｅ还原能力（ＦＲＡＰ）２６２＋３．３．５荆条蜜对Ｆｅ的络合力２６３．４结论２７第四章荆条蜜对ＤＮＡ氧化损伤的巧护作用２８４．１实验材料与仪器２８Ｖ ４丄１实验材料２８４丄２主要仪器２９４２９．２实验方法４２９．２．１着星电泳实验－４３０．２．２小鼠血清８ＯＨｄＧ的测定４．３结果与分析３０４．３．１曽星电泳实验３０－４ＯＨｄＧ的３１．３．２小鼠血清８测定４３２．４结论第五章荆条蜜对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤的保巧作用巧５．１实验材料与仪器３３５丄１实验材料３３５３４．２实验方法５．２．１氧自由基吸收能力汲惊（ＯＲＡＣ）３４２＋５．２．２荆条蜜对Ｃｕ诱导的小鼠血清氧化损伤的抑制实验３５５．２．３扑热息痛诱导的肝中毒模型３５５．２．４肝功能的评价３５５３７．３结果与分析５．３．１氧自由基吸收能力测定（ＯＲＡＣ）３７２＋５．３．２荆条蜜对打１诱导的小鼠血清氧化损伤的抑制作用３８５．３．３荆条蜜对ＡＰＡＰ诱导的小鼠急性肝损伤的保护３９５．４Ｗ论４３５．５结论４５第六胃４６６．１结论４６６．２研究展望４６参考献４８攻读硕±期间取得的科研成果４８致谢４８ｖｉ 西北大学硕±学位论文第一章绪论蜜蜂从植物中采揃花蜜或者蜜露，在体内进行酿造并储存在蜂巢中，形成蜂蜜蜂蜜是一种具有抑茵、抗炎症、抗氧化活牲的天然物质，对于治疗创伤、烧伤及胃溃一、瘍等疾病有定效果。除了直接食用外，蜂蜜在保健品制药和酿造工业等方面有很重要的应用蜂蜜从古代就被当做一Ｗ种药物应用，随着食品科学和药理学的发展，蜂一、蜜的很多功能进步被发现，其药理作用主要是由于蜂蜜中含有杀菌抗氧化的活性物阴质。８０％蜂蜜的主要成分是糖类物质，占总成分的左右，除此么外，还有水分、有机酸ｔｗ及内酷、蛋白质及氨基酸、矿物元素、芳香类化合物、维他命等。不同种类的蜂蜜中各种成分的含量差异很大一，而即使是同种蜂蜜，如果采自不同地区，或者在蜂蜜采蜜ｉｉｉ’时气候有所变化ｔｑ，甚至保存时的差异都会造成蜂蜜中成分和含量的变化。我国对于蜂蜜的成分及其含量有明确的要求，如食品法典委员会（ＣＡＣ）中关于蜂蜜水分含量的一ｔＷ规定中指出：级品的蜂蜜水分含量应不高于２０％（几种特别说明的蜂蜜除外）。国内外关于蜂蜜的研究报道很多，如蜂蜜的理化性质和生物活性、蜂蜜桂物源及地理源的鉴别、蜂蜜渗假鉴别、蜂蜜的抗菌活性及抗氧化活性、蜂蜜的药用价值等。但目前关于荆《蜜的报道很少，对于其理化性质和抗氧化活性的研究不够系统和全面，鉴于送种情况，本文主要研究了荆条蜜的理化性质、矿物元素信息、抗氧化活性及护肝作用。１．１峰蜜的理化性质１丄１气味和昧道一蜂蜜通常有定的气味和味道，气味是由挥发性的芳香物质造成的，这些物质主要来自植物产生的醇类、酵类和酷类等化合物，但在酿蜜的过程也会产生。蜂蜜的香气应一、与蜜源植物致，有的蜂蜜能够从气味判断所属的种类，香气还受到环境条件加工过Ｗ一。程和化存条件的影响，过度加热或化存过久可能会失去其特有的香味些单花种蜂蜜具有其独特的气味和味道，如养麦蜜甜腻，有刺激味；紫云英蜜甜润，略有青草味；ＩＷ要花蜜甜腻，回味重等。１丄２色值一。蜂蜜的色泽般由种类决定，不同的种类，颜色深浅差异很大常见的蜂蜜中，洋槐蜜ｔＷ、油菜蜜呈现白色油菜蜜、荆条蜜呈特浅號巧色麥花蜜、养麦蜜呈玻巧色，；；１ 第一章绪论一不过即使是同种蜂蜜的色泽也不尽相同。蜂蜜的色值可Ｗ利用普方特比色仪直接测＊＊＊一定，或者根据国际照明委员会通用的Ｃ圧Ｌａｂ法来测定。蜂蜜色值也会由于些外源因素ＵＳ的影响而变化，如矿物元素的含量、花粉含量、热处理程度、贬存时间长短等。１丄３结晶性和吸湿性蜂蜜成分中最多的是具有甜味的糖类物质，当蜂蜜在低温下保存时，其中的葡萄糖一一与份子水形成葡糖水化合物结晶析出，结晶性质及产生晶体的状态根据蜂蜜种类的一ｔＷ不同而有很大差异，般而言。当蜂蜜中的果糖、葡，浓度较高的蜂蜜比较容易结晶一。萄糖及水分之间的比值在定范围内时，结晶非常容易自发形成蜂蜜的吸湿性也与糖类的含量密切相关１．１．４ｐＨ一一［Ｗ－５蜂蜜呈酸性，ｐＨ值般为４。蜂蜜呈现酸性是由于其中含有些酸类物质，如有机酸、氨基酸，Ｗ及含量非常少甚至难Ｗ检测到的某些无机酸。其中无机酸有碳酸（也Ｃ〇３）、娜酸（印Ｂ０３）、磯酸（ＨＰ０４）及盐酸（ＨＣ１）等等。有机酸主要是葡糖酸－８％之间和巧樣酸，约占蜂蜜含量的化１％。氨基酸有十几种，它们的总含量在化１０．７，ｔＷ因植物源等因素不同而有所差异。１丄５水分含量－２７％新鲜蜂蜜中水分占到总质量的１２，平均值约为１８％，酿造成熟后的蜂蜜在封盖保存之后，其水分含量不应高于２０％，其含量受到植物源、地理源、气候、养蜂技术。储存条件等因素的影响蜂蜜水分含量趙低，就表明成熟度越高，而所含的营养物质（如酌类化合物、维生素、氨基酸等）的含量也相对比较高，且与未经成熟的蜂蜜比较，更０２ｉＰ，耐储存ｌ，抗菌效果也比较好。因此分含量能够用于进行蜂蜜的等级判定。，水Ｕ．６碳水化合物心Ｗ即糖类物质，占到蜂蜜中％％的成分，有的甚至可Ｗ达到９９％。蜂蜜中含有一７０－８０％的糖类物质５％，其中６Ｗ上为单糖，是蜂蜜的主要成分，而寡糖般是由于酿造ＰＵＳｌ过程中蜜蜂分泌的酶与酸类物质作用形成的。１丄７矿物质，因而不同种类的蜂蜜蜂蜜中存在的矿物质主要来自于植物源，矿物元素的种类及其含量分布有所差异，其地理来源的影响也很重要。主要存在于蜂蜜中的矿物元素：钟２ 西北大学硕±学位论文（Ｋ）、钩（Ｃａ）、钢（Ｎａ）、儀（Ｍｇ）、铅（Ａ１）、铜（饥）、铁（Ｆｅ）、锋（立１）、络（灯）、ＰＷｌ、ｉ、、、、、、。猛（Ｍｇ）媒（Ｎ铅（Ｐｂ锁脚）领（Ｂａ）硫（Ｓ、稱（Ｐ砸（Ｓ句洁倒）等等））））１丄８蛋白质及氯基酸一一般Ｗ胶体的状态存蜂蜜中所含的蛋白质很少，般认为不足化２％，这些蛋白质。，并与戊聚糖等物质聚合形成胶体蛋白蜂蜜中蛋白质分为内源性和外源性在在蜂蜜中，ａ－淀粉酶内源性蛋白质来自蜜蜂的分泌物如；外源性蛋白质来自花蜜或加工贬存过程。蜂蜜中存在的氨基酸的类别及其含量根据蜜源植物的不同及其他一些因素的影响而有一。所差异，其中脯氨酸含量最高，且具有定的抗菌活性和抗氧化活性研究证明，蛋白ｐｗｓｊ质和氨基酸的含量及比值能够作为鉴定其植物源及地理源的依据。Ｉ丄９抗氧化活性物质蜂蜜中含有维生素、氨基酸、厳类化合物及抗氧化酶类物质，赋予蜂蜜抗氧化活性３３３４５３６’一［］Ｐ’１。蜂蜜中酷类物质种类、含量的检测方法般包括福林酪比色法和ＨＰＬＣ法。一些花粉在蜜中蜂蜜中含有维生素是因为蜂蜜采蜜的时候会夹带，而植物的花蜜之中虽一。然也存在维生素，但含量较少这些维生素会在蜂蜜的加工过程中损失些，故而天然Ｐ７工的成品１蜂蜜中维生素含量会略高于经过加。当人体处于良好的健康状态时，体内氧一化和抗氧化是相对平衡的，但些外界因素会打破这种动态的平衡，形成氧化应激的状一态，从而进步引发人体各类疾病的发生。蜂蜜中的天然抗氧化物质则能够清除体内氧化反应产生的自由基等有害产物，预防和治疗与此相关的各种疾病Ｕ．１０餐甲基綜醇（ＨＭＦ）哲甲基様醇，属于巧喃类化合物，在美拉德反应中产生，化学性质较活泼，可发生一加氨、聚合、水解、氧化等反应定剂量时对人体有害。未经加工的蜂蜜中此物质含＞１忽略量可（＾，但由于加工过程中加热会诱发糖与酸发生美拉德反应，而哲甲基慷酵即此一些副产物也会影响蜂蜜的外观和品质＾２’４３１反应的产物，除主要产物外，。蜂蜜中的姪甲基穂酵通常利用比色法、分光光度法或ＨＰＬＣ法检测，根据它的含量高低可Ｗ判别蜂ｔＷ蜜的真伪或新鲜程度，因此ＣＡＣ规定，若其含量高于４０ｍｇ／ｋｇ则不合格。１丄１１酶类一些生物酶蜂蜜中存在，这些酶来源于蜜蜂，在蜜露或花蜜中并不存在。其中过氧化氨酶与蜂蜜抑菌活性相关，通过酶的催化反应形成的活性氧有抑制细茵生长繁殖的作３ 第一章绪论用，因此过氧化氨酶的活性对评价蜂蜜抑苗活性十分重要；淀粉酶由于对温度很敏感，高温条件下易失活所Ｗ在加工时会有所损失，因此可Ｗ作为蜂蜜质量和新鲜度的指标，也能够作为衡量蜂蜜是否慘假的参考依据，评价蜂蜜加工及胆存条件ＣＡＣ规定蜂°ｔＷ蜜淀粉酶活性不应低于８Ｇｏ也ｅ。１．２荆条蜜的硏究进展荆条属马鞭草科牡荆属－，又称荆子、荆棵、荆柴，为落叶灌木，株高约２６ｍ，花瓣呈浅蓝色或淡紫色，叶片为楠圆形，有顶生花序和胶生花序两种形态，顶生花序生长较为旺盛。荆条主要产地位于我国华北、晋陕和迂宁省南部，生长在山谷、河流附近、一坡地或灌木丛。荆条般夏季开花，６月上旬开始开花，７月进入盛花期，花期长迭两、个月民间药方中，荆条被用于治疗腹泻感冒、偏头痛和眼疾，荆条的提取物具５０有抑菌活性和杀虫活性［。荆条蜜富含酶类化合物，具有抗氧化活性和延缓衰老的功效１荆条蜜呈浅號巧色，有独特的清香气味，口感甜润，易结晶，结晶呈乳白色，是我国产一一量较为丰富的大宗蜜源之，也是我国的四大名蜜之。吕文英等人研究了荆条蜜中巧（Ｃａ）、铁（Ｆｅ）、钟（Ｋ）等８种矿物元素的含量，结果证实荆条蜜中钩含量最窩为３４Ｌ８ｍｇ／ｋｇ，其次是钟（２％．１ｍｇ／ｋｇ）王锦梅测一一些基本成分如酸定了荆条蜜的些基本理化指标，如ｐＨ值、水分、电导率和、糖类ＰＳＩ的含量时建立了荆条蜜的指纹图谱信息，确认了荆条蜜的花源标志物为咖啡酸。，同朱晓玲等人对荆条蜜中有机酸的组成和含量进行了分析和比较，结果蜂蜜中５种有ｗｔｉ８－机酸含量在．３１５９．２ｍｇ／ｋｇ之间。一４９２２ｍ／ｋ曹巧等人报道称荆条蜜所含的龄酸含量平均为．５ｇｇ，具有定的清除自由？）基（ＤＰＰＨ，超氧阴离子的能力，发现蜂蜜的浓度较高时的清除能力比较强，并且在一一ｆＷ定的浓度范围内呈现量效关系。对于径基自由基，荆条蜜也具有定的清除能力，然而与浓度之间的关系并不显著。此外，荆条蜜还能够抑制脂质过氧化的发生，这是由于蜂蜜中的酶类化合物能够将氨供给脂类化合物，形成敵基自由基，这种自由基结构稳ｔＷ定。，能减缓氧化链的传递柴霞等人研究了荆条蜂蜜对于果蛹发育的影响一定量，发现在果魄的培养基中加入的荆条蜂蜜，能够使果峭体内的ＳＯＤ活性上升，ＭＤＡ含量下降；提高果蜗的平均寿ｆＷ命和最高寿命，缩短生长周期提高生殖能力，增加产卵量。；４ 西北大学硕±学位论文１．３研究内容和意义１．３．１研究目的本文研究目的在于：（１）测定荆条蜜的理化指标及矿物元素种类及含量，建立完整的荆条蜜理化性质信息；（２）荆条蜜中总獻和总黄砸的含量测定；（３）研究荆条蜜的抗氧化活性；（４）评价荆条蜜保护动物细胞氧化损伤的作用；（５）探究荆条蜜保护动物肝脏损伤的作用机制。１．３．２研究内容。本文主要研究内容包括：（１）测定荆条蜜的理化指标和１２种矿物元素的含量（２）３？荆条蜜的总龄酸含量及总黄丽含量。（）荆条蜜的抗氧化活性，包括ＤＰＰＨ的清除能力实验、总抗氧化能力测定实验（ＦＲＡＰ）Ｗ及亚铁离子整合能力的测定。（４）测定小鼠淋己细胞的８－ＯＨｄＧ含量及利用营星电泳实验研究荆条蜜对Ｈ２０２诱导的小鼠淋己细胞氧化损伤的保护作用。（５）探究荆条蜜对于由扑热息痛诱导的小鼠急性肝损伤的抑制作用及保护机制，内容包括肝脏指数的测定、血清ＡＳＴ和ＡＬＴ酶活性的测定、血清中２＋８－ＯＨｄＧ含量的测定ＧＳＨ－Ｐｘ及ＳＯＤ活性，ＭＤＡ含量测忘评价荆条蜜抑制Ｃｕ；肝脏诱导脂质过氧化的能力；组织病理学实验。１．３．３研究意义我国蜂蜜产量大、种类多，并且是蜂产品出口大国，但是由于质量安全问题频频发生，，蜂蜜品质参差不齐农药、兽药残留量超标严重，蜂蜜Ｗ次充好、Ｗ不成熟蜜充成熟蜜等现象经常出现，并且缺乏科学系统的蜂蜜质量评价控制标准和体系，在国际贸易ｗｓｓ’ｔｉ中频频受挫。为了能够达到国际食品法典委员会（ＡＯＡＣ）蜂蜜标准，我国在近几年亦加强了对蜂蜜及其他蜂产品的管理和控制，然而，低价蜂蜜冒充高价蜂蜜的情况并一没有好转，蜂蜜的品类标签管理也相对比较混乱。荆条蜜是我国大宗出口蜜源之，也是品质较高的蜂蜜，市场上存在，（＾低价蜂蜜如油菜蜜冒充荆条蜜的现象而且由于棱假的蜂蜜在颜色、口感、气味、粘稠度等方面与真蜂蜜很类似，导致消费者很难从感官上进行鉴别，严重损害消费者的权益，干扰正常市场秩序。因此，蜂蜜品种类别的鉴定鉴别工作至关重要，也是我们急需解决的问题。许多研究证实，蜂蜜具有抗氧化活性，主要是由于蜂蜜中含有许多具有抗氧化活性的物质，如醋类化合物、维生素Ｃ、类胡萝ｈ素、氨基酸及抗氧化酶。这些物质在机体５ 第一章绪论一些外源性物质的攻击的氧化平衡中起着重要的作用，造成氧化应激时，，当人体受到会引起损伤脂质、蛋白质等大分子的反应，导致人类巧多疾病如癌症、也血管病、动脉粥样硬化和衰老的发生。蜂蜜中的抗氧化物质能够清除氧化平衡被破坏时所产生的自由，基，如ＤＰＰＨ、ＡＢＴＳ自由基、活性氧等，抑制脂质过氧化的发生，保护细胞免受氧化应激的损伤本文研究了中国不同地区荆条蜜的理化指标、矿物元素、抗氧化活性及对由扑热息痛诱导的小鼠急性肝脏损伤的抑制和保护作用，填补了荆条蜜的基本信息上的缺乏，而、、。荆条蜜理化指标参数，能够为荆条蜜的生产销售加工化藏真伪鉴定提供重要的依据６ 西北大学硕±学位论文第二章荆条蜜的理化指标Ｗ及矿物元素含量的研究蜂蜜中含量最高的成分是糖类物质，其中葡萄糖、果糖及庶糖含量较高，占蜂蜜成一还包含许多其他分６０％Ｗ上，其他的些寡聚糖则含量很少。除糖类物质Ｗ外，蜂蜜中物质如水、、、无机盐、酶类、有机酸类蛋白质、氨基酸、维生素特别是Ｂ族维生素，一些杂质等等色素、激素及。送些成分与蜂蜜的植物源及地理源相关，通过测定蜂蜜的理化指标，能够获得关于蜂蜜感官、物理、化学性质的信息，有助于鉴定和鉴别蜂蜜种类，确定其是否惨假，控制蜂蜜质量。蜂蜜中的矿物元素含量可用于鉴别蜂蜜的地理源，Ｌａｃｈｍａｎ等人测定了Ａ１、Ｂ、Ｃａ等８种矿物元素在２４种捷克蜂蜜中的含量，根据矿物元素的不同来鉴定蜂蜜的种类、地理源和质量本实验研究了不同产地的１４种荆《蜜的理化性质和矿物元素含量。包括：水分含量、灰分、电导率值、ｐＨ、色值、游离酸、内酷、总酸度、蛋白质含量、脯氨酸含量、径甲基辕醒（ＨＭＦ）含量、淀粉酶活性、果糖、葡萄糖、还原糖和穂糖含量。矿物元素测定包括钟、巧、销、姨、铜、铁、巧、钻、儘、络、領、铅１２种元素。２．１材料与仪器２丄１实验材料－。荆条蜜分别采自河北赞皇、山西平定和河南辉县，如表２１所示所有蜂蜜样品在‘－Ｃ冰箱中实验前储存在１８。－表２１荆条蜜样品信息表■—－＇蜂蜜类型植物源主要花粉含量（％）Ｆ１年份１ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘＬ４ｎｅｇｕｎｄｏ７河北赞皇２０１３２Ｍｏｎｏｆｌｏｒａｌ＼＾ｔｅｘＬ８７２０１３ｎｅｇｕｎｄｏ河北勢皇３ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＷｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ７２河北赞皇２０１３４ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ８３河北勢皇２０１３５ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ７７河北赞皇２０１３６ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｕｎｄｏＬ７３河北赞皇２０１３ｇ７ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｕｎｄｏＬ８８山西平定２０１３ｇ８Ｍｏｎｏｆｌｏｒａｌ＼＾ｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ６９山西平定２０１３９ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＹｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ５９山西平定２０１３１０ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｕｎｄｏＬ７１山西平定２０１３ｇ１１ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ．６７山西平定２０１３７ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研究１２ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ７５河南辉县２０１３１１３ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｇｕｎｄｏＬ５７河南辉县２０３１４ＭｏｎｏｆｌｏｒａｌＶｉｔｅｘｎｅｕｎｄｏＬ５５河南辉县２０１３ｇ２丄２实验试剂表２－２主要实验试剂ｉｉ生产厂家邻苯二甲酸氨钻ＡＲ天津福晨化学试剂厂视ＡＲ天津市恒兴化学试剂公司脯氨酸ＢＲ阿拉Ｔ试剂公司可溶性淀粉ＡＲ天津市瑞金特试剂公司亚铁氛化钟ＡＲ天津福晨化学试剂厂乙酸傳ＡＲ天津市福晨化学试剂厂酒石酸钟销ＡＲ天津市瑞金特试剂公司牛血清蛋白ＢＲ北京嘉康源科技发展公司重络酸钟ＡＲ北京市化工厂２丄３实验仪器表２－３主要实验仪器生产厂家ｉｉ数显恒温水浴锅常州朗越仪器制造有限公司ＵＶ－紫外／可见分光光度计７５１ＧＤ美析（中国）仪器公司分光光度计７２１上海精密科学仪器公司电子分析天平ＦＡ１００４Ｎ上海精易实业有限公司ＤＨＧ－９０一鼓风干燥箱３０上海恒科学仪器公司台式高速冷冻离也机ＫＳ５０Ｒ湖南凯达科学仪器厂ＤＺＦ－真空干燥箱１上海福玛实验设备公司色差计ＣＳ＊６００杭州彩谱科技有限公司台式电导率仪ＬＡ－ＥＣ２０北京菲尔伯科技有限公司Ｈ计Ｈ－８２０Ａ重庆欧宇科技有限公司ｐＰ原子吸收光谱仪ＡＡＳ－５０００北京达丰瑞仪器有限公司８ 西北大学硕±学位论文２．２实验方法２．２．１荆条蜜理化性质测定２．２丄１花粉抱子观察和鉴定０５０ｍＬ称量１ｇ荆条蜜，加入的温水使荆条蜜样品稀释。之后将溶解的荆条蜜水ｎ一溶液分别离也（转速设定为３０００ｒ／ｍｉ）１５ｍｉｎ，倒掉上部分约半体积的溶液，加入６ｍＬ＂＝的混合液混匀的乙酸巧硫酸，将荆条蜜水溶液放进８０Ｃ水浴锅中加热１０ｍｉｎ，／ｊ｛结束后再经过一次离也一，再倒掉半上部分溶液，这样重复直到只留下３ｍｌ的荆条蜜溶液，加入化５ｍｌ５０％甘油便于保存。最后在４０倍光学显微镜下观察花粉拖子并计数。２．２丄２水分含量测定准确称取荆条蜜样品１ｇ左右放入已经恒重的小巧巧中，将小巧蜗放入真空干燥箱，一设置真空度为０．０７Ｍａ，加热到６０乂：，保持真空度段时间。加热结束后抒开旋塞ｐ，这时空气经过干燥箱的干燥之后缓缓流入箱内，使干燥箱内恢复常压。打开干燥箱，取一ｔＷ出小巧巧，放入干燥器中干燥段时间后称量，重复Ｗ上操作直到质量不再变化。２．２丄３灰分含量测定先于沸水浴中蒸干，小也加热使荆条蜜样品碳化，之后放置在马弗炉中，在５５０乂：６乂一ｈ灼烧，当媪度降到１５０Ｗ下后（降温过程可Ｗ打开炉口条缝隙，但绝对不可Ｗ直接打开一），小也地取出避免烫伤，尽快移入干燥器中，当样品冷却到与室温致后再称量，称量应尽快进行避免样品再次吸水影响结果的准确性，经反复地灼烧达到恒重后ｔＷ记录结果。２．２丄４电导率的测定准确称取１０ｇ荆条蜜样品，将蒸溜水煮沸排除Ｃ化，冷却后取５０ｍｌ溶解荆条蜜样品，将小烧杯浸没在水浴锅中，２５化恒温水浴３０ｍｉｎ，用Ｄｅｌｔａ３２６电导率仪测定其电ｕ导率［］。２．２丄５Ｈ的测定ｐ根据ＢｅｎｔａｂｏｌＭａｎｚａｎａｒｅｓ等人的方法，取１０ｇ荆条蜜样品，溶解在７５ｍｌ经煮沸冷ＰＳＨＩ却后的蒸馈水中，攪拌均匀后用ｐ酸度计测定。９ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研究２．２丄６色值的测定利用＊＊＊°（：圧Ｌａｂ法测定蜂蜜样品的色值。将蜂蜜样品在２０Ｃ环境中放置２４ｈＷ消除温度对样品测定产生的误差。校正色度仪，在反射模式下设置仪器参数。称取５ｇ’＞’－－蜂蜜样品，ａ蓝值）。，放入样品槽中得到Ｌ（亮度值，（红绿值）和ｂ（黄）２．２丄７游离酸、内醋和总酸度的测定ｉ７ｔｌＳＮ／Ｔ０８５２－２０００中３．５所描述的方法进行测定。根据，用氨氧化钢标准溶液滴定取１０ｇ蜂蜜样品溶解并定容于７５ｍｌ（蒸溜水使用前需煮沸Ｗ排除Ｃ〇２并冷却至室温）。充分攒拌队混匀，将押计电极插入到溶液中，记录Ｈ值。用ＮａＯＨ标准溶液ｐ＝每分钟５ｍｌ的速率匀速滴定。在ｐＨ８．５０时停止，立即加入１０ｍｌ的０．０５ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ，再用同样浓度的ＨＣｌｌＯｍＬ返滴定使ｐＨ到８．３０，根据下面的公式迸行计算：ｘｘＸ尸Ｖｉｃ／ｍｌＯＯ（２．２）＝－Ｘ２（１０．００Ｖ２ｘｃ／ｍｘｌＯＯ（２．３））Ｘ＝Ｘ＋Ｘ３ｉ２（２．４）式中—：Ｘｉ样品游离酸含量，％；Ｘ一－２样品内醋含量，％；Ｘ—样品总酸度，％３；Ｖ—ＮａＯＨ标液的体积ｍｌｉ，；Ｖ—盐酸溶液的体积２，ｍｌ；Ｃ—ＮａＯＨ标液的浓度，ｍｏｌ／Ｌ；ｍ—样品的质量，ｇ。２．２丄８蛋白质含量的测定ｔｕｉ血清蛋白为对照进行实验。采用常用的考马斯亮蓝法，选择牛首先制备考马斯亮蓝溶液－：配置９０％的乙醇溶聽称取１００．０ｍｇ考马斯亮蓝Ｇ２５０，溶解在其中，待溶液澄清后再用此乙醇溶液定容至５０ｍｌ，加入磯酸溶液（浓度为８５％）１００ｍｌ备用，保存时要注意避光。配置荆条蜜样品溶液：５称取荆条蜜样品ｇ，用蒸溜水充分溶解后定容到５０ｍｌ。量取此荆条蜜溶液１．０ｍｌ，加入５ｍｌ之前配置好的考马斯亮蓝溶液，在縱祸混合器上溜合均匀，静置几分钟后于巧５ｎｍ处测定吸光度。绘制出标准曲线，将所测样品吸光值代入标准曲线，计算其蛋白质含量，Ｗｍｇ／ｋｇ表示。１０ 西北大学硕±学位论文２．２丄９脯氨酸的测定ＳＮ／Ｔ－根据０８０５２０００上描述的方法来测定荆条蜜样品中的脯氨酸含量（１）标准曲线：取脯氨酸储液用蒸馈水稀释１０倍后作为标准液备用。在具塞试管中分别加入配制好的上述溶液０、化２、．．．１．０ｍｌ１ｍｌ０．２５，补齐各溶液体积至，加入甲酸－ｌ二ｍ，提前将茹；砸溶于芭醇甲酸中配成溶液备用，在每个试管中加入ｌ．Ｏｍｌ，在水浴锅中用沸水中煮ｌＯｍｉｎ后将温度降至７０化继续发色约１５ｍｉｎ，加入５ｍｌ异丙醇后静置－ｍ３５ｉｎ，于５１０ｎｍ处测定每个试管中溶液的吸光度，绘制标准曲线。－（２）测定：称取５荆条蜜样品，配置到１００ｍｌ。准确吸取荆条蜜样品溶液化５１．０ｇｍｌｍｌ后，移入具塞试管中，加水补充至体积１，按照（１）中的方法进行操作，测定荆《蜜样品的吸光值，算出荆条蜜样品所含的脯氨酸，含量Ｗｍｇ／ｋｇ表示。２．２丄１０哲甲基錶醇（ＨＭＦ）含量的测定ＳＮ／Ｔ０８５２－２０００中根据３．７．３描述的方淑用紫外分光光度计进行测定准确。地称取５荆条蜜样品加２５ｍｌ的水溶解５０ｍｌ．５，然后转移到容量瓶中加入澄清剂（０ｇｍＬ一ｒｒｅｚ０ＬＣａｚ。ＣａＩ巧．５ｍｒｒｅ巧，混匀，然后再用水稀释至刻度可加滴５０％的乙醇溶液防止泡沫产生。过滤并在开始时弃掉１０ｍｌ左右的滤液。在两个相同的试管中均加５ｍｌ滤液。分别装有荆条蜜样品和参照的试管中加入５ｍｌ的蒸溜水或同样体积的ＮａＨＳ化溶液混匀，用参照试管作为对照。测定荆条蜜样品在２８４及３３６ｎｍ波长处的＞０吸光值。如果吸光值．６。，则稀释后再测＝—ｘｘＨＭＦ／１００ｇＡｂｓＡｂｓｌ４．９７５／品（２．５）（２Ｍ３３６）（ｇ样）２．２丄１１淀粉酶值的测定ＳＵ１８５２－２０００３根据ＳＮ．６．２描述的方法测定。，／Ｔ０荆条蜜的淀粉酶活性Ｗ酶值表示指在特定的要求下Ｉｇ荆条蜜样品能够将含有标准溶液中１％的淀粉完全转化的体积（ｍＬ）。称取ｌＯｇ荆条蜜配置０．１ｇ／ｍｌ的溶液，量取１０ｍｌ于含有淀粉液的比色皿，在水浴锅中让其反应１５ｍｉｎ，保持在酶的最佳反应条件温度，每嗎５ｍｉｎ吸取１ｍｌ测定并按下式计算；淀粉酶值＝６６０皿放ｂ吸收值达０．２３５所需的时间（ｍｉｎ）２．２丄１２还原糖、薦糖、果糖和葡萄糖含量的测定利用髙效液相色谱法测定。称取５荆条蜜样品溶于１００ｍｌ的５０％甲醇溶液中，ｇ１１ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研巧ｍ的滤，色ｏｒｂａＳＢ－Ｃ１８（４．６ｘ２５０ｍ进样前用〇．４５ｎ膜过滤谱柱型号Ｚｍｍ５）；进样量，ｐ°１０：水用梯度洗脱方式．／ｍｉｎ。流速；ｌＯｍｌ，：３０Ｃ。如流动相己腊；采柱温２２．２．睡蜜样品中矿物元素的测定－ＯＥＳ法称取００峰蜜样品的矿物元素含量测定采用ＩＣＰ１ｇ样品（精确至化０１）放到聚四氯乙婦消解罐中，加入３ｍｌ３０％的双氧水和３ｍｌ６５％的浓硝酸。将电热板的温度°。进行预处理调至约１２０２５ｍｉｎ，加盖后用微波消解仪将其消解。待消解结束，在流水中冷却到常温常压的状态，开罐，再将消解罐置于１２（ｆＣ高温的电热板，直到没有烟雾；要求溶液呈透明清澈的状态，不可有任何杂质出现；移至聚丙帰瓶中，用超纯水定容到ＳＯ；．ＯｍＬ，然后可进行ＩＣＰ测定。同法制备试剂空白。仪器参数如下区口締－．４縱；（Ｍ１８阻／Ｌ化９９９６巧Ｎａ＾８９－５９２；江Ｂ５２２Ｑｍ汇０．９９９郎ｇ；ｇ；）－－Ｃ互４２２．６７３．．Ｍ．－０；０孤２６２阻ｇ／Ｌ；０９＾９８ｇ３８２９热０５２１０ｍｇ也１（）（）Ｃ杜１３－—也－５％０５四按Ｌ０．９游５Ｆｅ－１６７０．始２５－１０狙０．游躲１口；ｉ巧０拉；岂ｉ）２５９￣．３巧（ＨＬ６７皿／Ｌ０－游９＾Ｃｏ２８．別６００．５９四１ｉｇｉ）ｉ撫（口居也）Ｃ２６７－生ｒ．７１６（ＨＫ５２／Ｌ｝立３Ｍ．５的；Ｑ．齡６５．２０ｍ江９９始９；皿；；（ｇ）（ｇ）２２０－－．３５３００．４８ｍ／Ｌ０３９９９９Ｃｄ２２８．８０２ＯＯＪＯｍ／Ｌ＾；ｇ；）（；ｇ）（２．３结果与分析２．３．１花粉跑子观察一定量的花粉蜜蜂在采蜜时会将花粉带入蜜中，因此蜂蜜中含有，而对花粉进行研一一些信息究能够得到关于蜂蜜的。花粉的植物源应和蜂蜜致，市场上单花蜜的价格差异很大，因此单种植物源花粉所占蜂蜜中花粉数量的比值具有重要商业信息，能够对其一般测定一种蜂蜜中含量最高的某种花粉抱子数和其余的花粉数进行鉴别和鉴定。，对于百花蜜则可测定其中含量较多的几种花粉。对蜂蜜中花粉抱子进行观察和形态鉴别，还能够确保蜂蜜的安全无毒性，因为蜜蜂在采集花蜜时可能会混入有毒的花粉，人食用Ｐ８１后可能引起中毒反应甚至导致死亡。利用蜂蜜抱粉学来可Ｗ获得关于蜂蜜的植物源、地理源和质量等信息。荆条蜜的蜜源植物，荆違Ｔ（ＶｉｔｅｘｍｅｇｕｎｄｏＬ），属于杜荆属，马鞭草科木本植物，别名荆条属马鞭草科牡荆属，又称荆柴、荆棵或荆子本文研究－％－的蜂蜜样品的花粉拖子分析结果见表２１，荆条的花粉抱子含量在５５８９％之间，可Ｗ－认为是单花种蜜，荆条的花粉抱子图像如图２１中所示。１２ 西北大学硕±学位论文ＡｆｍＭ！磯握２－图１荆条花图像荆条花粉抱子图像２．３．２水分含量一、水分含量能够用于评价蜂蜜的质量，是个很重要的标准，蜂蜜水分含量受品种季节、气候、地理位置等等方面因素的影响。由于蜂蜜中水分含量过高会引起其在保存ＰＷ时发酵，生成醇和酸，对保存造成严重的影响，降低蜂蜜的营养价值。因此，国家标＂￡１８７９６－２００５准中ＧＢ／Ｔ１规定：成熟蜂蜜的水分含量不得高于２４％。本实验所测蜂蜜样一－－品的水分含量在１７．，．巧％２１５５％之间，如表２４所示符合这标准。２．３．３灰分含量ｓｓ蜂蜜的灰分含量由于蜂蜜种类ｔｉ、季节、气候、养蜂技术、地理因素不同而不同，且与蜂蜜的蛋白含量及其矿物元素含量相关，也能区别花蜜，能够应用于鉴别蜂蜜真假１４５９１’－％之间和甘露蜜１本实验中测定１４种荆条蜜的灰分含量在０．％％０．６０，并且可Ｗ看出地区的不同会造成一定的差异，但是所有荆条蜜样品的结果都符合食品法典委员会和欧盟的标准（绅．６％）。Ｇ０．Ｒｏｄｒｉｇｕｅｚ等人研究发现委内瑞拉的蜂蜜灰分含量在化－１８９４％０．４９３７％之间，与本实验的结果相比，含量较低，其中的原因可能与诸多因素相关。１３ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研究表２４荆条蜜的ｐＨ、水分含量、电导率、ＨＭＦ和淀粉酶淀粉酶样品ｐＨ水分（％）灰分（％）电导率脚Ｓ／ｃｍ）ＨＭＦ（ｍｇ／ｋｇ）〇Ｇｏ也句（￣￣￣￣￣。３ｂ。＇＾。。ｉ３．５２±０胞１８．３１功．１４〇．４９±０．０４０．１８８±０．０〇ｒ５．９±０．９３０．２±０．７＇＊＊＊＊ｉＯ＊＊２３．５６±０．０３１９．１０ｉ０．０５０．４７功．０１０．１９２±０．００卢Ｓ－Ｓ－Ｓ３２．９±０妒＾。＇＂。．０３３６７±０．０３２１．５５±０．０２．５０±０．０３０．１９８功．００产４．４±０．８３３．３±０．１ｃｄｂ＂＊＞。４３．６０±０胞２０．０５功．１２０．４３±〇．〇３０．２０社０．００１５．３±１．７３１．２±０．３＾＇＊＊＊＂＾＇＇＂５３．７化０．０４２０．８２±０．２０．４８±０．０５０．１８７±０．００１５．３±０．７３２．２±０．５４＇＾＂＊＞ｂ６３．５８±０．０少２０．５７±０．０６０．４２±０．０２０．２０６±０．００１５．０±０．７２９．牡０．５过＊过＞７３．６社０．０４１８．５６±０．５＜０．３６功．０３０．１８３±０．００１５．７±０．５２８．４±０麻ｄ＊＊±±±±８３５１９０００５０．．５站．的Ｉ８．１Ｉ０．０５０．４００．〇ｒ０．１．１．８如３１２助方ｂ沁址＞ｃ９３．６化０．０沪巧．８７±０．２〇０．４化０．０２０．１８７±０．０１失虹０．５３０－７±０乂±＇＊±。＾。（ｂ？１０３．６３０．０４１７乂４０．４９０．４１±０．０１０．１６８功．００１５．１±０乂２６．９±０．５ｄ。？。＂＂１１３．５７±０．０３１７．６７±０．０６０．５４±０．０５０．１８７±０．００１６．９±０．８２７．３±０．６ｄ。。＊±＾２９＇１２３．５１±０胞２０．２９±０．３沪０．５４０．０１０．１６８功．００１６．７±０．８．３±０．？±ｃｄｂ＾（＂ｂ１３３．７２０．０４２０．４９±０．１２０．６０±０．０１０．１５８±０．００１６．１±０．６３０．２±０．２＂＊ａ。。ｂ１４３乂４±０．０４１７．５９±０．１〇０．５７±０．０３０．１仿±０．０〇ｒ７．３±０．７２８．化０．３均值３．６１功．０４１９．３３±〇．２５０．４８功化０．１８４±０．００１５．４±０．５３０．１±０．６２．３．４电导率蜂蜜的电导率根据植物源不同而有所区别，且与矿物元素含量、蛋白质浓度及有机ｅｔｑ０一酸含量相关．８ｍＳ／ｃｍ，食品法典委员会和欧盟规定蜂蜜的电导率不得高于，然而一一Ｗ些单花种蜂蜜如栗子蜜１些研究表明，甘露蜜及、茶树蜜等的电导率值高于这限值，一Ｍａｎｚａｎａｒｅ等人研究－如表明些西班牙单花种蜂蜜的电导率值在０．１６１．５７ｍＳ／ｃｍ之间脚－。本实验中１４种荆条蜜的电导率值为０．１５８ｍＳ／ｃｍ０．２０６ｍＳ／ｃｍ，与Ｍａｎｚａｎａｒｅ等人的结果相比偏低一些研究人员对于荆条蜜，这是主要是由于种类的不同，但与之前其他一的报道结果相比－，数据比较致，如王锦梅测得荆条蜜的电导率在０．１７０．２３ｍＳ／ｃｍ之口３］ｍ间，均值为０．２０ｉｎＳ／ｃ。２．．３５ＨｐＨ值一一蜂蜜的ｐ般呈酸性，这是因为蜂蜜中含有些酸类物质，酸类物质如游离酸、。内醋等含量越高，蜂蜜的ｐＨ越低，此外，蜂蜜的ｐＨ还与其矿物元素含量相关蜂蜜ｉｓｉ’ｓ的Ｈ也会受到蜂蜜采集和胆存过程的影响ｔｉｐ，并且是影响蜂蜜货架期的重要因素。一Ｈ值为３－本实验测得１４种荆条蜜的ｐ．５１３．７２，与之前些研究相符。１４ 西北大学硕：ｔ学位论文２．３．６轻甲基綠醇含量及淀粉酶活性释甲基穂醒是一种对人体有害的物质的感官质量和营养价值有非常，其存在对蜂蜜４２４，３，６２ｔ＾不利的影响，降低蜂蜜的市场价值。蜂蜜中存在许多种类的酶一，其中淀粉酶是种来自蜜蜂的酶，其稳定性较差，有研、究认为这种酶能够作为蜂蜜是否新鲜的指标，同时也为蜂蜜质量是否渗假、是否成熟蜜。、是否经过热处理等信息提供重要理论依据蜂蜜委员会和ＣＡＣ关于淀粉酶值的规°’４５Ｗｌ定中指出不低于８Ｇｏ也ｅ的蜂蜜是合格的。本实验测定荆条蜜的淀粉酶值在°２６－．９３３．３Ｇｃｒｔｈｅ之间、，说明样品均是新鲜未经热加工的。张金振等人研究显示，龙眼－蜜、洋槐蜜、山植蜜、碳树蜜等８种蜂蜜的淀粉酶值在８．０９４．２吧０化ｅ么间，其中荆条°６３［］－ｅ８。蜜淀粉酶值在．１３０．０Ｇｏ化之间２．３．７色值＊＊＊感官评价中，荆条呈白色至特浅現巧色，利用Ｃ圧Ｌａｂ法测定荆条蜜的色值，其‘’’’ａ％ｂ－Ｌ，值见表２５。其中Ｌ值表示蜂蜜颜色的深浅，ａ值（Ｒｅｄｎｅｓｓ）表示红绿色度，’’ｅｓｓ－ｂ值（Ｙｅｌｌｏｗｎ）表示黄蓝色度。根据ＧｏｎｚｄｌｅｚＭｉｒｅｔ等人的理论，规定Ｌ值大于５０的如薰衣草、油菜等蜂蜜为浅色蜜；小于５０的如养麦、專花等蜂蜜为深色蜜本’Ｓ个不实验测定荆条蜜的Ｌ值均大于５０，为５６．０９３至６３．４１３（均值为５８．５２２），来自同地区（河北赞皇、山西平定和河南辉县）的荆条蜜的色度有所区别，但都属于浅色蜜，’‘一－－。、ｂ４．９６至０２８３．２８７５．２１７与感官上的结果是致的荆条蜜的ａ值值分别是．和０至，这分别代表在红绿体系和黄藍体系中，荆条蜜偏向绿色和黄色，这也与实验之前的猜测相符。表２－５荆条蜜的色值沁。１６３．４１技３．１５６－３．６８±０．快２．５４±１．０１＊＊＾＾＂±５－？２如．６５０．２１１４．９６０±０．３６２．４７７±０．４５ｅｆ＊＊±－±０？３５８．０６７５．４１５２．３９７．５１０．２８７±０．５炉＾＂＾５±－±４８．５１３７．１１７３．２４３０．７５３．０化１．４０＊＊±沪－ｉ５６１．拍７１．２８０．８３０．９５１．６６功．３护ｃｆ＾。６％－±０５４．５９３±２．２６８０．６３３．４２．５功．５７ｓ＾ｄ－±４７５６．６７化１．０６〇１．６０３１６７．０３功．賠．ｆｇ＾－±８５７．２０化．０．５８６１．８１００．２６３．３０３±０．７＾６ｆ＊＊＇－９５６１±０１．．０９３±１．１５２．７７７．５５２１７±０．２１１５ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研究＂？±ａ－１０５８３２３８６ｐ０．２８３±０．１２２．８７３±０．８５ｃｆ＾。±－±２１１５８．１９７．４２８０．２８３０．３８．９５±０．５５＊。－±１２５９Ｕ３０．８９００．３知３．；６７±．１虹１３１．２１ｅｆ。±－±１３５６．．５６７０．２５２１如７功．５沪２占８７０．３６ｃｄ？±－±１４５８．５１３０．４０４１．７５００．９５１．７９３功．少±０－±±均值化．５０６１．９０２０．４５２．７９０．５４５２２．３．８游离酸、内醋及总酸度蜂蜜中的酸类物质主要来源于葡萄糖在蜂蜜成熟过程中的氧化产物，由于花源植物、地理条件、采集和加工过程、贬藏条件的不同而有所差异。研究证实蜂蜜中有许多种类的有机酸，如葡萄糖酸、苹果酸等等２－６所示－ｅ／本实验所测荆条蜜的游离酸含量如表，范围在１５．１２０．５ｍｑｋｇ之间，均值为１８．０ｍｅｑ／ｋｇ，送表明这些荆条蜜样品均是新鲜的，没有过度发酵的现象，符合食品法典委员会和欧盟的规定—蜂蜜中游离酸含量不得高于５０ｍｅｑ／ｋｇ，也与之前研究报ｓｓ一ｔｉ致－且样品内醋道。所测蜂蜜的内醋含量为３０．７３３．９ｍｅｑ／ｋｇ，均值为３２．４ｍｅｑ／ｋｇ，含量均高于３０ｍｅｑ／ｋｇ，送说明荆条蜜中内酷含量是总酸度的主要来源。－．５４９．７ｍｅ／ｋ４７．１ｍｅ／ｋ且主要是内醋而非游离荆条蜜的总酸度为４２ｑｇ，均值为ｑｇ，酸，与同年采集的洋槐蜜（均值为４９．６ｍｅｑ／ｋｇ）及油菜蜜（均值为４９．０ｍｅｑ／ｋｇ）相比，总酸度值较低，但在统计学上差异并不显著，因此本文未列出其他两种蜂蜜的酸度值。一些研究也证实之前的，不同植物源的蜂蜜的酸度值有差异２．３．９蛋白质及脯氨酸含量蜂蜜中蛋白质含量很低：，主要来源分两部分植物即花蜜或者花粉等和动物即蜜蜂一６ｔ些分泌物－自身的，通常含量在ｌ５ｇ／ｋｇ之间，但不会超出蜂蜜总质量的化５％＼不同６８［］种类的蜂蜜蛋白质含量和种类差异明显，可能应用于特征蜂蜜的鉴定。此外，蜂蜜的蛋白质含量还受到地理因素、酿制过程、气候条件等多方面因素的影响，加工过程也可－－能造成蜂蜜蛋白质的损失。如表２６所示８８．３４８９１．２４，荆条蜜中蛋白质含量为７一些研究含量较高ｍｇ／ｋｇ，相比其他的，如胡庆银等人测得油菜蜜等６种蜂蜜中的蛋白ｔｗｉ－２８０质含量在１７６ｍｇ／ｋｇ么间，远远低于本实验的值，说明本实验所选择的荆条蜜品质良好，没有经过过度的加工和破坏。蜂蜜中氨基酸含量约占蜂蜜总质量的１％，种类一也比较丰富一，其中脯氨酸的含量般较高，通常是蜂蜜中含量最高的种，至少占到总一氨基酸含量的５０％，甚至在有的蜂蜜中可Ｗ高达８０％Ｗ上，同时脯氨酸还是蜂蜜中唯１６ 西北大学硕±学位论文一１８３能够作为评价蜂蜜是否渗假及质量优劣的氛基酸，般认为蜂蜜中脯氨酸含量低于２８３３７０’１’３ｋ的可能性存在－ｍｇ／ｇ就有慘假。本实验所测荆条蜜的脯氨酸含量为３〇３．２５４３６．３９ｍ一／ｋ１８３ｍ／ｋｇｇ，且均高于ｇｇ，也进步验证了送些荆《蜜样品的真实性，说明荆条蜜是—种质量较高的蜂蜜。表２￣６荆条蜜的游离巧、内醋、总酸度及蛋白质和贿氨酸的含皇游离酸样品内醋（ｍｅｑ／ｋｇ）总酸（ｍｅｑ／ｋｇ）蛋白巧脯氨酸ｍｅ／ｋ（ｑｇ）￣￣￣＂＊＂？±±＊＊＂ｉ１５．１０．５３０．７０．１４２．５±０．５８１８．５６±３．３３０６．２１±１．４８＇ｂ＂＊＂２１８．７±０ｌ３２．６功产４８．０±０．９７８８．３４±１．２５３２５．４４±３．０８．．＇＊。＊＞（±．．如３１７．２０２３２．化〇２．０±１．１８０３．４５±１．２５３０９．１７±１．４沪。＂＂＊＾＂４２０．４功．１３２．５±０．１４９．５±２．３７９１．２２±４．３２３２５．４４±２．２６＞。°＾。５１６．２±０方３２．化０．４４５．１±０．８８５８．８６±２．４９３１３．６１功．８５，ｂ。。。６１７．１±０．１巧．ｆｔｔＯ．ｌ４６．８±１才８％．７０±５．４３３化．５７功．８５。ｂ。ｄ＊＂７１７．化０．３３３．１±０．３化虹２．１８５（Ｘ２３±２．４９３０３．２５±０．８５＞ｂ。。。８１９．３±０．１３２．２±０．３化２±２．少８７８．２９±４．４９３１９．５３±１．７１ｂ＂。＊。９１９．３±０．ｌ３３．９±０．ｌ４９．７＊２．３故１．２４±３．３３１０．６５功．８５。。曲３０６．沪１０１７．似）．１３３．３功．４４７．４±２公８７９．０１±１．２５．２１功８ｂ。＆。１１１９．６±０．ｌ３２．肚０去４８．９±１８８８４．７７±２．４９３３．９６±２．２６．。＂＊２０±３１±ｒ４８８±９±．４１２．５０．２．６０．．１．８７３．９７２沪４１８．６４功．８５±±０妒±＊１３１６．４０．ｒ３２．２±〇立４５．３８的．０９４．９９４３６．３９±１．７ｒ。＊。＊＊±ｒ公±±１．２１４１７．６０．３１．化０４６．０１．６８６６．０６５３８７．５７功．８５．１３±３８．２７５３３５．９０±１．６５均值１．化０２３２．４±０．３４３．７±１．５８５２．２．３．１０果糖、葡萄糖及廉糖含量糖类物质是蜂蜜的最主要的成分，糖类物质包括单糖如葡萄糖和果糖；巧糖如麦芽一ｔＡＵ二ｌ糖、异麦芽糖、曲二糖、松糖、龙胆二糖等些低聚糖等。；还有葡萄糖与果糖一方面是由于花蜜中这两种糖的成分就比较寓是其中含量最多的糖类物质，，另外在蜂蜜酿造的过程中也会将其他的糖类物质分解为单糖，因此在蜂蜜中含量可达９０％左右ｉｓｔ’Ｗ。徐贤的研究表明，荆条蜜中除了上述种类的糖存在之外，还含有极少量如麦芽糖、７ｌｔｌ麦芽丽糖、异麦芽糖、海藻糖、黑曲霉糖和化喃葡萄糖基旗糖等其他糖类。本实验测－３０－．２４％３４．２０％４０．００％４２．８１％得不同地区的荆条蜜中葡萄糖占；果糖含量为；还原糖７０－含量为．４６％７５乂８％。刘子维测得荆条蜜的还原糖含量为㈱４％，与本实验结果相似ｗｔｉ。，说明荆条蜜的成分较为稳定蜂蜜中的庶糖来自于花蜜，在蜜蜂酿造蜂蜜的过程中能够被酶转化形成单糖，即果１７ 第二章荆条蜜的理化指标ｗ及矿物元素含量的研究糖及葡萄糖，因此成熟的蜂蜜蜜中薦糖的含量不应过高，食品法典委员会规定不得超过Ｗ一８％［－。本实验中荆条蜜的廉糖含量在１．０６２．１９％之间，符合这限额，说明本实验所测定的荆条蜜样品均为成熟蜜，质量较好。２－７荆《蜜的果糖表、葡萄糖、还原糖及薦糖含量Ｗｎ果糖（％）葡萄搪（％）还原糖（％）庶糖（％）＊＂？。１４０．４４±０．２８３０．８１±０．２３７１．２５±０．５１１．０９±０．０３＾＇＂。２４０．５８±０．０４拍．７２±０．３少７３．３±０．３８１．４６功．０４ｂｂａｂ？３４１．２８±０．０ｌ３１乂狂Ｏ．ｌｌ７２．９４±０．１２１．３９±０．０７＞＂＊＊？４４１．２４±０．０２３２．４３±０．２２７３．６７±０．２４１．０６±０．０３ａ＂＊＇＊５４０．００±０．０ｉ３０．４６±０．３６７０．４６±０．３７１．２２±０．０６？＊＾°ｂ６４０ｄｂ０．１３４．２０±０．１５７５．０７±０．１６．０４．８７０１．３０±０。。？７４２．８１±０．５９巧．０７±０．１护７５．８８±０．７５１．１４±０．０４＂＂＂班±±±８４２０１００１３０．４０±０．３７７２．４１０．３８１００．０４．．．５ｂ＊＊＝±ｉ＇±＞±９４１．４１０．０２３１．６６０．１７７３．０７０．１９１．４４０．０４ｂ。。＊１０４１．３７±０脱３３．０７±〇．〇６７４．４４±０．０９１．６６±０．０５？。。１１４１．９５ｉ０．０５３３．９７±０．０６７５．９２±０．１１１．６０±０．０８。６？±扣±７±±１２４１．７７０．６５．９６０．０６４．７３０．７１２．０００．０９？６＾？１３４０．５７±０．０１巧．２４±０．２６７３．８１功．３７２．０１±０．０６ａ＂＊？±．．±．±０１４４０．２３００ｉ３０２４〇．１３７０５７．１４２．１９±０．０６±±０±±均值４１．１８０．２５３２．２１：．１９．０．４４１．５００．０５；７３３９２．４矿物元素分析－，蜂蜜中的含有多种矿物元素，其含量约在０．０２１．０３／１００之间其中绅的含量最高，ｇ７２１１ａ－如Ａｌｑｍｉ等人测得沙特阿拉伯的蜂蜜钟含量在２９８．６０４９１．４０ｍ之间，周娟报道麥ｐｐ＾３一花蜜的巧含量占矿物元素的７１％１蜂蜜中的矿物元素可根据含量分为Ｈ类：第类为含量较高的矿物元素：第二类为中等含量的矿物元素；第Ｈ类则是含量低微的矿物元素。矿物元素的种类和含量能够鉴定蜂蜜是否受到环境污染，区别和鉴定蜂蜜的原产地，此、外，蜂蜜中的矿物元素含量亦受到生物因素如植物源蜜蜂种群及气候条件、养蜂技术等的影响蜂蜜中的高含量矿物元素有四种：钟（Ｋ）、钩（Ｃａ）、读（Ｍｇ）、钢（Ｎａ）。本实－ｍ验测得荆条蜜中Ｋ含量在９４．２２４４ｍ／ｋ６／ｋａ．５ｇｇ之间，均值为１１．２ｇｇ；Ｃ的含量在－４７／ｋＭ－１８．４．８ｍ间，均值为３０．９ｍ／ｋ的含量在３．８５９２２０．７２８ｍ／ｋ之间，均ｇｇ之ｇｇ；ｇｇｇ－值为１４２ｍ／ｋ化的含量在６．０３７１８．２４９ｍ／ｋ之间，均值为９．２２３ｍ／ｋ。ｇｇ；ｇｇｇｇ１８ 西北大学硕±学位论文、蜂蜜中的中等含量的矿物元素有五种：铁（Ｆｅ）铜（Ｃｕ）、锋（Ｚｎ）、铅（Ｐｂ）和猛（Ｍｎ）。本实验测得仅采自河北赞皇的３号样中Ｆｅ含量较高为８．４７２ｍｇ／ｋｇ，其余样中均未检出。Ｃｕ、Ｚｎ和Ｍｎ这Ｓ种元素在所有的荆条蜜样品中均被检出，但含量都很－０－－．０２１３０．３４４０ｍ／ｋ０．０３７１１Ｊ６５４／ｋ．００．３６２７ｍ／ｋ。低，其含量分别为ｇｇ；ｍｇｇ和０１５２ｇｇＰｂ在２号样、１０号样和１４号样中未检出，有趣的是这Ｈ个样品分别来自兰个不同的地－区．１８１０．３６３ｍ／ｋ之间。，而除这Ｈ个样品外其含量范围在０ｇｇ蜂蜜中微量元素种类较多，通常包括钻（Ｃｏ）、络（Ｃｒ）、锅（Ｃｄ）、儀（Ｎｉ）、裡（Ｌｉ）、侣（Ａ１）、硫（Ｓ）、神（Ａｓ）等等，本文测定了荆条蜜中＾１上矿，１物元素的含量一其中锅、络和错在些样品中检出。Ｃｄ在除采自山西平定的１１号样外的其余蜂蜜样品－／ｋ－、－１中存在，含量在０．００５１０．０８７２ｍ之间Ｃｒ在河北赞皇的３４号样山西平定的７１ｇｇ；－－号样及河南辉县的１２及１４号样中检出，含量在０．００４０００７９６ｍｇ／ｋｇ之间。Ｃｏ在１５号化００９２－０．０３４５ｍ／ｋ之间，另外两荆条蜜中存在，这五个样品均采自河北赞皇，含量在ｇｇ—山西平定和河南辉县的荆条蜜样品中均未检出个地区，６号样也采自河北赞皇，但、、ｓ。未检出钻，可能是含量过低的缘故。而ＮｉＬｉＡ等矿物元素在所有样品中均未检出送些数据可能说明了荆条蜜中矿物元素的分布与地区不同有关一，然而要得到设结论，还需要进一步的分析和验证。’２．５结论本研究测定了中国Ｈ个地区的荆条蜜的理化指标一些基本物质，包括如水分含量等一些成分如酸性质的测定；、糖类、蛋白质等的含量测定；与蜂蜜品质相关的其他指标如淀粉酶值等的测定。所有理化指标均符合我国国家标准、食品法典委员会及欧盟的标准。此外测定了荆条蜜中１２种矿物元素的含量，其中钟元素含量最高，是荆条蜜中最主要的矿物元素一，而些对人体有害的元素如神、镶、裡等未检出。１９ 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西北大学硕±学位论文第三章荆条蜜的抗氧化活性、蜂蜜中含有种类丰富的抗氧化物质，如维生素酶类和美拉德反应产物等，尽管相一对于蜂蜜的总质量，这些物质的含量很低，但是却具有很重要的些生物活性，是蜂蜜。的价值所在，这些物质之中酶酸类和黄丽类化合物因其较高的抗氧化能力被广泛研究不同种类和地区的蜂蜜因为蜜源植物、气候特征及技术因素等方面的差异，、地理条件Ｍ化学成分及含量也有所不同ｔｌ，因此也表现在抗氧化特征上，有些酪酸类或黄丽类的化合物还可能仅为某种蜂蜜所有或者在这种蜜中含量极其丰富，研究这些化合物对于深入地探寻蜂蜜的健康价值十分重要。在生物代谢中，氧化反应产生具有不成对电子的自由基，送些孤对电子活性强不稳定，因此自由基具有强氧化性，能损伤生物的细胞及组织，引起机体衰老和多种疾病的产生，对生物体的健康十分不利大量研究发现，蜂蜜中含有酪类化合物且这些物质能够贡献质子氨Ｗ破坏自由基的链式反应，清除自由基，保护机体不受氧化损伤的影响呵如Ａｌｚａｈｒａｎｉ等人研究发现麦卢卡蜜、金合欢蜜、薰衣草蜜、野生胡萝ｈ蜜等蜂蜜含有不同含量的酿类化合物Ｌａｃｈｍａｎ等人对４０种捷克蜂蜜进行了研究，发现所研究这四十种蜂蜜均具有对ＡＢＴＳ自由基的清除能力在我国常见的蜂蜜中，值得注一些自由意的是养麦蜜，这种蜜具有非常强的抗氧化活粗，在浓度很低时依然可清除基如ＤＰＰ吐，而浓度升高，清除率随之相应地提高和许多种类的蜂蜜一样，荆条蜜中也含有多种酶类化合物，王锦梅研究了其５ｔ３ＨＰＬＣ－ＥＣＤ指纹啡酸是荆条蜜的花源标志物。图谱，并认为咖本实验测定了采自不同地区的一璧体外的抗氧化活粗测定实１４个荆条蜜样品的总酪酸及总黄爾含量，并利用验研究了荆条蜜的抗實化活性。３．１实验材料３丄１实验试剂－荆条：蜜分别采自河北赞皇、山西平定和河南辉县，如图２１所示。所有蜂蜜样品在‘－Ｃ实验前储存在１８冰箱中。２１ 第呈章荆条蜜的抗氧化活性－表３１主要实验试剂ｍｉｍ生产厂家—Ｘｒ天津市福晨化学试剂厂冰醋酸ＡＲ天津市瑞金特化学品广碳酸纳ＡＲ北京化工厂硝酸铅ＡＲ北京化工厂Ｈ氯化铁ＡＲ天津市科密欧化学品公司酒石酸神钢ＡＲ天津市科密欧化学品公司镑酸巧ＡＲ天津市科密欧化学品公司巧酸钢ＡＲ天津市科密欧化学品公司乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）Ａ民Ｓｉｍａ公司ｇ？ＤＰＰＨＡ民Ｓｉｇｍａ公司ＴＰＴＺＡＲＳｉｇｍａ公司ＦｅｒｒｏｚｉｎｅＡＲＳｉｇｍａ公司大孔树脂ＸＡＤ－２上海摩速科学器材公司３丄２实验仪器表３－２主要实验仪器——生产厂家ＣＳ－旋转蒸发仪ＲＥ５２１上海亚荣生化仪器厂数显恒温水浴锅ＨＨ－２国华电器有限公司－－电热恒湿鼓风干燥箱Ｄ９１４３Ｂ１上海福玛实验设备公司７５－ＧＤ上紫外何见分光光度计ＵＶ１海分析仪器厂电子分析天平ＢＳ１２４Ｓ北京赛多利斯天平公司３．２实验方法３．２．１荆条蜜中总献含量的测定ｔｗｉ参考Ｈｉｍ洗ｕｒｇｌ．等人的方法进行测定。准确称取２０ｇ荆条蜜样品，溶解后稀释，然后定容至１００ｍｌ，将此溶液稀释１０倍后备用。准确移取荆条蜜溶液１ｍｌ与同体积的－ＦｏｌｉｎＣｉｏｃａｌｔｅｕ显色液混匀，接着加入Ｉｍｏｌ／Ｌ的５ｍｌＮａＣ〇３溶液，用蒸馈水将此混合溶液体积补到１０ｍｌ，然后充分混匀。与黑暗环境静置约Ｉｈ，然后测定样品在７６０ｎｍ处的吸光值。将荆条蜜样品溶液换成没食子酸溶液（０．１ｍｇ／ｍｌ），分别加入０、０．１、．．．０．９和１．０ｍｌ。：，按上述方法测定吸光值，绘制标准曲线荆条蜜中的总酪含量计算根据绘２２ 西北大学硕±学位论文＝＝制的标准曲线７１．１７３５ａ：＋０．０９３８於０．９９７５，查，Ｗ没食子酸。，找对应值来表示３．２．２荆条蜜中总黄砸含量的测定＝－准确称取１０．０００至１００ｍｌ，转入ＸＡＤ２２）ｇ蜂蜜，定容树脂化先用２００ｍｌＨＣｌ（ｐＨ洗脱，再用蒸馈水洗脱其中糖类物质，吸耳球挤压至无水，最后用２００ｍｌ甲醇洗脱至‘Ｃ浓无色，提取出样品中的黄丽类物质，于４０缩后用超纯水定容至２５ｍｌ，备用。准确称取经过干燥的芦下ｌＯＯｍｇ，移入预先加入了几毫升甲醇溶液（８０％）的容量瓶里，用乙醇溶液定容，即为芦了标准溶液（Ｉｍｇ／ｍｌ），备用。在相同的具塞试管内分别加入芦下标准溶液０、１０、２０、．．．５０叫，分别加入８０％甲醇溶液４０００、３９９０、３％０、巧７０、３９６０、３９５０冲混匀；加入５％亚硝酸钢４００如混一匀．４ｍｌｌ０％，静置６Ｉｎｉｎ；加入０的Ａｌ（ＮＯ３）３及４ｍｌ４％的ＮａＯＨ，每次加完个试管都需充分混合．２ｍｌ，最后在各管加入１甲醇溶液混匀，静置几分钟待反应结束于４３０ｎｍ＝；０．０００８；？：＋０．〇１３沁＝０．９９８２。测定吸光值，求得标准曲线和相关系数７，将荆条蜜提取的样品溶液稀释至适宜浓度，同样测定其吸光值，计算出荆条蜜样品中的总黄丽含量。３．．２３荆条蜜对ＤＰＰＨ自由基清除实验ｓｔｗ－Ｗｍ参考Ｂｒａｎｄｉａｒｎｓ等人方法，改进后进行。准确称取ＤＰＰ吐５０ｍｇ于甲醇溶液定容到５００ｍｌ备用，用前需稀释。吸取１ｍｌ不同浓度的荆条蜜样品，加入４ｍｌ经过稀释的甲醇溶液，在室湿环境中避光放置６０ｍｉｎ，测定５１６ｎｍ处的吸光度。荆条蜜对？ＤＰＰＨ自由基的清除率按照Ｗ下公式计算：＝Ａ－Ａｘ清除率（％）（（〇ｉ）／Ａ〇ｌ〇〇）Ａ—〇未加入样品溶液的吸光值；Ａ—ｉ某时刻荆条蜜样品的吸光值。能够清除ＤＰＰ＆达到５０％时需要的荆条蜜样品的量，即为荆条蜜的ＩＣｓｏ值。ＩＣｓｏ。值越小，说明抗氧化活性越大。实验重复三次］＋３．２．４荆条蜜对Ｆｅ还原能力（ＦＲＡＰ）实验ｔＷ参考Ｂｅｎｚｉｅ等人的方法并适当进行改进．４ｍｌ。准确吸取经稀释的荆条蜜溶液０，’加入１．８ｍｌＴＰＴＺ工作聽混合后置于巧Ｃ反应１０ｍｉｎ，５％ｒｎｎ测定吸光值。用不同浓度的Ｔｒｏｌｏｘ制作标准曲线，荆条蜜样品中的结果表示为ｍｇＴｒｏｌｏｘ／ｋｇ蜂蜜。２３ 第Ｈ章荆条蜜的抗氧化活性２＋３．２．５荆条蜜对Ｆｅ络合力实验：分别吸取０、６０、１２０、１８０、２４０、３００、３６０叫浓度为ｍ／ｍｌ的Ｎａ＾ＥＤＴＡ标准曲线１ｇ溶液置于小试管内１ｍＭ的硫酸亚铁溶液０．１ｍｌ和Ｉｍｏｌ／Ｌ的Ｆｅｒｒｏｚｉｎｅ溶液０．３，，加入叫用甲醇定容至３ｍｌ，于５６２ｍｎ处测定溶液的吸光值，ＷＮａＥＤＴＡ的含量作为横坐标，ｓ。吸光值作为级坐标，绘制标准曲线２００准确吸取经适当稀释的荆条蜜样品叫，置于小试管内，按照上述方法进行试验，２＋测定吸光值后根据标准曲线计算荆条蜜对Ｆｅ的络合力。３．２．６数据处理实验结束后，利用Ｏｒｉｇｉｎ软件进行分析。３．３结果与分析３．３．１荆条蜜中的总齡含量酷酸类化合物是蜂蜜中具有生物活性的重要成分一，主要包括敢酸、黄丽Ｗ及些衍生化合ＰＷ物。蜂蜜中含有很多种酶酸类化合物，已经被确认的有几十种之多。厳类化合物具有抗炎、抗氧化等作用，能够清除体内的自由基，维持氧化应激的平衡，保护也脑血管健康一，对于衰老和高血压、癌症等疾病也有定抑制作用。本实验测得不同－）地区的荆条蜜均含有獻酸类化合物（表３３，其中１０号样品中总酶含量最低为３４４．１±１３．２ｍｇＧＡＥ／ｋｇ；２号样品中总酪含量最高为５２０．６±２０．４ｍｇＧＡＥ／ｋｇ；其均值为４３２．０±２４．５ｍｇＧＡＥ／ｋｇ。由于蜂蜜的总酷酸含量与蜂蜜种类、地理因素、气候条件、收获时的技术水平及化存环境有关，各蜂蜜样品的总酷含量有所差别，曹巧等人研究了５ｔＷ种蜂蜜的抗氧化活性，其中荆条蜜的酪酸含量为巧５．５４ｍｇ／ｋｇ，与本实验结果相比较低，逸种结果可能由于地理源、收获季节、贬存时间及条件的不同等原因造脱但也反映出本实验所选择的荆条蜜活性较高。２４ 西北大学硕±学位论文表３－３荆条蜜的总巧含量、总黄困含量及抗氧化活性总廚含量总黄爾含量铁络合；ＤＰＰＨ（１ＣＦＲＡＰ扣如ｇ（则，样品（ｍｇ（ｍｇｍＤＴＡ－（ｇＥｍｇ／ｍｌ）Ｔｒｏｌｏｘ／ｋｇ）ＧＡＥ／ｋｇ）Ｒｕｔｉｎ／ｋｇ）Ｎａｓ／ｋｇ）￣￣＊＂。＊。１５１８．７±１８．２３０．１４±４．１３４３．０８６＾２．３１２１３２．３６±９．２８３５．５化３．４５＾＂°ａａ２５２０．６±２０４１．１９±３９４１．＾１巧±：３±３．３．２７２５１．９２４．５４７．３Ｓ５．６９４．２？３＂＊？３４９８．１±１７．３巧．３２±２．９４４４．５３２±２．１２２１２４．０４±７．２９３４．８９±２．６３＊＊＾＞＊＞４４７３．社１５．２％．６３±３．〇ｒ４６．３２８±２．４５８１２２．３９±８．１２３４．３７±４．１３ａ＂￣ａ＊＊±±±＊±±５４始．ｌ２５．２２７．７５３．２８４５．２２６３．０１８１２６乂７６．１９３２．２５５．１１＂＂＊＇＂±２±＇＾±＊±＊６４６５．４２．１２６．６７±２．７４４６．６５３１．９３４１１９．２５８．５３３１．５６３．６８。ｂ化＇＊＇＂７３７８．１±１７．７２Ｕ８±３．５６５０．５１２±３．４１９１０７．２６±５．３２３１．１８±４．２９？＞＂＇＾ｂｂ±１９２２４９．１±５２７９±８３９４．５．５．０６±２．５０３２３．３２８１０８．２虹．９３３．３．２Ｓ＾＾ａｂ＊＊？±．５０±±９３６７．２１４８２０乂９±２．１９．９２４±２．７Ｓ＞８ｌ〇４．５８７．２３３５．１７２．１８＂？＂１０３４４．１±１３２１９．８５±３０３５２０８１巧０９６６９±６２３６１化．．．．１５．．２．＇＾＊＞＊１１３巧．化１５．ｒ２０．０３±４．２８５２．１３６±２．５２８１００．１７巧．８１３４．０４±４．７７ｂ６ｂ＊ａ１２４０７．化１８．３１９．８３巧．２９４７．０１２±２．０５７１１０．３２±８．２９％．３６±３．７５＞±４＞±ｂ±＊±＇＊１３４１９．牡２０．６２１．０６．２６４７．５１２１．９２６１１７．３７５．９１３３．４３４．１８＊。＊±＾±ｂ±ｂ±１４４１４．７±２３．７２０．５８４．８２４８．５１３１．７６８ｉｎ．２９４．２９３５．７５２乂６±±均值４３２．０２４．５２４．０７０．５４４７．巧狂２．３４７１１５．０２±６．１５３４．３±３．９６３．３．２荆条蜜中的总黄丽含量－ＣＣ－Ｃ黄丽类化合物的基本结构可Ｗ表示为６３６，两个六碳环分别是苯环和丽环，在一动植物中均有分布，是种天然的物质，还可Ｗ结合形成巧，，自然条件下化游离态存在是自然界中具有生物活性的成分。根据在胥架结构的Ｈ碳链或者六碳环上结构的不同，黄厕类化合物可Ｗ分为许多种类，比如黄厕、黄烧厕、查尔丽等等。黄厕类化合物具有许多对生物体有利的功能活性如抑菌、抗炎、抗氧化、提高免疫力等等，其中抗氧化活性是由于结构中存在ａ－不饱和化喃厕，根据结构中所含哲基的数量及位置的不同，这，ｐ一般来说些化合物的抗氧化活性也有所区别，，径基含量越多，抗氧化能力越强。常见、于蜂蜜中的黄丽化合物有三十多种，譬如芹菜素白杨素、澄皮素、袖皮素、抽皮素、８２－８５懈皮素ｔｌ、山奈酪等等本实验测得不同地区的荆条蜜中均含有黄丽类化合物，其中１２号样品中总黄厕含量最低，为１９．８３±３．２９ｍｇＲｕｔｉｎ／ｋｇ；２号样品中总黄厕含量最高，为３１．１９±３．２９ｍｇＲ山ｉｎ／ｋｇ；这些荆条蜜总黄丽含量的均值是２４．０７±０．５４ｍｇＲｕｔｉｎ／ｋｇ。与荆条蜜的总酥酸含量对照发现，挂些荆条蜜样品中，２号样品的值均最高，１０号样品的总酪酸含量最低一，而总黄丽含量仅仅高于１２号样品，且十分接近。进步研究发现，２５ 第ｓ章荆条蜜的抗氧化活性一这两者之间有＝定的关系，相关系数Ｒ０．８９７５。．３．３．３荆条蜜对ＤＰＰＨ自由基清除能力？相对较为稳定在众多种类的自由基中ＤＰＰＨ，属于有机氮类化合物，易溶于有机溶－剂，溶解后呈深紫色，而抗氧化剂可与其反应将其转化为呈黄色的联苯苦味耕，故可作为衡量抗氧化剂抗氧化活性高低的标准，由于这种方法简单且分析快速，用途也较为８２￡１？。广泛，因此本实验选择此方法评价荆条蜜的抗氧化性质由于荆条蜜对于ＤＰＰＨ自由基的清除活性高低会受到蜂蜜样品浓度的影响一，因此本文采用半抑制率来评价这活性－。１４种荆条蜜样品的实验结果见表３３，所测的所有荆条蜜样品对于ＤＰＰ吐均有抑制作用．１．９２４ｍ／ｍｌ，其中２号样品ＩＣｓｏ值最低为４１７２紅ｇ，而这个样品的总酥酸含量在所有荆条蜜中也是最高的±２一；１１号样品ＩＣｓ值最高为５２．１３６．５２８ｍ／ｌ进ｏｇｍ，经步分析可知荆条蜜对ＤＰＰ吐自由基清除活性的＝ＩＣｓｏ值与其所含总酪含量的高低相关（民０．９４１５），说明酪类化合物是影响蜂蜜具有对ＤＰＰＨ？自由基清除活性的重要因素。荆条蜜中的总驗一，则相对应的ＩＣｓｏ值越低些研究酸含量越高，而其抗氧化活性也就越高，这与么前的Ｓ一ＰＩ结果相致。此外，地理源、气候和环境条件及收获的季节也会影响蜂蜜对其的清除口３饼］活性。３．３．４荆条蜜对Ｆｅ３＋还原能力（ＦＲＡＰ）ＦＲＡＰ实验是一种直接测定待测样品抗氧化活性高低的方法，其原理是在低阳环境中，具有抗氧化活性的化合物可还原Ｈ咐巧Ｈ嗦Ｈ价铁离子，转化为王化巧Ｈ嗦二价铁离子，由于转化的产物呈藍色且在５９３ｎｍ波长处有较强吸收，因此可Ｗ根据吸光值高低评价抗氧化物质的抗氧化活性，用Ｔｒｏｌｏｘ作为标准品进行比较，可Ｗ衡量荆条蜜３＋样品的抗氧化能力由实验结果可知，所测荆条蜜对Ｆｅ的还原能力不同，其中１号样品最强为１３２．：３６ｍｇＴｒｏｌｏｘ／ｋｇ；１０号样品最弱为９６．６９ｍｇＴｒｏｌｏｘ／ｋｇ。荆条蜜的总酷ＲＡＰ值相关系＝含量与其Ｆ数民０．９６４９，表明荆条蜜对的还原能力与其总酪含量相关，这是因为酌类化合物有强还原性，能够提供电子，表现出抗氧化的能为。２＋３．３．５荆条蜜对Ｆｅ的络合力一些过渡金属离子能够催化脂质过氧化反应，引起多不饱和脂肪酸的氧化，而抗氧。化剂的存在能够络合过渡金属离子，阻碍反应的进行Ｆｅｒｒｏｚｉｎｅ能够络合二价铁离子形成蓝色产物，当体系中存在抗氧化剂时，抗氧化剂也会络合二价铁离子，但形成的产物是无色的，因此能够通过色泽的深浅程度评价体系中抗氧化剂的浓度，当抗氧化剂浓度２６ 西北大学硕：ｔ学位论文－越大，络合能力越强时，体系的蓝色也就越浅。ＷＥＤＴＡＮａ２作为标准，可Ｗ比较样品Ｐ０２＋１络会能力的强弱。本实验测定荆条蜜均具有络合Ｆｅ的能力，其中１２号样品络合力±－最强，为３６．３６３．７５ｍＥＤＴＡＮａ２／ｋ７号样品络合力最弱为３１．１８±４．２９ｍｇＥＤＴＡｇｇ；－Ｎａｋｓ／ｇ，并且与荆条蜜的总酿含量无相关性，这可能是由于样品中酷酸化合物的结构也￡Ｗ所不同，，因此络合能力也不同另外，蜂蜜中还存在其他的抗氧化成分，如维生素Ｃ、、。酶类物质美拉德反应产物等，这些物质的存在也会影响蜂蜜的络合能力３．４结论采自不同地区（河北赞皇、山西平定和河南辉县）的１４种荆条蜜的总酷含量存在（３４４－±２０＜０１±１５２０４ｍ明显差异．０５），其含量从．３．２．６．ＧＡＥ／ｋ黄丽含量范ｐｇｇ不等；总＝３－±ｍ／ｋ围为１９．８３±．２９３１．１９３．２９ｇＲｕｔｉｎｇ，且两者之间相关系数民０．８９７５。所有的荆条蜜３＋？样品均具有抗氧化活性，其中荆条蜜对ＤＰＰＨ的清除作用、荆条蜜对于Ｆｅ还原能力（ＦＲＡＰ）均与荆条蜜样品中的总敵酸含量呈现正相关关系，相关系数分别为０．９４１５和２＋化９６４９。送表明了酪类化合物赋予Ｔ荆条蜜的抗氧化活化而荆条蜜对Ｆｅ的络合能力与总酷含量之间无相关性。，送可能是由于不同结构的酪类化合物络合能力不同２７ 第四章荆条蜜对ＤＮＡ氧化损伤的保护作用第四章荆条蜜对ＤＮＡ氧化损伤的保护作用一些含有孤立未成对价电子的原子或分子一自由基是，送些孤立的电子很活泼，经些因素如箱射、氧化物、药物、病茵、炎症等的刺激产生。经过多年的研究和医学的发展，发现自由基过多会引发脂质过氧化反应，改变细胞及其膜的功能，诱发炎症、衰老及多种疾病其中活性较强的哲基自由基会诱导细胞内大分子如ＤＮＡ的氧化损伤ｓｓ一ｔｉＤＮＡ，改变的结构并产生些产物损伤生物体的健康一章研究可知根据上，荆条蜜具有抗氧化性，体外试验中测定的抗氧化性是基于抗一氧化剂与自由基之间直接的化学反应，通常是针对某特定的自由基来衡量抗氧化能力ｓｔｑ的强弱。由于体外和体内环境有很大差异，生物体内无时无刻不在进行着各种复杂的生化反应，抗氧化剂进入生物体后受到吸收和代谢的影响，会发生结构和性质的改变，影响其抗氧化活性，因此，体外的抗氧化活性强弱并不能完全代表抗氧化剂对生物体的实际作用。由于关于荆条蜜保护ＤＮＡ氧化损伤的报道很少，因此本实验Ｗ荆条蜜为例，小鼠作为实验样本，利用＆〇２建立对渐己细胞的氧化损伤模型，评价荆条蜜保护小鼠ＤＮＡ氧化损伤的功能。４．１实验材料与仪器４丄１实验材料２０健康的昆明小鼠，体重约ｇ，均为雄性。所有实验小鼠均饲养在塑料鼠盒中，每’３－４只０－２Ｃ笼，要求饲养室温度在２５，空气湿度７０％左右，昼间照明１４ｈ，小鼠自由采食，饮水充足。表４－１主要实验试剂ｍ］ｉｉ生产厂家￣￣雨ｄＧ试剂盒ｉＷｆ南京建成生物工程研究所有限公司＆〇２ＡＲ天津市福晨试剂厂－二钢ＡＲＥＤＴＡＳｉｍａ公司ｇ浓盐酸ＡＲ北京化工厂ＴｒｉＡ民Ｓｉｇｍａ公司ＡＲ十二焼基肌氨酸纳Ｓｉｇｍａ公司大孔树脂ＸＡＤ－２上海摩速科学器材有限公司２８ 西北大学硕±学位论文４丄２主要仪器表４＞２主要实验仪器——生产厂家数显恒温水浴锅ｆｉＷ国华电器有限公司ＲＥＣＳ－旋转蒸发仪５２１上海亚荣生化仪器厂电子分析天平ＢＳ１２４Ｓ北京赛多利斯天平公司高速台式离也机ＴＧＬ１６Ｇ上海安亭科学仪器厂－真空干燥箱ＤＺＦ１上海福玛实验设备公司多功能酶标仪虹ｆｉｎｉｔｅＭ２００ＰＲＯ光栅型北京富众科技发展公司萊光显微镜ＢＫ－ＦＬ重庆奥特光学有限公司４．２实验方法４．２．１誓星电泳实验参照Ｓｉｎ班的方法进行实验。取小鼠新鲜血液约１ｍｌ，立即加入１００山抗凝剂，迅速摇匀后取上清液缓慢加入底层已加入１ｍｌ细胞分离液的离也管中，３５００ｒ离屯２２＋２＋ｍｉｎ，取中间层置于１．５ｍｌ离也管中，加入无Ｃａ、Ｍｇ的ＰＢＳ缓冲溶液定容至４ｍｌ，１５０化离也８如１１，弃去上清液，留约１１１１１。取１０＾ｌｌ在显微镜下观察，使血球计数板里３－４。每个格子中细胞数约在个，否则重新离也至符合要求取实验所需细胞液于离也管中，在恒温巧＾条件下进行水浴，注意避光，３０ｍｉｎ后取出。将载玻片放在酒精灯火焰上方加热至不灼烧手背的程度，吸取３０叫正常炼点的琼脂糖（ＮＭＡ）涂在上面，并用盖玻片铺平。水浴结束后，吸取４０＾１１低烙点的琼脂糖（ＬＭＡ）加入细胞液中，吸打一几次混匀，放置１０ｍｉｎ后再涂层ＬＭＡ。将载玻片在细胞裂解，趁热铺平在载玻片上液中避光浸泡２ｈ后进行电泳，要求电压设置为２５Ｖ（调节溶液体积使电压在开始时不８Ｖ）电流－低于１；１００ｍＡ。电泳结束后分别用ＴｒｉｓＨＣＩ和无水己醇按照规定的时间浸泡，擦干后避光放置几个小时，之后用ＥＢ染色剂进行染色，并于巧光显微镜下观察和拍照，拍摄的照片用ＣｏｍａｔＡｓｓａｙＩＶ薑星图像软件进行分析。表４－３着星电泳实验模型组别处理细胞量灿）＆〇如１）邱Ｓ仙）荆条蜜／龄酸糾）Ｉ对照２００３００口模型２０１０２００田高剂量蜂蜜２０１００２０ＩＶ低剂量蜂蜜２０１０１０１０Ｖ酪类化合物ｍ１＾＾＾２９ 第四章荆条蜜对ＤＮＡ氧化损伤的保护作用蜂蜜中酶酸提取方法：称取１０蜂蜜样品３０ｍｌ蒸馈水中，缓慢多次地加入ｇ，溶于－２大孔树脂的玻璃柱ｘ装有ＸＡＤ（３０２．５ｃｍ）中，流速控制在１滴／Ｓ，用蒸馈水洗至无色，挤压至无水滴流下后，用２００ｍｌ甲醇洗脱，收集液体并旋转蒸干，用ＰＢＳ缓冲溶液定容至２ｍｌ，备用。４－ＯＨｄＧ的测定．２．２小鼠血清８８－。１ｌ根据小鼠楚基脱氧鸟巧的试剂念说明进行采集小鼠新鲜血液约ｍ，室温下静置约１５ｍｉｎ后３５００ｒ爵。。将试剂盒中标准品按照要求分别稀释至６０ｎｇ／Ｌ、４０ｎｇ／Ｌ、２０ｎ／Ｌ、１０ｎ／Ｌ和５ｎ／Ｌ。分别设空白孔和待测样品扎。将４０叫的样品稀释液和１０ｉｌｇｇｇ＾’Ｃ的样品加入样品孔中混匀后反应，需在预先设置为巧恒温水浴锅中避光进行，注意水浴锅的温度需要均匀。倒掉板中溶液，，用滤纸吸干后加入稀释过的洗涂液洗緣反复°一Ｃ５次后加入酶标试剂５０叫，最后次洗干净后，将其放置在预先设定为３７的水浴锅中反应，之后按照顺序依次加入试剂盒中各试剂并测定样品在４５０ｎｍ处的吸光值。４４＂表８ＯＨｄＧ实验模型￣￣组别细胞量帅＆〇如１）ＰＢＳ（曲荆輸酷職Ｈｉ）￣￣ｉ＾１０１０Ｍ０ＩＩ模型１０１０２００ｍ蜂蜜低剂量１０１０１０１０１０１００２０ＩＶ蜂蜜高剤量４．３结果与分析４．３．１誓星电泳实验本实验研究了不同浓度的荆条蜜及荆条蜜提取的筋酸类化合物对小鼠淋臣细胞氧－。Ｉ）化损伤的保护作用，其结果如图４１当在细胞中加入Ｈ２０２后，模型组（ＧｒｏｕｐＩ小鼠淋己细胞誉星尾ＤＮＡ含量增加，与对照组（ＧｒｏｕｐＩ）对比呈显著差异（＜０．０５），ｐ送表明小鼠淋己细胞受到氧化损伤，且ＤＮＡ断裂严重。在小鼠淋己细胞中加入经适当稀释的荆条蜜溶液后，蜂蜜组（Ｇｒｏｕｐｍ＆ＩＶ）的小鼠淋己细胞誉星尾ＤＮＡ含量与模型组相比显著减少（ｐ＜０．０５），且呈现剂量效应，即高剂量蜂蜜（７０．０９％）对于氧化损伤造成的小鼠淋己细胞着星尾ＤＮＡ含量上升的抑制率高于低剂量蜂蜜（５３．４４％）。酶类化合物組（ＧｒｏｕｐＶ）小鼠淋己细胞的尾ＤＮＡ含量较模型组显著降低，抑制率为８５．３％，这表明荆条蜜极大程度地保护了ＤＮＡ不受损伤且送种保护作用来自蜂蜜中的酌类化合。物，这对于生物体的健康具有重要的意义３０ 西北大学硕±学位论文６。＾咖Ｉ：；ＨＩ—麵ＬｉｌｌｉＧｒｏｕｐＩＧｒｏｕｐｌｌＧｒｏｕｐ山ＧｒｏｕｐＩＶＧｒｏｕｐＶ－图４１小鼠淋己细胞营星电泳尾ＤＮＡ含量作为生物体中最重要的遗传物质，ＤＮＡ的氧化损伤情况能够反应生物体内的抗氧化水平和健康状态。活性氧中的＆〇２能够经蔡顿反应产生。扎用Ｈ２０２处理小鼠血清２＋入细胞Ｆｅ－０Ｈ攻击小鼠淋淋己细胞，使其能够通过细胞膜进，与细胞内的反应，产生己细胞ＤＮＡ，使单链或双链的ＤＮＡ断裂，改变碱基的配对，导致遗传信息不能正常表达，引发各类疾病研究发现蜂蜜中的酪类化合物能够通过细胞膜与々Ｈ反应形成对２＋生物体无害的化合物，起到清除自由基的作用。此外，酶类化合物亦可通过塾合Ｆｅ，Ｐ４＾！降低Ｆｅｎｔｏｎ反应的速率，减少ＯＨ的产生，从而起到抑制ＤＮＡ氧化损伤的作用。４－Ａ完本实验的结果如图１，正常的细胞内ＤＮ整，少量的拖尾（小于５％）可能是（ｒｏｕ实验过程中的损伤所致，而加入＆〇２的小鼠细胞ＧｐＨ）拖尾率高达６１．５％，说明ＤＮＡ被破坏。加入荆条蜜能够抑制小鼠淋己细胞的ＤＮＡ损伤并且呈现剂量效应，低剂量蜂蜜（Ｇｒｏ叩ＩＩＩ）和高剂量蜂蜜（ＧｒｏｕｐＩＶ）组的小鼠细胞的拖尾率分别降至２８．０％和１８Ｉ类化合物．０％，而直接加入酶酸的效果更佳明显（８．８％），这可能是由于劳Ｊ条蜜中的酷对－ＯＨ具有清除活性，而淋己细胞作为生物体组织器官细胞的标志细胞，能够反应机体的生理状况，因此荆条蜜能够提高生物的抗氧化能力，具有抑制活性氧自由基诱导ＤＮＡ氧化损伤的作用。４－．３．２小鼠血清８ＯＨｄＧ的测定８－ＯＨｄＧ测定结果如图４－２－小鼠血清。对照纪（ＧｒｏｕｐＩ）血清中的８ＯＨｄＧ的含量／ｍ－较低仅３．２５３４ｎｇｌ，当在血清中加入＆〇２后，模型组（Ｇｒｏｕｐｌｌ）血清中的８ＯＨｄＧ含量上升到７．５０１８ｎｇ／ｍｌ，这表明ＤＮＡ氧化损伤产物积累量增多，ＤＮＡ损伤严重。在－小鼠血清中加入经适当稀释的荆条蜜溶液后，荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＩＩＩ＆ＩＶ）血清中的８ＯＨｄＧ％－含量与模型组相比有所降低，且高剂量的蜂蜜（ＧｒｏｕｐＩＶ，３９．２５）对小鼠血清８ＯＨｄＧ３１ 第四章荆条蜜对ＤＮＡ氧化损伤的保护作用含量上升的抑制率高于低剂量蜂蜜（ＧｒｏｕｐＩＩＩ，１４．１２％），这表明荆条蜜的加入使ＤＮＡ的氧化损伤程度降低。－ＯＨ攻击ＤＮＡ产生氧化损伤时当，与脱氧鸟昔反应形成氧化产物，形成的产物不一Ｃ－８仅自身威胁机体还能够进步诱导位和邻近的碱基对变化，引发基因突变从而造成ｗ一ｉｔＡ氧－包括癌症在内的些疾病的发生。在ＤＮ化损伤氧化产物有许多种，其中８ＯＨｄＧ产量较多，性质稳定不易受其他物质的影响，已被广泛用于检测体内ＤＮＡ氧化损伤，ｗｗ一ｔｉ成为反应体内氧化应激状态的生物标记物。些体外研究发现，蜂蜜能够清除Ｈ２＆，２＋Ｕｉｓｓｉ而蜂蜜中的酌类化合物能够藝合Ｆｅ，清除々Ｈ，抑制＆〇２诱导的ＤＮＡ断裂。因此可Ｗ推测荆条蜜抑制Ｈ８－ＯＨｄＧ水平的上升可能是由于２化诱导的ＤＮＡ氧化损伤产物荆条蜜中含有多种酌类化合物所致。由于本实验测定的是小鼠血清中的８－０風Ｇ的含量８－ＯＨｄＧ的，而产生场所在细胞，经过ＤＮＡ修复酶切除后释放于血液中才能被检测，因此ＤＮＡ的修复能力可能影响血一８－ＯＨｄＧ的。清中水平，关于此机理，还需要进步的研究和探索垂ＧｒｏｕｐＩＧｒｏｕＩＩＧｒｏｕ证ＧｒｏｕＩＶｐｐｐ图４－２小款血清８－ＯＨｄＧ含量４．４结论ＤＮＡ８－ＯＨｄＧ且荆条蜜能够抑制小鼠淋己细胞曽星尾含量和血清中水平的上升，与荆条蜜的浓度呈正相关的关系，而从荆条蜜中提取的酷酸的效果更佳，这表明荆条蜜一定的保护作用对于Ｈ２０２诱导的ＤＮＡ氧化损伤具有，送种保护作用可能是由于蜂蜜中的齡类化合物具有清除细胞内活性氧，抑制ＤＮＡ氧化损伤的能力。３２ 西北大学硕±学位论文第五章荆条蜜对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤的保护作用一ＡＰＡＰ押热息痛是种在不需要处方而在市场上很容易买到的镇痛类药物，，简称一在低剂量时，般认为服用此药物是安全的，然而当超出推荐剂量或者长期摄入时，它ＰＷ。能够引起肝脏和肾脏等器官的损伤，严重时会发展为肝脏衰竭，甚至导致死亡对于ＡＰＡＰ引起肝脏损伤的研究已经持续了几十年，目前认为其机制十分复杂。当低剂量摄入时，约９０％Ｗ上的扑热息痛由肝脏代谢形成无毒的产物经腎脏排泄，其余的极少量的ＡＰＡＰ则可能形成Ｎ－石酷苯醒亚胺（ＮＡＰＱＩ），这种产物具有很强的活性，能在体内与谷脫甘肤结合，清除出人体。然而当人体大量或长期低剂量地摄入ＡＰＡＰ时，产生过量ＮＡＰＱＩ，耗尽肝脏内的Ｇ組储备后，与细胞膜结合，引起脂质过氧化，使细胞内的巧ＰＷＷ离子平衡被破坏，导致肝细胞内细胞核、细胞质和线粒体损伤，致使细胞死亡。线粒体是细胞内合成能量的细胞器，提供代谢所需的绝大部分能量，因此线粒体的损伤导致细胞能量耗竭，致使细胞功能发生障碍。同时，线粒体损伤时生成过氧化物及超氧胃化物等自由基，对组织造成氧化损伤。由于ＡＰＡＰ诱导的小鼠急性肝损伤与人体类ｎｗｉ似，通常作为实验中肝损伤造模的药物。蜂蜜由于富含酷类化合物和黄丽类化合物而具有抗氧化活性，对氧化损伤引起的一些慢性疾病具有治疗作用一，些研究也发现蜂蜜对于肝脏的氧化损伤具有保护作用＞３８４１１〇４４〇，９［］ｍｅｄ等人。Ｍｏｈａ发现蜂蜜能够抑制烟草诱导的小鼠体内组织的氧化应激，减少小鼠生殖细胞的损伤，提高小鼠体内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量和谷脫甘肤过氧化１胃－Ｐｘ）的活性二酸物酶（说Ｈ。卢巧等人发现蜂蜜能够降低小鼠肝脏的丙（ＭＤＡ）含ＷＵ量，。，并能够抑制小鼠肝线粒体的肿胀保护肝脏一荆条蜜是我国北方主要蜜源植物之，浅聽巧色，清甜易结晶，结晶呈现白色，一。有特殊香味，是四大名蜜之荆条蜜营养丰富，含巧量高，具有很好的保健功能，其ＷＷ０１酪酸和黄爾含量较高，具有抗氧化活性。目前还未见荆条蜜保护动物巧损伤的报道，因此本研究通过氧自由基吸收能力实验和脂蛋白过氧化实验，探索荆条蜜影响小鼠体内抗氧化能力的功效一些指标测定进一；通过对小鼠血清或肝匀浆中的步评价荆条蜜保护动物肝脏损伤的贡献。５．１实验材料与仪器５丄１实验材料。健康的昆明小鼠，体重约２０ｇ，均为雄性所有实验小鼠均饲养在塑料鼠盒中，每３３ 第五章巧条蜜对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤的保护作用‘－４只－Ｃ０％左右４ｈ笼３，要求饲养室温度在２０２５，空气湿度７，昼间照明１，小鼠自由采食，饮水充足。－表５１主要实验试剂—ｉｉ生产厂家费光素钥ＡＲ阿拉了试剂公司ＡＡＰＨＡＲ阿拉了试剂公司ＡＳＴ及ＡＬＴ试剂盒９６Ｔ南京建成生物工程研究所有限公司ＭＤＡ及ＳＯＤ试剂盒９６Ｔ南京建成生物工程研究所有限公司ＧＳＨ－Ｐｘ及８－ＯＨｄＧ试剂盒９６Ｔ南京建成生物工程研究所有限公司ＤＰＰＨＡ民Ｓｉｇｍａ公司朴热息痛ＡＲ上海晶鍊生化科技股份有限公司５．１．２实验仪器表５－２主要实验仪器ｍｉｉ生产厂家数显恒温水浴锅ｆｉｗ国华电器有限公司ＣＳ－旋转蒸发仪ＲＥ５２１上海亚荣生化仪器厂电子分析天平ＢＳ１２４Ｓ北京赛多利斯天平公司窝速台式离也机ＴＧｋｌ６Ｇ上海安亭科学仪器广紫外可见分光光度升Ｌ５Ｓ上海精科分析仪器广多功能酶标仪虹ｆｉｎｉｔｅＭ２００ＰＲＯ光栅型北京富众科技发展公司巧光显微镜ＢＫ－ＦＬ重庆奥特光学有限公司５．２实验方法５．２．１氧自由基吸收能力测定（ＯＲＡＣ）ｉｕｔ参考Ｃａｏ等人的方法地行实验。萊光素钢溶液的配置：称取０．１９ＰＢＳ试剂，用ｇ缓冲液定容至５０ｍｌ，避光保存，需要使用时小也取出，在暗处稀释至适宜浓度后备用。ＡＡＰＨ溶液配置：用ＰＢＳ缓冲溶液配置，注意小也加热Ｗ充分溶解。、在９６孔板中，依次加入经稀释的荆条蜜样品溶液２５叫小鼠血清２５叫和巧光素钢溶液１５０叫，除空白组外，均加入ＡＡＰＨ溶液２５叫Ｗ启动反应。每隔１０ｍｉｎ在４８５＂和一５３５ｎｍ出测定次炎光的强度，实验和测定时均需要将温度温度保持巧Ｃ，测定前应振荡孔板使其均匀。标准曲线绘制：用Ｔｒｏｌｏｘ标准溶液代替样品，按照上述方法操作，对巧光浑灭曲线３４ 西北大学硕±学位论文下面积（ＡＵＣ）进行分析。５．２．２荆条蜜对Ｃｕ２＋诱导的小鼠血清氧化损伤的抑制实验１１３［参考Ｊｏｎａｔｈａｎ等人的方法墙行实验。吸取２．５ｍ拖当稀释的小鼠血清，加入适宜浓度的荆条蜜溶液混匀，用ＰＢＳ缓冲溶液定容至５ｍｌ，Ｗ未加入铜离子的为空白对照，阳性对照组和样品组加入１２０＾１１１１〇１／１＾的硫酸铜溶液５０叫，混匀后于２３４１１１１１处每２０分钟测一定次吸光度，Ｗ样品与空白的吸光度之差来表示。注意每次取出样品进行测定的时间不可过久，并且测定时仍需保持温度，结果用Ｐｒｉｓｍ软件分析。５．２．３扑热息痛诱导的肝中毒模型Ｉ（ＩＩ）ＩＩ将小鼠随机分为６组，分别为空白组（），模型组，阳性对照组（Ｉ），低（ＩＶ－）（Ｖ）（ＶＩ），５３剂量荆条蜜组，离剂量荆条蜜组，和荆条蜜组每组１０只。按照表进行连续１０周的灌胃。表５－３抹热息痛诱导的巧中毒模型．．、，ｍＨＭＡＰＡＰ的剂量（／ｋ）蜂蜜店＾物剂量（ｇ／ｋｇ）ｇｇｉＷｍ／／ＩＩＡＰＡＰ０．４／阻ＡＰＡＰ＋水飞药素０．４０．０８ＩＶＡＰＡＰ＋低剂量蜂蜜０．４１０ＶＡＰＡＰ＋高剂量蜂蜜０．４４０ＶＩ高剂量蜂蜜／４０血清制备：采血后离也，注意离必时温度不宜过髙，取上清液，注意勿将血清污染，备用一。巧脏切片制备：弓陶法处死小鼠，迅速解剖并取出肝脏用生理盐水洗带切取：小块置于１０％甲隣溶液中。肝匀浆制备将剩下的肝脏组织制成１０％的匀浆，用ＴＧ＾１６Ｇ‘高速离也机离也，温度应设置为４Ｃ。５．２．４肝功能的评价５．２．４．１肝脏指数肝脏指数＝（％）巧脏质量（ｍｇ）／小鼠体重（ｇ）５２．４．２血清ＡＬＴ、ＡＳＴ活性测定ＡＬＴ活性测定：按照操作表，分别在测定孔、对照孔中依次加入基质液、经稀释的血清和苯巧液，反应结束后加入稀释至０．４ｍｏｌ／Ｌ的氨氧化钢溶液０．２ｍｌ，轻轻摇动孔板，室温静置１５３５ 第五章荆条蜜对拌巧息痛诱导的小鼠巧损伤的保护作用ｍｉｎ５１〇１１１１１，查，测定的吸光值，［＾＾色对吸光值（测定孔减对照孔）标准曲线，求得相应的ＡＬＴ活为单位。标准曲线绘制；Ｗ２ｐｍｏｌ／ｍｌ的丙酬酸销标准液代替样品，得标准曲线：３２＝＝－９ｘ＋４８３６２ｘ－０９５６２ｘ１５６１．９９７５。ｙ．．０．３０巧，ＲＡＳＴ活性测定：与ＡＬＴ活性测定步骤类似，将ＡＬＴ基质液换为ＡＳＴ基质液即可。３２＝－＝－＋７标准曲线；ｙ６３００２ｘ９８２４ｘ８８．８２ｘ（Ｕ５４，Ｒ０．９９９６。５、、－．２．４．３ＭＤＡＳＯＤＧＳＨＰｘ活性测定ＭＤＡ含量测定：一。试剂；化２Ｍ的乙酸盐缓冲液试剂二；ｌＯｎｍｏｌ／Ｌ的四氧基丙婉。试剂Ｈ；义１％十二烧基硫酸销（ＳＤＳ）。试剂四：化８％硫代己比妥酸溶液。－按照表５４依次加入各试剂。将试剂泡匀，放置在密闭的容器中煮沸，保持比同时注意避光，反应结束后，测定巧２ｎｍ处的吸光值。＝－心化给量（ｍｎｏｌ／＾ｒｏ／）（样品吸光值标准吸光值）ｘ标品浓度Ｘ稀释倍数（５．１）表５＞４ＭＤＡ含量测定操作表ｍｉ（ｍｌ）空白管样品管标准管１００．０５０．１０．２１巧匀浆，，，一．５１试剂１．５１．５二／／０次．０５０．．１０２试剂，，．２０试剂Ｓ０．２０．２１．５１试剂四１．５．５ＰＢＳ０．８０．８，０．７５，０．７，０．６０．８，０．７５，０．７，０．６ＳＯＤ活性测定：按照试剂盒说明书的方法配制缓冲溶液、底物胆备液、酶胆备液、酶稀释液和醇工作液。按照操作表，分别在对照孔、对照空白孔、测定孔和测定空白孔依次加入待测样’Ｃ水浴锅中品、酶工作液、酶稀释液和底物应用液，混匀后放入３７，体系反应进行３０ｍｉｎ后于４５０ｒｎｎ测定吸光值。ＷＳＯＤ的半抑制率即体系中的抑制率为５０％时对应的酶量作为ＳＯＤ的活力单位（Ｕ）。３６ 西北大学硕±学位论文ＧＳＨ－Ｐｘ活性测定：按照试剂念说明书的方法配制各试剂。按照组织中操作表的步骤进行各项反应，分别测定各样品的结果，然后计算。说Ａ酶活性＝标准品浓度Ｘ今邸样量Ｘ样本蛋白浓度０公－柄准ｆｔ空白０口值反应时间（５．２）Ｓ．２．４．４组织病理学观察取小鼠肝脏姐织用生理盐水洗净后，放入盛有１０％甲酵溶液的容器中２４小时，根据组织病理学中的常规方法，将組织切片包埋进石蜡中，切５＾１１１１薄片，制成切片。用苏木精和伊红染色（ＨＥ染色）进行组织病理学分析。每个样本切片均置于１００倍镜下观察。５血清－ＯＨｄＧ的测定．２Ａ５小鼠８参考４．２．２中描述的方法进行。５．３结果与分析５．３．１氧自由基吸收能力测定（ＯＲＡＣ）一氧自由基吸收能量测定（ＯＲＡＣ）实验是种评价天然的抗氧化物抗氧化活牲的常用方法，适用于测定如生物样本等样品氧化和贡献电子的能力。此实验根据氨原子的转移途径，抗氧化剂与底物均可与过氧自由基反应，通过测定底物的浓度可Ｗ评价抗氧化ＵＷ剂的抗氧化活性。本实验Ｗ巧光素钢（ＦＬ）作为巧光物质，ＡＡＰＨ作为含氮化合物，ＡＡＰＨ会释放过氧自由基，与ＦＬ反应生成无癸光的产物。当具有抗氧化性的物质存在时，这些物质与ＦＬ优先反应形成竞争，因此ＦＬ与自由基的反应会减弱，这样使巧光巧灭速率减缓因为使巧光浑灭的底物被抑制，从而我们可Ｗ根据癸光强度评价抗氧化能力的高低。其反应机理如下：ＡＡＰＨ＋２０一ＯＯ．２２Ｒ５．１（）ＲＯＯ．＋ＡＡＰＨ一５Ｐｒｏｄｕｃｔｓ．２（）ＦＬ？一＋民ＯＯＨ牛民００Ｆ５．３（）？－＋Ｆ一ｄｕＦＰｒｏｃｔｓ（５．４）ＡＨ＋ＲＯＯ？一．＋Ｒ５ＡＯＯＨ．５（）Ａ．＋Ａ■一Ｐｒｏｄｕｃｔｓ片巧由于ＯＲＡＣ实验实质是氨原子转移的氧化过程，在实验环境下，茨光衰减的速率仅－与ＡＡＰＨ浓度相关，不受萊光素钢的浓度影响，而ＡＡＰＨ般不会与样品反应或者干扰３７ 第五章荆条蜜对朴热息痛诱导的小鼠肝损伤的保护作用ｓｗｉ此？样品与英光素钥的反应，因，此方法能够直接获取抗氧化剂清除民００自由基能力的信息。－荆条蜜的氧自由基吸收能力测定结果如图５１所示，曲线显示巧光强度随时间增加的变化，荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＶＩ，荆条蜜４０ｇ／ｋｇ体重／ｄ）小鼠血清的曲线下面积显著大于空一白对照组（Ｇｒｏｕｐｌ），增加率为５７．７５％，该表示灌胃定量的荆条蜜能够显著提高小鼠血清的抗氧化活性。近些年，０ＲＡＣ法广泛应用于测定食品及其成分、植物、生物产品等多类物质的抗氧化活性，在蜂蜜和蜂产品的抗氧化活性测定中也有很多先例，如Ａ－ｌｖａｒｅｚＳｕａｒｅｚ等人研究了２５种不同种类蜂蜜的抗氧化活化发现所测的蜂蜜均具有这种１Ｗ１能力，并且与蜂蜜中含有的总醇呈正相关性。＋ＡＡＰＨ—ＧｒｏｕＩｐ■Ａ■ＧＴｒｏ叩ＶＩ＿１。。：＼＾ｉ０－古来？？？？？？？？■■＇？■ＩｉＩＩＩＩＩ０２０４０６０８０１００Ｔｉｍｅｍｉｎｕｔｅｓ（）５－（）图１荆《蜜对氧自由基吸收能力测定ＯＲＡＣ实验５．３．２荆条蜜对Ｃｕ２＋诱导的小鼠血清氧化损伤的抑制作用低２＋密度的脂蛋白化ＤＬ）极易在过波金属离子尤其是Ｃｕ作用下，与自由基反应形－ＬＤＬ－亡）ＯＸＬＤＬ能够破坏细胞膜成氧化性低密度脂蛋白（ＯＸ，，导致细胞死，对生物一体造成损伤。些抗氧化剂如维生素Ｅ、酶类物质能够抑制ＬＤＬ的氧化，保护细胞免受氧化损伤的影响，防止由于氧化损伤引起的各种疾病ｉＷ过量或长期摄入ＡＰＡＰ－，能够引起氧化应激ｏｘＬＤｉｊ，在巧脏等组织内形成，因２＋２＋此本实验利用Ｃｕ诱导ＬＤＬ发生过氧化反应，通过测定ＬＤＬ与Ｃｕ氧化反应中产生的共辆二婦的含量－２所示。荆，来评价荆条蜜对于小鼠肝脏氧化损伤的影响，结果如固５３８ 西北大学硕±学位论文《蜜组（ＧｒｏｕｐＶＬ荆条蜜４０ｇ／ｋｇ体重／ｄ）抑制小鼠血清脂蛋白氧化的能力显著强于对照组（ＧｒｏｕＩ），增大率为８０．０７％。这说明荆条蜜能够显著延缓和抑制血清脂蛋白的氧ｐ化变性，这种作用归功于蜂蜜中的酶类化合物氨，当其进入生物体内，能够清除过氧化一２＋自由基，从而阻碍过氧化链式反应的进行；另方面，酪类化合物能够蟹合Ｃｕ形成还原性复合物，减少了过渡金属离子金属催化ＬＤＬ的氧化反应的速率。—Ｉ—ＧｒｏｕＩｐＧｒｏｕｐＶＩ０．巧〇？－片ｎｎ／。－／．１０ｊＵ０－．０８ＪＩ／＾：。＇。４／／奉專車车车本本＾－ｉ０．００ｋ■０－．０２＇■＇■Ｉ１？１１１１１１０５０１００１５０２００２扣Ｔｉｍｅｍｍｕ（怡ｓ）２＋图５－２荆条蜜对Ｃｕ诱导的小鼠血清氧化损伤的抑制作用５．３．３荆条蜜对ＡＰＡＰ诱导的小鼠急性巧损伤的保护５．３．３．１肝化指数有研究表明，生物体摄入ＡＰＡＰ后，体内ＮＡＰＱＩ形成量增加，诱导氧化应激状态，ｓ＇Ｐｉｅｓｉ－导致肝损伤。本实验评估了小鼠的肝脏指数，结果如图５３。模型组（ＧｒｏｕｐＩＩ）小鼠的肝脏指数为５．５１，与对照组（Ｇｒｏｕｐｌ）的值（３．６３）相比显著增大（ｐ＜０．０５），这表明ＡＰＡＰ导致小鼠的肝脏出现肿胀，肝脏的损伤严重。荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＩＶ＆Ｖ）小鼠７的肝脏指数与模型组相比有所降低，分别为４．和４．４２。本实验使用水飞葫素作为阳性对ＩＩＩ照组的药物，Ｇｒｏｕｐ的肝脏指数为４．１９，说明了水飞药素能够有效降低ＡＰＡＰ诱导的小ｍ一鼠肝脏邮大。水飞药素（Ｓｉｌｙａｒｉｎ）属于黄丽类物质，般可Ｗ从这种植物的果实中进ｔｗｉ行提取，因其具有保护巧细胞的功效而常用于肝中毒的治疗，本实验中将其效果与荆条蜜进行对比，Ｗ期荆条蜜表现的保肝作用得到衡量。从实验结果分析，高剂量的荆条蜜和水飞药素对于小鼠肝脏肿大的抑制能力类似，均能显著降低（ｐ＜０．０５）小鼠肝脏指数。３９ 第五章荆条蜜对扑热息痛诱导的小鼠肝损伤的保护作用ＣＬｉｉＩｉｉｌｉｉｉｌＧｒｏｕｐＩＧｒｏｕｐＩＩＧｒｏｕｐ田ＧｒｏｕｐＩＶＧｒｏｕｐＶ图５－３小鼠斤脏指数ｉＳ．３．３．２巧ｊ条蜜对小鼠血清ＡＬＴ、ＡＳＴ活性影口向ＡＬＴ和ＡＳＴ存在于肝细胞中，当肝细胞被破坏，细胞膜功能障碍时，会释放到血液中，因此血清中这两种酶活性通常被认为可Ｗ评价肝损伤黄金指标模型组（ＧｒｏｕｐＩＩ）小鼠血清ＡＬＴ（１７３．４１Ｕ／Ｌ）及ＡＳＴ活性（６６６．６３Ｕ／Ｌ）与对照组（ＧｒｃｍｐＩ）相比（分别为巧．８９和４０．５６Ｕ／Ｌ），都表现出显著地提高，増加倍数分别为６．２２和１６．４３，送充分说明小鼠的肝脏损伤情况相当严重。然而与模型组相比，荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＩＶ＆Ｖ）的值有明显地降低，其中低剂量荆条蜜组（Ｇｒｏ叩ＩＶ）对ＡＬＴ和ＡＳＴ活性抑制率分别为６６．９２％和６６．３６％；高剂量荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＶ）对ＡＬＴ和ＡＳＴ活性抑制率分别为７５．７０％和７４．５２％。这表明荆条蜜能够抑制ＡＰＡＰ诱导的小鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ活性升高，而Ｖ，并且对这两种转氨酶的影响程度也较为相似高剂量的荆条蜜（Ｇｒｏｕｐ）抑制效果更好，其抑制率接近阳性对照组（Ｇｒｏｕｐ阻），分别为８０．３５％和８４．９７％。４０ 西北大学硕±学位论文ＩＩＡＬＴＰ＾＾ＡＳＴ一７００－？１６。。＾；ＩｒＩ；ｒＩ．２＾…ｒｉｉ歲１。。－ｉ藻］ｂｉ謬ＧｒｏｕｒｏｕｒｏｕＧｒｏｕｒｏｕｐ１ＧＩＩＧｐ皿ｐＩＶＧＶｐｐ图５￣４小鼠血清ＡＬＴ和ＡＳＴ活性３Ｄ酶－５、Ｇ白勺．３．３ＳＯＳＨＰｘ酶活性及ＭＤＡ含量本实验测定了一些氧化应激的指标ＭＤＡＤ，包括肝匀浆中的含量、肝脏中ＳＯ酶活－－性及ＧＳＨＰｘ酶活性，Ｗ评价小鼠肝脏的氧化损伤情况，结果如图５５。由结果可知，模６３－型组（ＧｒｏｕＩＩ）的小．４７％）ＳＯＤ１０．３５％）ｐ鼠肝脏ＭＤＡ水平显著增加（，（和ＧＳＨＰｘ（２３．５０％）的活性降低。而荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＩＶ＆Ｖ）小鼠的氧化应激指标与模型组相比Ａ水平降低〇－（１／，１５４１，ＭＤ３．４４〇３６．％）ＳＯＤ活性升高（．８９％，９．５％）ＧＳＨＰｘ活性；；升高（８．４６％，２５．６５％）。当灌胃的荆条蜜剂量较高时对氧化损伤的保护作用就更好，荆－条蜜对肝匀浆中ＭＤＡ和ＳＯＤ的影响力与水飞劑素（Ｇｒｏｕ，ｐＩＩＩ）类似而对于ＧＳＨＰｘ酶活２７性的提高作用甚至更强，是其的２．倍。这对于今后荆条蜜在保肝方面的应用提供了十分有利的证据，使荆条蜜有望应用于保健品或药物的治疗中。ＭＤＡ是脂质过氧化反应的重要产，物，能够破坏细胞膜的完整性导致细胞死亡，ｉｕｔ一ＭＤＡ的水平能够反应氧化损伤的程度ｉ。ＳＯＤ是细胞内种重要的抗氧化酶，具有清除自由基，抑制脂质过氧化反应的功能，其活性高低能够反应生物体抗氧化能力的大小１２２￡１ＰＡＰ时。当生物体摄入大量Ａ，体内储备的ＧＳＨ量就会不足，而未能进行代谢的活性产物ＮＡＰＩ与生物大分子反应，Ｑ，并产生大量活性氧破坏细胞膜结构，最终造成细胞氧一Ｇ細化损伤。ＧＳ化Ｐｘ是种作用于使其与＆化反应减少活性氧生成的酶，其活性能够ｎｗＫ一间接反应ＧＳＨ的水平ｔｌ。本实验结果表明荆条蜜能够使肝脏受到定损伤的小鼠体一些酶的活性内ＭＤＡ减少同时提高因损伤而减弱的，表明荆条蜜具有降低ＡＰＡＰ诱导的４１ 第五章荆条蜜对扑热息痛巧导的小鼠肝损伤的保护作用小歸肝损伤程度，抑制小鼠肝脏脂质过氧化反应的作用，能够起到保护巧脏活性的效果，。尤其是当灌胃的荆条蜜剂量较高时，其效果更佳，甚至可与水飞药素媳美Ｗｉｉｉ１咖自ｉｉｉ＊１１１Ｇｍ叩１ＧｒｏｕｐＵＧｒｏｕｐｌＵＧｒｏｕｐＪＶＧｒｏｕｐＶＧｒｏｕＩＣｒｏＩＩＧｒｏｕｌＵＧｒｏＩＶＧｒｏｕＶｐ叩ｐ叩ｐ＾－ｌｌｉＨｉｌｌＧｒｏｕ］ＧｒｏｕＩＩＧｒｏｕｐ田ＧｒｏｕｐＩＶＧｒｏｕＶｐｐｐ－图５－５小鼠肝匀浆ＳＯＤ酶活性ＳＨ－Ｐｘ酶活性及ＭＤＡ含量血清８ＯＨｄＧ含量、Ｇ；小鼠Ｓ血清－．３．３．４算（Ｉ条蜜对小鼠８ＯＨｄＧ含量的影口向８－ＯＨｄＧ含量测定结果如图５－５Ｄ所示ｒｏｕ小鼠血清，。其中模型组（ＧｐＩＩ）的含量为４．４３ｎｇ／ｍｌ，这个值与对照组（ＧｒｏｕｐＩ）相比（３．０７ｎｇ／ｍｌ）有明显地增加；荆条蜜组（ＧｒｏｕｐＩＶ＆Ｖ）的值与模型组相比则有所降低，抑制率分别为４．１％和１９．６％。一一，过量摄入ＡＰＡＰ导致肝脏氧化损伤些研究指出，其中个重要原因是ＡＰＡＰ能够ｔｗｓｉ诱导生物体的氧化应激状态，导致各种疾病的发生。生物体内过多的活性氧攻击体一内的蛋白质、脂质、ＤＮＡ等些具有生物活性的大分子，发生过氧化反应，产生过氧化物，，形成氧化应激状态。当経基自由基ＯＯＨ）攻击ＤＮＡ时会形成多种氧化损伤的－，８ＯＨｄＧ是这些ＤＮＡ受到产物产物中含量最高同时也是最为重要的，其含量反映了氧ｗ－Ｗｔ化损伤的程度ＡＰＡＰ诱－。本实验结果显示，荆条蜜能够抑制导的小鼠血清８ＯＨｄＧ水平的上升，降低ＤＮＡ氧化损伤的程度。５．３．２．Ｓ小鼠肝脏组织病理学观察小鼠肝脏组织病理学分析结果如图５－６所示５－６。对照组（图Ａ）的肝脏组织结构正，４２ 西北大学硕±学位论文－，，胞质丰富５６３）常，无变性和侵润现象，细胞之间分隔清晰细胞核大而圆。模型组（图的肝脏细胞有气球样变形、坏死和炎性细胞侵润现象的存在，肝小叶结构变形，中央静５－６Ｄ脉周围出现空隙。低剂量蜂蜜组（图，）的肝脏细胞有微弱的气球样变形，中央静－脉周围的空隙较小。高剂量蜂蜜组（图５６Ｅ）的肝脏细胞坏死的比例极低，肝细胞肿大，程度降低，肝细胞气球样变形减少，表明荆条蜜对肝损伤具有很好的保护作用，其保护效果与水飞药素５－（图６Ｃ）相似。小鼠肝组织的病理学分析结果与本实验中所分析的肝，损伤指标相符合，。，形象的展示了实验的结果可Ｗ作为辅助的证明证实本文的观点？＇ｒ，＇紙含巧繁Ｉ岭．参别二一—技山ｌｉｒａ护瑞玄；蝶Ｊ图５－６小鼠肝脏切片Ｈ＆Ｅ染色图片５．４讨论肝脏是生物体内非常重要的器官，具有很多生物功能，其中最为重要的是解毒和生一物转化作用，，。ＡＰＡＰ是种非处方药物患者很容易自己购买到因此其引起的折脏损伤是很普遍的问题，，过量摄入ＡＰＡＰ会产生过量ＮＡＰＱＬ耗尽巧脏内的ＧＳＨ储备后与细胞膜结合，引起脂质过氧化，使细胞内的巧离子平衡被破坏，导致肝细胞损伤严重时９９－１〇１一［］－乙醜半脫氨酸甚至死亡。般对于ＡＰＡＰ所致的肝脏损伤治疗使用Ｎ，作为ＧＳＨ的－乙醜半脫氨酸能够通过提高ＧＳＨ的活性水平来降低ＮＡＰＱ前体物质，ＮＩ的毒性，抑制ＮＡＰＱ－－Ｉ诱导的氧化应激性氧，提高白细胞介素６的产量。但是由于Ｎ乙醜半腕，清除活４３ 第五章荆条蜜对扑热息痛诱导的小鼠胖损伤的保护作用氨酸的使用剂量需要十分注意，目前并没有标准的治疗方案可Ｗ参考，加之其副作用也不完全清楚，因此并不能作为普遍的治疗方案。一蜂蜜是种富含酶类化合物的具有抗氧化活性的天然食品，由本文第Ｈ和第四章的研究可知，荆条蜜具有抗氧化的活性，ＤＰＰ吐自由基清除活性实验和亚铁离子藝合实验２＋可Ｗ证明这一ＲＡＣ点，诱导的，同时荆条蜜能够显著抑制Ｏ实验中蒙光的浑灭抑制Ｃｕ脂质过氧化实验中的共扼二聚体的形成。因此可Ｗ猜测，荆条蜜也许可Ｗ用于抑制肝脏的氧化损伤或者肝脏损伤的治疗中。血清ＡＬＴ和ＡＳＴ酶活性是评价有关肝脏的损伤最佳的标准，当肝脏发生损伤时，这两种细胞内的酶由于肝脏细胞转运功能的障碍被转移到血浆中。本实验中，模型组的小鼠在腹腔注射ＡＰＡＰ后，与对照组的小鼠相比，血清ＡＬＴ和ＡＳＴ酶活性显著升高，表明由于ＡＰＡＰ的摄入，肝脏细胞受到氧化损伤，导致肝脏功能有所下降。本实验的结果表明荆条蜜也许具有使肝脏细胞膜结构稳定或者刺激肝脏细胞再生的作用，送种作用抑制ＡＰＡＰ诱导的肝脏损伤的影响。在生物体内，如果抗氧化防御系统被破坏，，会出现不可逆的细胞氧化损伤引发各种慢性疾病的发生。在ＡＰＡＰ诱导的肝脏细胞的损伤中，氧化应激即是其中重要的机制一之。ＳＯＤ酶与ＧＳＨ－Ｐｘ酶能够相继将超氧阴离子转化为对生物无毒副作用的水分子从而维持生命的健康。模型组的小鼠由于药物代谢作用抗氧化能为下降，表现在这些对机体具有重要作用的酶活性急剧降低，同时，灌胃荆条蜜组使得小鼠肝脏氧化损伤程度降低，表现在上述两种酶活性的增强。由此看来，荆条蜜的抗氧化活性可能是由于其能够提高生物体内源性抗氧化酶的水平。ＭＤＡ和８－ＯＨｄＧＤＮＡ之上的产物，分别是体内氧化损伤发生在的脂质物质和，在小鼠注射ＡＰＡＰ后，这两种产物的含量均有显著上升，说明肝脏受到脂质过氧化的修饰，ＤＮＡ一一受到氧化损伤。而经过段时间内每天摄入定量蜂蜜的小鼠，肝脏内的ＭＤＡ及一８－ＯＨｄＧ含量较之模型组有显著下降，也证明了荆条蜜对于肝赃有定保护作用。一肝脏的病理组织现察结果进步支持了血清和肝匀浆的实验结果，ＡＰＡＰ诱导的肝脏损伤主要表现在细胞变性坏死，肝脏失去正常结构而发生变形，而灌胃荆条蜜对此有抑制和保护的作用。献类化合物，具有多种途径和机制来抑制氧化反应，是荆条蜜具有抗氧化活性的关一键所在。般认为蜂蜜中的酪类物质可Ｕ经生物体的代谢途径进入血清，从而提高血清的抗氧化能力和生物体抗氧化防御体系的活性一。蜂蜜中还存在其他些具有抗氧化能力４４ 西北大学硕±学位论文的物质一，这些物质在蜂蜜抑制肝脏内的氧化损伤过程中，也起到了定的作用，这是不一。可忽视的，也待进行进步的研究５．５结论－在本实验中，ＡＬＴＯＨｄＧ，模型组的小鼠法射ＡＰＡＰ后及ＡＳＴ酶活性急剧上升，８的水平上升在肝匀浆中氧化产物増多－，而抗氧化的两种酶（ＳＯＤ、ＧＳＨＰｘ）活性减；弱一；从肝组织切片中看可Ｗ发现细胞变性等损伤。而在段时间内连续灌胃荆条蜜尤其是高剂量时小鼠各项指标都有所改善。这些指标都强有力地证明荆条蜜，能够很好地抑ＡＰＡＰ一制诱导的急性肝损伤，这种作用在未来可能应用于保健品或药品，对于这点还需要进行更深入和严谨的探索。４５ 第六章总结第六章总结６．１结论本课题主要研究了不同地区荆条蜜的理化性质、矿物元素组成、总敢、总黄厕含量和抗氧化活性化及荆条蜜的保肝作用，结果如下：１、采自Ｈ个不同地区的１４种荆条蜜理化指标均符合我国的蜂蜜标准，也符合欧盟的相关规定，对荆条蜜的矿物元素测定发现荆条蜜中主要的矿物元素分别是钟、读、钩、－钢．２２４４．５ｍ／ｋ６８．４％。这些指，其中钟含量最高，为９４ｇｇ，占总矿物元素含量的标可能用于荆条蜜的鉴别和质量控制中。２、所有荆条蜜样品均含有酪酸类化合物和黄丽类化合物，含量分别是４３２．０±２４．５ｍｇＧＡＥ／ｇ和２４．０７±０．５４ｍｇＲｕｔｉｎ／ｇ，不同地区的巧条蜜的总軟含量和总黄兩含量有巧差别。？＝＝荆条蜜的总酪含量与ＤＰＰＨ自由基清除活性（欠０．９４１５）、ＦＲＡＰ（／？０．９６４９）之间，而尽管所测的样品均能馨合亚铁离子呈正相关关系，但与总酌酸含量之间可能没有对应关系。然而这些数据依然表明酷类化合物是荆条蜜抗氧化活性的主要来源。－３、营星电泳实验和８ＯＨｄＧ测定实验结果表明，荆条蜜对小鼠淋己细胞氧化损伤具有保护作用。荆条蜜能够抑制祀〇２诱导的小鼠淋巴细胞ＤＮＡ的损伤，抑制率与蜂蜜所含的总醋含量相关。４一、荆条蜜具有保肝作用些损伤巧脏的药物如ＡＰＡＰ对摄入对小，当鼠产生损伤时，荆条蜜能够抑制小鼠血清中转氨酶活性的升高－，抑制ＤＮＡ氧化产物８ＯＨｄＧ的生成；２＋抑制Ｃｕ诱导的脂质过氧化ＭＤＡ生成量提高肝脏中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性。，减少表明荆条蜜能够抑制氧化应激造成的肝损伤，具有保肝护肝的功效。６．２硏究展望本实验研究了荆条蜜的理化性质、旷物元素和抗氧化活性，对荆条蜜的护巧作用进一行了初步探索：，在未来工作中，还可Ｗ进步丰富和完善本研究一１、本实验测定了荆条蜜的理化性质和矿物元素，可Ｗ进步测定外观与巧条蜜类似的蜂蜜如油菜蜜、洋槐蜜的理化性质，研究通过理化性质是否能够鉴定和区别荆条蜜。２、本实验测定了荆条蜜的总联含量和总黄厕含量，但并没有测定具体所含酷酸化合物和黄丽类化合物的种类和含量，可Ｗ通过ＨＰＬＣ法进行测定和分析。３、本实验探究了荆条蜜对于由扑热息痛诱导的小鼠肝脏损伤的抑制和保护作用，４６ 西北大学硕±学位论文但对于荆条蜜如何在生物体内起到送种保护作用的机制和原理并没有进行深入地研究，一可Ｗ进行进步探索。４７ 参考文献参考文献ａｍａｈａ－１］ｎｕＤ．ｓｏｒａｎｄｈｓｉｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｉｅｓＡ．，ｔＫＫ．ＳａｐｎａＶ，Ｋ．Ｓｅｎｃｏｅｒｔｏｆ［ｐＢ，ｙｐｙｐｐｃｏｍｍｅｒｃ－ｉａｓａｍｅｓｏｆｈｏｎｅ．ｏｏｄＲｅｎｔｅｒｎａｉｏｎ：ｌｐｌｙ［ＪＦｓｅａｒｃｈＩｔａｌ，２００３，３６１８３１９１］［２］Ｈａｂ化Ｈ．Ｍ．，ＭｅｑｂａｌｉＲＴ．Ａ．，Ｋａｍａ！Ｈ．，ｅｔａｌ．Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｅｒ－ｔｉｅｓｏｆｈｏｎｅｓｆｒａｒｉｄｉｏｎｓＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２０１４１５３：３５４３ｐｐｙｏｍｒｅｇ［］ｙ，，［３］ＳａｘｅｎａＳ．，ＧａｕｔａｍＳ．，ＳｈａｒｍａＡ．Ｐｈｙｓｉｃａｌ，ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｍｉｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｓｏｍｅｔｒ－ＩｎｄｉａｎｈｏｎｅｓＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓ２０１０１１８：％ｌ３９７ｙ［］ｙ，，［４］ＣａｍｗａｔｈＲ．，ＧｒａｈａｍＥ．Ｍ？，民ｅｙｎｏｌｄｓＫ．，ｅｔａｌ．ＴｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｈｏｎｅｙａｇａｉｎｓｔｃｏｍｍｏｎｅｕｉｎｅｗｏｕｎｄｂａｃｔｅｒｉａｌｉｓｏｌａｔｅｓＪ，ＴｈｅＶｅｔｅｒｉｎａｒＪｏｕｒｎａｌｑ［］ｙ，－１９９１：１１０１１４（）ａｓｓｉｍＭ．ＡｃｈｏｕｉＭ．ＭｕｓｔａｆａＭ．Ｒ．ＭｏｈｄＭ．Ａ．ｅｔａｌ．Ｅｌｌａｉｅａｃｉｄｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓ口］Ｋ，，，，，ｇ，ｐａｎｄｆ－ｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＭａｌａｙｓｉａｎｈｏｎｅｙｅｘｔｒａｃｔｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｉｎｖｉｔｒｏａｎｔｉｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｃ－ｔｉｖｉｔｕｒｉｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ２０９：ｙ口］？Ｎｔ１０３０６５０６巧，），（ＮｏｏｒＮ．Ｓａｒｆｒａｚ民？Ａ．ＡｌｉＳ．ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｕｒａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｓｏｍｅｓｅｌｅｃｔｅｄ［巧，，，ｐＰｋ－ａｉｓｔａｎｉｈｏｎｅｓ［Ｊ］，ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ，２０１４１４３：％２；３６６ｙｙ，７ＦａｕｚｉＡ．风ＮｏｒａｚｍｉＭ．ＹａａｃｏｂＮ．Ｓ．Ｔｕａｌａｎｇｈｏｎｅｉｎｄｕｃｅｓａｏｔｏｓｉｓａｎｄｄｉｓｒｕｔｓ［］，ｙｐｐｐｔｈｅｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｍｅｍｂｒａｎｅｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔａｎｄｃｅｒｖｉｃａｌｃａｎｃ巧ｃｅｌｌｌｉｎｅｓＪ．ｐ［］ａｉｃａｏｘ－ＦｏｏｄｎｄＣｈｅｍｌＴｉｃｏｌｏ２０１１４９４：８７１８７８ｇｙ，，（）８：袁泽良冯峰．蜂产品加工技术与保健［Ｍ］．北京科学技术文献出版社２００１［］，，［９］Ｗｅｓｔｏｎ民．Ｊ，，ＢｒｏｃｋｌｅｂａｎｋＬ．Ｋ．，ＬｕＹ？民．ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｌｅｖｅｌｓｏｆｍｉｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｓｏｍｅＮｅｗＺｅａｌａｎｄｈｏｎｅｙｓ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０００，－７０：４２７４％１０ＲｉｂｅｉｒｏＲ．Ｏ．民？ＭｄｒｓｉｃｏＥ．Ｔ．，ＣａｍｅｉｒｏＣ．ｅｔａｌ．ＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＢｒａｚｉｌｉａｎｈｏｎｅｓ［］，ｙｂｙｈｓｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｔｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｌｏｗｆｉｅｌｄｎｕｃｌｅａｒｍａｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｐｙｙｇ－ＬＦ－（ＩＨＮＭＲ）［Ｊ］．ＬＷＴＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏ２０１４５５：９０９５ｇｙ，，［１１］ＴｅｒｒａｂＡ．，ＲｅｃａｍａｌｅｓＡ．Ｆ．，ＨｅｍａｎｚＤ．，ｅｔａｌ．ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆＳｐａｎｉｓｈｔｈｙｍｅｈｏｎｅｙｓｂｔｈｅｉｒｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓａｎｄｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔｓＪ，ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００４ｙｙ［］，，ｐｙ８８５３７－５４２：１２ＫａｒａｂａｉａｓＬ．Ｋ．Ｂａｄｅｋａ乂．Ｖ．ＫｏｎｔａｋｏｓＳ．ｅｔａｌ．ＢｏｔａｎｉｃａｌｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＧｒｅｅｋ［］ｇ，，，－ｕｎｉｆｌｏｒａｌｈｏｎｅｓｗｉｔｈｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌｓｅｓＪ，ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙｐｙｙ［］ｙ，－０２０１４１６５：１８１１９，１３ＣｏｄｅｘＡｌｉｉｎｃ打ｔａｒｉｕｓＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎ．反ｅｖｉ化ｄｃｏｄｅｘｓｔａｎｄａｒｄｆｏｒｈｏｎｅ．ＣｏｄｅｘＳｔａｎｄａｒｄ［］ｙ：２００２－１：１巧８１．民ｏｍｅ：ＦＡＯａｎｄＷＨＯ４８ 西北大学硕±学位论文［１４］［ＡＯＡＣ］Ａｓｓｎ，ｏｆ０巧ｃｉａｌＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｓ．１９９０．０街ｃｉａｌｍｅ化ｏｄｓｏｆａｎａｌｙｓｉｓ．１５化ｅｄ．Ｉｎ：Ｈｅｌｒｉ油Ｋｅｄｉｔｏｒ．ＡｒｌｉｎｔｏｎＶａ．：ＡＯＡＣ，ｇ，１５曹讳．Ｍ．化：．２０１１［，陈卫军蜂产品深加工技术京中国轻工业出版社］［］－－Ｍｕ。刮Ｃａｖｉ过Ｍ．Ｍ．ＦｅｍａｎｄｅｚｉｎｏＭ．Ａ．ＧｏｍｅｚＡｌｏｎｓｏＥ？巧ａＬＥｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆｆｒｕｅｔｏｓｅ，，，ａｎｄｌｕｃｏｓｅｉｎｈｏｎｅｏｖｅｒｏｎｅｅａｒ：ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｉｎｄｕｃｅｄｒａｎｕｌａｔｉｏｎＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｇｙｙｇ［］ｙ，２００２７８－１５７１６１，，一１７中国标准出版社第．蜂产品标准汇编［Ｍ．北京：［］编辑室］中国标准出版社，－２００３：７１４３０１８ＣｉｍｐｏｉｕＣ．ＨｏｓｕＡ．ＭｉｃｌａｕｓＶ．，ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏ打ｏｆｔｈｅｆｌｏｒａｌｏｒｉｉｎｏｆｓｏｍｅ［］，，ｇＲｏｍａｎｉａｎｈｏｎｅｙｓｏ打ｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｈｙｓｉｃａｌａｎｄｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｅｒｔｉｅｓＪ．Ｓｅｃｔｒｏｃｈｉｍｉｃａｐｐｐ［］ｐＡ－ｃｔａＰａｒｔ：ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＢｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒＳｅｃｔｒｏｓｃｏ２００３１００：１４９１５４Ａｐｐｙ，，１９ＦｉｎｏｌａＭ．Ｓ．ＬａｓａｎｏＭ．Ｃ．ＭａｒｉｏｌｉＪ．Ｍ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｉｃａｌａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌ［］，ｇ，ｇｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｙｓｆｒｏｍｃｅｎｔｒａｌＡｒｅｎｔｉｎａＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００７ｇ［］ｙ，，－１００：１６４９１６５３［２０］Ｃｈｉｒｉｆｅ，Ｊ．，Ｚａｍｏｒａ，Ｍ．Ｃ．，Ｍｏｔｔｏ，Ａ．Ｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｗａｔｅｒａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄ％ｍｏｉｓｔｕｒｅｉｎｈｏｎｅｙ：ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌａｓｐｅｃｔｓａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｏＡｒｇｅｎｔｉｎｅｈｏｎｅｙｓＪ．Ｊｏｕｒｎａｌ［］ｏｆ－ＦｏｏｄＥｎｉｎｅｅｒｉｎ２００６７２：２８７２９２ｇｇ，［２１］ＣｏｒｂｅｌｌａＥ．，ＣｏｚｚｏｌｉｎｏＤ．Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅ幻ｏｒａｌｏｒｉｇｉｎｏｆＵｒｕｇｕａｙａｎｈｏｎｅｙｓｂｙｍｂ－ｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｃｏｉｎｅｄｗｉｔｈｃｈｅｍｏｍｅｔｒｉｃｓＪ．ＬＷＴＦｏｏｄ［］Ｓｃ－ｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏ，２００６３９：５３４５３９ｇｙ，口巧ｏｄｒｉｕｅｚＱ０？Ｄ．ＦｅｒｒｅｒＢ．Ｓ．０？ＦｅｒｒｅｒＡ．ｅｔａｌ．ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅＰｒｏｄｕｃｅｄＲｇ，，，ｙｎｅｎｅｚｕｅａｏｄ－ｉＶｌＪ．ＦｏＣｈｅｍｉｓｔｒ２００４８４：４９９５０２［］ｙ，，［２３］ＭａｎｚａｎａｒｅｓＡ．Ｂ．，Ｇａｒｃｉａ文．Ｈ．，Ｇａｌｄ６ｎＢ．Ｒ．，ｅｔａｌ．ＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｓｓｏｍａｎｄＨｏｎｅｄｅｗｈｏｎｅｓｕｓｉｎｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅａｎａｌｓｉｓｏｎｔｈｅｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｙｙｇｙｐｙｐｓｕａｒ－ｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１１１２６：６６４６７２ｇｐ，口句ＬａｃｈｍａｎＪ．Ｋｏｌｉｈｏｖ著０．Ｍｉｈｏｌｏｖ苗Ｄ．ｄ：ａｌ．Ａｎａｌｓｉｓｏｆｍｉｎｏｒｉｔｈｏｎｅｃｏｍｏｎｅｎｔｓ：，，，ｙｙｙｐｓｓｅｍ－ＰｏｉｂｌｕｓｅｏｆｔｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｕａｌｉｔＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｉｓｔｒ２００７１０１：９７３９７９ｙｑｙ［］ｙ，，口５Ｙ枉ｃｌｅ乂，Ｓ山ｔａｎｏｌｕＲＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＨａｔａｈｏｎｅｓａｃｃｏｒｄｉｎｔｏ化ｅｉｒ］ｇｙｙｇ－ｍｕｌｉ－ｅｌｅｍｅｎａｎａｌｓｉｓｕｓｉｎＯＥＳｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｈｃｈｅｍｏｍｅｉｃｏｄＣｈｅｍｉｓｒｔｔｙｇＩＣＰｔｔｒｓＪ．Ｆｏｔ，［］ｙ－２０１３１４０：２３１２３７，－６ＴｅｒｒａｂＡ．ＲｅｃａｒｎａｌｅｓＡ．Ｆ．Ｇｏｎｚｄｅｚｒｅｔ．？巧ａｌ．ｔｒｉｂｕｔｉｅｓｔｕｄｏｆｌＭｉＭＬＣｏｎｏｎ化化口］，，，ｙａｖｏｃａｄｏｈｏｎｅｙｓｂｙｔｈｅｉｒｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔｓｕｓｉｎｇｉｎｄｕｃｔｉｖｅｌｙｃｏｕｐｌｅｄｐｌａｓｍａｏｐｔｉｃａｌｅｍ－ｉ巧ｉｏ打ｓｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００５９２：３０５３０９ｐ］ｙ，，４９ 参考文献－巧－ｔｉ口７ＣｈｕａＬ．Ｓ．Ａｂｄｕｌ民ａｈａｍａｎＮ．Ｌ．ＳａｒｍｉｄｉＭ？民？ａｌ．Ｍｕｌｔｉｅｌｅｍｅｎｔａｌｃｏｍｏｓｉｏｎａｎｄ］，，，ｐｈｓｉｃａｌｒｏｅｒｔｉｅｓｏｆｈｏｎｅｙｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍＭａｌａｙｓｉａＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ，２０１２ｐｙｐｐ［］ｙ，－１３５：８８０８８７２８ＡｚｅｒｅｄｏＬ．Ｃ．ＡｚｅｒｅｄｏＭ．Ａ．Ａ．Ｓｏ旭ａＳ．艮？ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｓａｎｄ［］，，，ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｅｒｔｉｅｓｉ打ｈｏｎｅｓａｍｌｅｓｏｆＡｅｓｍｅｌｌｉｆｅｒａｏｆｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔｆｌｏｒａｌｐｐｙｐｐｍ－ｏｒｉｉｎｓＪ，ＦｏｏｄＣｈｅｉｓｔｒ２００３８０：２４９２５４ｇ［］ｙ，，口９］ＷｏｎＳ．Ｒ．，ＣｈｕｎＹＬ．，ＫｉｍＪ＊Ｗ．，巧ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｙｍａｊｉｒｏｄｍ－ｒｏ化ｉｎ她ｄｉｔｓａｌｉｃａｔｉｏ打Ｃｈｅｉｓｔｒ２００９１１３：１３３４１阴？Ｆｏｙ巧８ｐｐｐ，，［３０周厚报，邓建军，胡苗苗等．基于蛋白质差异鉴别蜂蜜真伪的研究进展阴？食品与］３９６６－９发辭工业：１１１１，２０１３，（）３１Ｈｅｒｍｏｓｉ打Ｉ．ＣｈｉｃｏｎＲ．Ｍ．ＤｏｌｏｒｅｓＣ．Ｍ．Ｆｒｅｅａｍｉｎｏａｃｉｄｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｂｏｔａｎｉｃａｌ［］，，ｐ－ｏｒｉｇｉｎｏｆｈｏｎｅｙＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２００３８３（２）：２６３２６８［］，，ｉＳｒａｎｃｉｏｓｏ？ａｉｌｌａｒａｓｃｈｒｏｍａｔｏｒａｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏａｏｆｆｒｅｅ口２ＰｉｒｉｎＡ．ＣｏｎｔｅＬ．．Ｆ０Ｃｐｈ］，，ｐｙｇｇａｍｉｎｏａｃｉｄｓｉｎｈｏｎｅａｓａｍｅａｎｓｆｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｂｏｔａｎｉｃａｌｕｒｓＪ．ｏｓｏｃｅｙ［］ｕｒｎａ－ＪｏｌｏｆＨｉｈＲｅｓｏｌｕｔｉｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｒａｈｙ，１９９２１５３：１６５１７０ｇｇｐ，（）３３ＭｅｄａＡ．ＬａｍｉｅｎＣ．Ｅ？民ｏｍｉｔｏＭ？巧ａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｈｅ打ｏｌｉｃｆｌａｖｏｎｏｉｄ［］，，，ｐ，ａｎｄｐｒｏｌｉｎｅｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎＢｕｒｋｉｎａＦａｓａｎｈｏｎｅｙ，ａｓｗｅＵａｓｔｈｅｉｒｒａｄｉｃａｌｓｃａｖｅｎｇｉｎｇａｃ－ｔｉｖｉｔｙ…？ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２００５，９１：５７１５７７，３ｅｚａｄｒｉａｆｉｏｅｍｄｎｄｅｚ－ａｃｈｄｎＭＴ．Ｓ．ｅａｌ．Ａｎｉｏｘｉｄａｎｔｃｏｕｎｄｓａｎｄ．，ＶｉｌｌＤ．，ＦＰｔｔｏｍ［句Ｍ，ｐａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｉｎａｃｅｒｏｌａ（Ｍａｌｐｉｇｈｉ汪ｅｍａｒｇｉｎａｔａＤＣ．）ｆｒｕｉｔｓａｎｄｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａ－ｌｏｆＦｏｏｄＣｏｍｏｓｉｔｉｏｎａｎｄＡｎａｌｓｉｓ２００８２１：２８２２９０ｐｙ，，ＰＬＣ口引曹讯郑建斌．Ｈ指纹图谱在蜂蜜种类识别中的应用研究化中国蜂化２００６，３－５７：７８（）３６ＡｌａｄｉＡ．ＭＫａｍａｒｕｄｄｉｎＭ．Ｙ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆ化ｅｈｅｎｏｌｉｃｃｏｎｔｅｎｔｓａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ［］ｊ，ｐｃａａｃ－ｉｔｉｅｓｏｆｔｗｏＭａｌａｓｉａｎｆｌｏｒａｌｈｏｎｅｙｓＪ，ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００４８５：５１３５１８ｐｙ［］ｙ，，ｔｋＭａｌａｒａｏｌｕＳｅａｌｉｏｌｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｈｅｍｉｃａｌｓｉｉｏｎ３７Ｋ社ｉ．ＫｏｌＳ．Ｋ．ｔ．Ｂｏｃｃｏｍｐｏｔ［］ｓ，ｙ，ｇ，ｇｒｅｅｏｎｅｓｏｒｅｎｔｅｏｍｏｏｏｄｅｍ－ｎａ：ｏｆｔｈｈｆ姐筋ｔｓｆｒＡｔｌｉａ．ＦＣｈｉｓｔｒ２００７１００５２６５３４ｙｙｐ饥ｙ，口８］ＶｄａＬ．，ＬｏｒｅｎｚｏＣ．，Ｐ紅ｅｚＲ．Ａ．ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｃａｐａｃｉｔｙｏｆＳｐａｎｉｓｈｈｏ打ｅｙｓａｎｄｉｔｓｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｏｌｈｅｎｏｌｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｏｔｈｅｒｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｏｅｒｔｉｅｓＪ，Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｐｙｐｐｙｐｐ［］ｈｅ－ｔＳｃｉｅｎｃｅｏｆＦｏｏｄａｎｄＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，２００７，８７：１０６９１０７５ｇ３９ＦｅｍａＡ‘ＩｎｔａｌｉｅｔａＩ．ＳｉｍｏｎｅｔｉＡ？巧ａｌ，Ａｃｏｍａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｏｎｈｅｎｏｌｉｃｒｏｆｉｌｅ［］，，ｇ，，ｐｙｐｐｖｉｔａｍｉｎＣｃｏｎｔｅｎｔａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｏｆＩｔａｌｉａｎｈｏｎｅｙｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｂｏｔａｎｉｃａｌｙｏｏｄｃｅ－ｏｒｉｉｎ：？ＦＳｉｎｃｅ底Ｔｅｃｈｎｏｌｏ２０１３４８１８９９１９０８ｇｇｙ，阴，５０ 西北大学硕±学位论文，４０Ｌｉａｎｄａ民．Ｌ．？？ＳａｎｔＡｎａＬ．Ｄ．０？ＥｃｈｅｖａｒｒｉａＡ．约ａｌ．ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＡｃｔｉｖｉｔａｎｄ［］，，，ｙＰｈｅｎｏｌｉｃＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆＢｒａｚｉｌｉａｎＨｏｎｅｙｓａｎｄｔｈｅｉｒＥｘｔｒａｃｔｓ［Ｊ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＢｒａｚｉｌｉａｎ］Ｃｈｅｍ於－ｉｃａｌＳｏｃｉｅｔ２０１２４：６１８６２７ｙ，，（）［４Ｕ曹讳，卢河，陈卫军等．不同种类蜂蜜抗氧化活性的研究阴．食品科学，２００５，２６８３５２－３５６（：）４２ＡｌｏｕｎｉＳ．ＳｕｉｒａｉｎｏｋｕｌＲＨｄｒｏｘｅｔｈｌｆｕｒｆｕｒａｌｄｅｈｄｅａｎｄａｍｌａｓｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎ［］ｊ，ｊｐｙｙｙｍｙｙｙ－Ａｕｓｔｒａｌｉａｎｈｏｎｅ？ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２０１０１１９：１０００１００５ｙ阴，，４３ＦａＵｉｃｏＢ．ＺａａｌａＭ．ＡｒｅｎａＥ．ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆｃｏｎｄｉｔｉｏｉ打ｏ打ＨＭＦｃｏｎｔｅｎｔｉｎ，ｎ［］，ｐｐ，ｇｕｎｔ－ｉｆｌｏｒａｌｈｏｎｓＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｒ２００４８５：３０５３１３巧［］ｙ，４４Ｓａｋ－ＢｏｎａｒＭｔｔｉｓ．Ｓａｋａ６Ｎ．Ｄｉｒｅｃｔｏｔｅｎｉｏｍｅｔｒｉｃｄｅｔｅｒｍｉｎａｉｏｎｏｆｄｉａｓｔａｓｅａｃｔｉｖｉｔｎ［］，ｐｙＪ－ｈｏｎｅｙ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２０１２１３５：８２７８３１［］ｙ，，４５ＴｏｓｉＥａｒｎｅａｅａｏｎｅｓｅａｃｔｍｏｄｉｆｉｅｄｅａｎ．．Ｍｔｉｅｔ民．ＯｒｔＭ．ｔｌ．ＨｄｉａｓｔａｉｖｉｂｈｔｉＪ［］，，ｇ，ｙｔｙｙｇ［］－ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００８１０６：８８３８８７，ｙ，４柴霞许志军？荆条蜜对果蛹生长发育和抗氧化能力的影响町食品工，李芝彪等［巧－业科技２０１３３４１：巧９３４３，，（巧４７诗魁吴杰等？荆条巧泌蜜歉收年景气候类型的分析阴．中国养蜂３［］张厚這，梁，，１９９，４－：５７４ＳａｒｉｋｕｒｋｃｕＣ＾ＡｒｉｓｏＴｅｅＢ？巧ａｌＳｔｕｄｉｅｓｏｎｔｈｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｆｅｓｓｅｎｔｉａｌ［別，ｙｐ，ｙｏ０。ａｎｄｄｉｆｅｒｅｎｔｓｏｌｖｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＶｉｔｅｘａｇｎｕｓｃａｓｔｕｓＬ＊ｆｒｕｉｔｓｆｉｒｏｍＴｕｒｋｅｙ口？Ｆｏｏｄ］－ａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏ２００９４７：２４７９２４８３ｇｙ，，４９ＣｏｓｓｕｔａＤＩｔｌｕｅｒｃｒｉｃａｒａｃｔｉｏ打ｏｆｅａｓ．Ｓｉｍ細ｉｄｉＢ．Ｖ＾ｉＥ．ｅａ．ＳｔｉｌｆｌｕｉｄｅｘｔＶｉｔｘ打ｕ［］，，ｇ，ｐｇｈｅ－ｃａｓｔｕｓｆｒｕｉｔ口．ＴＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｕｅｒｃｒｉｔｉｃａｌＦｌｕｉｄｓ２００８４７：１８８１９４］ｐ，，口０ＣｈａｉＸ．ＸｕＪ．Ｊ．ＬｉＺ．Ｂ．ＷｅｉＹ．Ｙ．，ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆｖｉｔｅｘｈｏｎｅｏｎｒｏｗｔｈａｎｄ］，，，ｙｇａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｉｏｎｄｒｏｓｏｈｉｌ泣ｍｅｌａｎｏａｓｔｅｒＪ．Ｓｉｅ打ｃｅａｎｄｅｃｈｎｏｌｏｏｆＦｏｏｄＩｎｄｕｏｆｐｇｃＴｓｔｒ［］ｇｙｙ，２０－３１３３４１２：巧９４３，（）［５ｕ吕文英，吕品．槐花蜜娶花蜜荆条蜜中８种元素的测定与研究ｍ．微量元素与健０２－康研究，２０巧１：４５４７，（）－高效液相色谱法测定蜂蜜中的有化酸化Ｃｈｅ龄］朱晓玲，叶飞，杨洁暮固相萃取ｉｎｅｓ－ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｒａｈ２０１０２８０：９４５９４９ｇｐｙ，，。）５３王锦梅．洋槐蜜油菜蜜和荆条蜜花源标识物的确定及应用Ｄ．西安：西北大学，［］，［］２０１４－．我国蜂业发展的历程及今后发展的方向［Ｊ．中国蜂业１０：３７３８［５４］范正友］，２０１１，５１ 参考文献２０－５化２０１０年蜂蜜市场回顾和２０１１年市场预测及对策机蜜蜂杂志１１４：８１０［巧杨寒，，５６ＭａｎｚａｎａｒｅｓＡ．Ｂ．ＧａｒｃｉａＺ．吐Ｇａｌｄ６打Ｂ．民．ｅｔａｌ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｂｌｏｓｓｏｍａｎｄ［］，，，ｈｏｎｅｙｄｅｗｈｏｎｅｓｕｓｉｎｇｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅａｎａｌｙｓｉｓｏｎｔｈｅｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｙｓｕａｒｔｈ１－ｃｏｍｐｏｓｉｉｏｎＪ．ＦｏｏｄＣｅｍｉｓｔｒ２０１１２６：６６４６７２ｇ［］ｙ，，［５７］ＢｏｇｄａｎｏｖＳ．，ＭａｒｔｉｎＲ，Ｌ田ｌｌｍａｎｎＣ．，巧ａｌ．Ｈａｒｍｏｎｉｓｅｄｍｅｔｈｏｄｓｏｆ化ｅＥｕｒｏｐｅａｎｈｏｎｅｙｃｏｍｍ－ｉｓｓｉｏｎ．Ａｉｄｏｌｏｉｅ（ｅｘｔｒａｉｓｓｕｅ）１９９７１５９ｐｇ，，－－ｂｕ－ＴａｒｂｏｕｓｈＨａａｎｉａｒｒａｅｉｄｅｎｃａｉｏｎａｎｄｕａ．ＡｌＫｈｔＨ．Ｅ＾ＳｅＭ．Ｆｌｏｒａｌｔｔｉｆｉｔｌｉｔ口引Ａ，，ｇｙｐｑｙ－ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｓｏｍｅｈｏｎｔｅｓ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ１９９３４６：１３１７巧ｙｐ口］ｙ，，５９刘子维．Ｄ．２００９蜂蜜及高果糖浆的鉴别检测［］武汉：华中科技大学［］，６０ＴｅｒｒａｂＡ．ＤｆｅｚＭ．Ｊ．ＨｅｒｅｄｉａＲＪ．ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＭｏｒｏｃｃａｎＭｏｎｏ幻ｏｒａｌｈｏｎｅｓｂ［］，，ｙｙｔｅｒｓｃｏｃｈｅｍｃａｃａｒａｃｔｅｃｓＦｏｏｄ－ｈｉｈｙｉｉｌｈｒｉ如Ｊ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ２００２７９：３７３３７９，ｐ［］，６１ＰｅｒａｓｎｏＯ．Ｌ．ＰｉｒｏＲ．ＭａｉｎＥｕｒｏｅａｎｕｎｉｆｌｏｒａｌｈｏｎｅｓ：ｄｅｓｃｒｉｔｉｖｅｓｈｅｅｔｓ１Ｊ．［］，ｐｙｐ［］Ａ－ｉｄｏｌｏｉｅ２００４３５；Ｓ３８Ｓ８１ｐｇ，，－６２张玉玉李全宏．食品中穗酸和５哲甲基祿醒的产生化理／含量检测巧安全性［］，宋戈，－评价硏究进展的？貪品科学２０１２３３５：２７５２８０，，（）６３张金振？．［］，李耀薛晓峰等市售蜂蜜样品中淀粉酶活性的调查研究阴中国蜂业，，２００９６０佩４３－４４，－ｅａｂｅ－民ｅｃａｍａ６句ｏｎｚｄｌｅｚＭｉｒｅｔＭ丄？ＴｒｒＡ．ＨｅｍａｎｚＦｍ如ｄｅｚｌｅｓＭ．Ａ．Ｈｅｒｅｄｉａ［Ｇ，，，，，，，＾Ｆ．Ｊ．２００５．Ｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｏｌｏｒａｎｄｍｉｎｅｒａｌｃｏｍｏｓｉｔｉｏ打ｏｆｈｏｎｅｓ，ｐｙａｎｄｅｉｒｏａｎｃａｏｒｉｎｕｒｎａｏｆｒｉｃｕｌｕｒａａｎｄｏｏｄＣｈｅｍｓｒ－化．ｂｙｂｔｉｌｉＪｏｌＡｔｌＦｉｔｙ５３２５７４２５８０ｇｇ，［６５］ＳｅｒｒａｎｏＳ．，ＶｉｌｌａｒｅｊｏＭ．，Ｅｓｐｅｊｏ民？，巧ａｌ．ＣｈｅｍｉｃａｌａｎｄｐｈｙｓｉｃａｌｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆＡｎｄａｌｕｓｉａｎｈｏｎｅｙ：ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＣｉｔｒｕｓａｎｄＥｕｃａｌｙｐｔｕｓｈｏｎｅｙｓｂｙｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｎｔ－ａｎａｌｓｉｓ［Ｊ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ，２００４８７：６１９６２５ｙ］ｙ，６６ＭａｎｚａｎａｒｅｓＡ．Ｂ．ＧａｒｃｉａＺ．托ＧａｌｄｄｎＢ．民？民ｏｄｒｉｕｅｚＥ．民？巧ａｌ．Ｐｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ［］，，，ｇ，ｙｃｈａｒａｃｅｒｉｓ－ｔｔｉｃｓｏｆｍｉｎｏｒｍｏｎｏ幻ｏｒａｌｈｏｎｅｙｓｆｒｏｍＴｅｎｅｒｉｆｅＳａｉｎ．ＬＷＴＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，ｐＰ］ａｎｄ－Ｔｅｃｈｎｏｌｏ２０１４５５：５７２５７８ｇｙ，，［６７］ＷｏｎＳ．Ｒ．，ＬｉＣ？义，ＫｉｍＪ．Ｗ．，ｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｙｍａｊｏｒｒｏｔｅ－ｉｎａｎｄｉｔｓａｌｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００９１１３４：１３３４１３３８ｐｐｐｙ，，（）６８邓建军．Ｊ．［］，焦霞，杨海霞等利用聚丙稀醜胺凝胶电泳技术分析蜂蜜蛋白质行为［］２０－食品科学１２３３１４：１８８１９１，，（）［６９胡庆银．不同蜂蜜中蛋白的差异研究［Ｄ］．福州福建农林大学２０１０］，，７０ＴｒｕｚｚｉＣ．，ＡｎｎｉｂａｌｄｉＡ．，ＩｌｌｕｍｉｎａｔｉＳ．ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｒｏｌｉｎｅｉｎｈｏｎｅ：［］，ｐｙＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｏｆｉｃｉａｌｍｅｔｈｏｄｓｏｔｉｍｉｚａｔｉｏｎａｎｄｖａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｎａｌｔｉｃａｌ，ｐｙ５２ 西北大学硕±学位论文－ｍｅｔｈｏｄｏｌｏＪ．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２０１４１５０：４７７４８１ｇｙ［］ｙ，，［７１］徐贤．蜂蜜种类与品质的鉴别研究Ｄ］．杭州，浙江工商大学，２０１４［７ＡｌａｍｉＡ．Ｓ．ＧｗａｓｓＡ．Ａ．Ｍａｈｍｏｕｄ．ｅｔａｌ．Ｍｉｎｅｒａｌｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｈｓｉｃａｌｒｏｅｒｔｉ巧ｏｆ［马ｑ，ｙ，，ｐｙｐｐｌｏｃａｌａｎｄｉｍｐｏｒｔｅｄｈｏｎｅｓｉｎＳａｕｄｉＡｒａｂｉａＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳａｕｄｉＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔ２０１４ｙ［］ｙ，，－１８５：６１８６２５（）７３ＺｈｏｕＪ．ＳｕｏＺ．ＺｈａｏＲｅｔａｌ．ＪｕｕｂｅＨｏｎｅｆｒｏｍＣｈｉｎａ：Ｐｈｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ［］，，，ｊｙｙａａｃｅｒｉｓ－ＣｈｒｔｔｉｃｓａｎｄＭｉｎｅｒａｌＣｏｎｔｅｎｔｓ？ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２０１３７８：３８７３９４机ｙ，，口）７４ＷｈｉｔｅＪ．Ｗ．Ｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎｏｆｈｏｎｅｙ．Ｈｏｎｅ：Ａｃｏｍｒｅｈｅｎｓｉｖｅｓｕｒｖｅ．Ｌｏｎｄｏｎ：［］，ｐｙｐｙＨｅｅｍａｎｎ－ｉｎ１９７９１５７１５８，，ａｍｏｓ＇？ｌｖｅｓＡ？民Ａ．ＧｏｎａｌｖｅｓＭ．Ｍ巧ａｌ．ＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｕａｌｉｔａｒａｍｅｔｅｉＳａｎｄ［ｙＡ，，ｆ，ｙ，ｑｙｐｍ打ｅａｃｏｎｔｅ打ｔｏｆｏｒｔｕｓｅｍｏｎｏｒａｏ打ｅｓｏｕｎａＦｏｏｄｍｏｓｔｏｎａｎｄｉｒｌＰｇｕｅｆｌｏｌｈｙＪ．ＪｒｌｏｆＣｏｉｉ［］ｐｓ－Ａｎａｌｉｓ２０１３３０：１３０１３８ｙ，，［７６］Ｅｒｅｊｕｗａ０？０？，Ｓｕｌａｉｍａｎ义Ｓ．，ＷａｈａｂＭ．Ｓ．Ａ．Ｈｏｎ巧：ＡＮｏｖｅｌＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ［Ｊ］．Ｍｏ‘ｌｅｃｕｌｅｓ２０１２１７：４４０Ｍ４巧（，，［７７］ＡｌｚａｈｒａｎｉＨ．Ａ．，ＡｌｓａｂｅｈｉＲ．，ＢｏｕｋｒａａＬ．，ｅｔａｌ．ＡｎｔｉｂａｖｔｒｔｉａｌａｎｄＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＰｏｔｅｎｃｙｏｆＦｌｏｒａｌＨｏｎｅｓｆｒｏｍＤｉｆｆｅｒｅｎｔＢｏｔａｎｉｃａｌａｎｄＧｅｏｒａｈｉｃａｌＯｒｉｉｎｓＪ．Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ２０１２ｙｇｐｇ［］，，－１７：１０５４０１０５４９［７巧ＬａｃｈｍａｎＯｒｓａｋＭ，ＨｅｊｔｏａｎｋｏｖａＬ．，ｅｔａｌ．Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｔｏｔａｌｈｅ打ｏＫｃｓｏｆｓｅ－ｌｅｃｔｅｄＣｚｅｃｈｈｏｎｅｓＪ．ＬＷＴＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏ２０１０ｐｙ［］ｇｙ，，４３－：５２５８７９ＨｉｎｎｅｂｕｒＩ．ＤｏｒｍａｎＨ．Ｊ．ＨＵｔｕｎｅｎ艮？Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉ巧ｅｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍ［］ｇ，ｔｒ－ｓｅｌｅｃｔｅｄｃｕｌｉｎａｒｈｅｒｂｓａｎｄｓｐｉｃｅｓ［Ｊ］．ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓ２００６９７：１２２１２９ｙｙ，，０Ｂｒａｎｄ－Ｃｕｖｅ巧］ＷｉｌｌｉａｍｓＷ．ｌｉｅｒＭＢｅｒｓｅｔ。Ｕｓｅｏｆ汪ｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｍｅｔｈｏｄｔ：ｏｅｖａｌｕａｔｅ，ｔｔｔＷＴ－ｅｃ１５２８－ａｎｉｏｘｉｄａｎｔａｃｉｖｉｙＪ，ＬＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｈｎｏｌｏ９９ｌ：２５３０［］ｇｙ，，（）８１ＢｅｎｚｉｅＩ．Ｆ．Ｆ．ＳｔｒａｉｎＪ．Ｊ．ＴｈｅｆｅｒｒｉｃｒｅｄｕｃｉｎａｂｉｌｉｔｏｆｌａｓｍａＦＲＡＰａｓａｍｅａｓｕｒｅｏｆ［］，ｇｙｐ（）＂，，ｎ－ａｔｉｏｘｉｄａｎｔｏｗｅｒ：ｔｈｅＦＲＡＰａｓｓ巧的．ＡｎａｌｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ１９９６巧９１：７０７６ｐｙｙ，，（）８２ＰａｒｋｅｒＴ．Ｌ．ＭｉｌｌｅｒＩＳ．Ａ．ＭｅｒｓＬ．Ｅ．ｅｔａｌ．ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＳｎｅｒｉｓｔｉｃＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ［］，，ｙ，ｙｇＰｏｔｅｎｔｉａｌｏｆＣｏｍｐｌｅｘＭｉｘｔｕｒｅｓＵｓｉｎｇＯｘｙｇｅｎＲａｄｉｃａｌＡｂｓｏｒｂａｎｃｅＣａｐａｃｉｔＯＲＡＣｙ（）ａｎｄＥｌｅｃｔｒｏｎＰａｒａｍａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅＥＰＲＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄ（）［］Ｃｈｅｍ－ｉｓｔｒｙ２０１０５８：２０９２１７，，８３．常丹．０，周梦遥，徐瑞哈等蜂蜜抗氧化成分的研究进展机中国蜂业，２０１［］，６－４０１１１：３８（）［８４］李楠，刘元，侯滨滨．黄厕类化合物的功能特性阴．食品研究与开发，２００５，５３ 参考文献６－２６：１３９１４１（）５军．巧］席．高压加工技术在蜂胶黄醜类化合物提取中的应用研究［Ｄ吉林吉林大学，］，２００５－ｎｄ巧６ＤｉｍｉｔｒｏｖＭ．Ｄ．ＰｅｓｈｅｖａＭ．ＧＶｅｎｋｏｖＲＶ．ＮｅｗＣｅＵ技ａｓｅｄＡｓｓａＩｉｃａｔｅｓ］，，ｙＤｅｐｅｎｄｅｎｃｅｏｆＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｎｔｈｅＯｒｉｇｉｎｏｆＲｅａｃｔｉｖｅＯｘｙｇｅｎｎｄ－ＳｅｃｉｅｓＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２０１３６１：４３４４４３５１ｐｇｙ，，［］７ＣａｏＷ．ＣｈｅｎＷ．Ｊ．ＳｕｏＺ？民ｅｔａｌ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆｅｔｈａｎｏｌｉｃｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｂｕｃｋｗｈｅａｔ］，巧，ｇｒｏａｔｓｏｎＤＮＡｄａｍａｇｅｃａｕｓｅｄｂｙｈｙｄｒｏｘｙｌｒａｄｉｃａｌｓ［Ｊ］．ＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，２００８４－於９１：９２４，［８別ＺｈｏｕＪ．，ＵＲ，ＣｈｅｎｇＮ．，ｅｔａｌ．ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆｂｕｃｋｖｖｉｉｅａｔｈｏｎｅｙｏｎＤＮＡｄａｍａｇｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｂｈｄｒｏｘｌｒａｄｉｃａｌｓＪ．ＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏ２０１２５０：２７６６２７７３ｙｙ［］，ｙｇｙ，ｎａｒ－８ｕＬ：ａｍｏ．Ｌ．ＣｈｉｏｕＣ．Ｃ．，ＣｈａｎＲＹｅｔａｌ．Ｕｒｉ８ＯＨ过Ｇａｒｋｅｒｆｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓ［叫Ｗ，ｇ，ｙｔｏＤＮＡａｎｄａｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｆｂｒｃａｎｃｅｒａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓａｎｄｄｉａｂｅｔｉｃｓＪ．ＣｌｉｎｉｃａＣｈｉｍｉｃ过，［］ｃａ２００４－Ａｔ３３９：１９，，９０ＦｕｋｕｄａＭ．ＹａｍａｕｃｈｉＨ．ＹａｍａｍｏｔｏＨ．ｅｔａｌ．ＴｈｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅＤＮＡｄａｍａｅ［］，，，ｇｎｗ－ｉｎｃｈｉｌｄｒｅｉ化ｂｒａｉｎｄａｍａｇｅｕｓｉｎｇ８ｈｙｄｒｏｘｙｄｅｏｘｙｇｕａｎｏｓｉｎｅｌｅｖｅｌｓＪ．Ｂｒａｉｎ足［］ｅｖｅ－Ｄｌｏｅｎｔ２００８３０：１３１１３６ｐｍ，，＇９－１Ｙａｓｕｈａｒａ！？ＨａｒａＫ．ＳｅｔｈｉＫ．Ｄ．ｅｔａｌ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ８ＯＨｄＧｌｅｖｅｌｓｉｎｔｈｅｕｒｉｎｅｓｅｒｕｍａｎｄ［］，，，，，－ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｎｉｒａｏｆｈｅｍｉａｒｋｉｎｓｏｎｉａｎｒａｔｓ町ＢｒｉａｎＲｅｓｅａｒｃｈ２００７１１３３：４９５２ｇｐ＾，９２Ｓｉｎｈ化Ｐ．，ＭｃＣｏＭ．Ｔ．，ＴｉｃｅＲ．Ｒ．，ｅｔａｌ．Ａｓｉｍｌｅｔｅｃｈｎｉｕｅ仿ｒｌｏｗｌｅｖｅｌｓｏｆＤＮＡ［］ｇｙｐｑｅａｅｔ－ｄａｍａｇｉｎｉｎｄｉｖｉｄｕｌｃｅｌｌｓ？ＥｘｐｒｉｍｅｎａｌＣｅｌｌＲｅｓｅａｒｃｈ１９８８１７５：１８４１９１饥，，巧习ＮａｍｉｋｉＭ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ／ａｎｔｉｍｕｆａｇｅｎｓｉｎｆｏｏｄＪ．ＧｒｉｔＲｅｖＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ，１９９０［］，－２９：２７３３００９４ｔｈｉｅＳ．Ｊ．ＣｏｌｌｉｎｓＡ．Ｒ．ＤｕｔｈｉｅＧＧｅａｌ．ｕｅｒｃｅｉｎａｎｄｍｃｅｉｎｒｏｅｃａａｉｎｓ］Ｄｕ，ｔｔｔｔｔｔ［，，Ｑｙｒｉｐｇｈｄｒｏｅｎｅｒｏｘ－ｙｉｄｅｉｎｄｕｃｅｄＤＮＡｄａｍａｇｅｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｓａｎｄｏｘｉｄｉｚｅｄｒｉｍｉｄｉｎｅｓｉｎｇｐ（ｐｙ）－ｈｕｍａｎｌｍｈｏｃｔｅｓＪ．ＭｕｔａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ１９９７３９３：２２３：２３１ｙ［］，ｙｐ，９５ＳｒｏｋａＺ．ＣｉｓｏｗｓｋｉＷ．Ｈｄｒｏｅｎｅｒｏｘｉｄｅｓｃａｖｅｎｉｎａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄａｎｔｉｒａｄｉｃａｌ［］，ｙｇｐｇｇ，ａｃｔｅｎｏｒ－ｉｖｉｔｙｏｆｓｏｍｅｈｌｉｃａｃｉｄｓ？ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔ２００３４１：７５２７５８ｐ饥ｙ，，９６ＣｈｅｎｇＮ．，ＷａｎｇＹ．，ＧａｏＨ．，ｅｔａｌ．ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｒａｔａｅｇｕｓｉｎｎａｔｉｆｉｄａ［］ｐｐｏｌｌｅｎｏ打ＤＮＡｄａｍａｇｅｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓＪ．ＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏ［］ｇｙ，２０１３－７％：７０９１４，９７ＰｒａｂｈｕｌｋａｒＬｉＣ－Ｚ．Ａｓｓ巧ｓｍｅｎｔｏｆｏｘｉｄａｔｉｖｅＤＮＡｄａｍａｇｅａｎｄｒｅｐａｉｒａｔｓｉｎｇｌｅ［］－ｃｅ－ｌｌｕｌａｒｌｅｖｅｌｖｉａｒｅａｌｔｉｍｅｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｏｆ８ＯＨｄＧｂｉｏｍａｒｋｅｒ口．Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒｓａｎｄ］Ｂ－ｉｏｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ２０１０２６：１７４３１７４９，，５４ 西北大学硕±学位论文９Ｌａｒｓｏｎ－引Ａ．ＭＰｏｉｓｏｎＪＦｏｎｔａｎａ民？Ｊ．ｅｔａｌＡｃｅｔａｍｉｎｏｈｅｎｉｎｄｕｃｅｄａｃｕｔｅｌｉｖｅｒｆａｉｌｕｒｅ：［，巧，ｐＫｓｕｌｔｓｏｆ过Ｕ打ｉｔｅｄＳｔａｔｅｓｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒｒｏｓｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄＪ，Ｈｅａｔｏｌｏ２００，ｐｐｙ［］ｐｇｙ，４２６－：１３６４１３７２（）口却ＥｅｓｈａＢ？民？ＭｏｈａｎｂａｂｕＡ．Ｍ．ＭｅｅｎａＫ．Ｋ．约ａｌ．Ｈｅａｔｏｒｏ化ｃｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｏｆ，，，ｐｐｙＴｅｍｉｉｎａｌｉａａｎｉｃｕｌａｔａａｇａｉｎｓｔａｒａｃｅｔａｍｏｌｉｎｄｕｃｅｄｈｅｐａｔｏｌｌｕｌａｒｄａｍａｅｉｎＡ＾＾ｓｔａｒａｌｂｉｎｏｐｐｇｒａｕｒｎａａｃｎ－ｔｓ？ＡｓｉａｎＰａｃｉｆｉｃＪｏｌｏｆＴｒｏｐｉｃｌＭｅｄｉｉｅ２０１１４６：４６３４６９内，，（）１００ＣｈｅｅｄｅｌｌａＨ．Ｋ．，ＡｌｌｕｒｉＲ．ＧｈａｎｔａＫ．Ｍ．Ｉｋａｔｏｒｏｔｅｃｔｉｖｔｉｏｘｉｄａｎｔｅｆｅｃｔｏｆ，ｅａｎｄａｎ［］ｐｐＥｃｂｏ＊ｌｉｕｍｖｉｒｉｄｅ（Ｆｏｉｓｓｋ．Ａｌｓｔｏｎｒｏｏｔｓａｇａｉｎ巧ａｒａｃｅｔａｍｏ＾ｉｎｄｕｃｅｄｈｅａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎ）ｐｐａ－ＡｌｂｉｎｏＷｉｓｔａｒｒｔｓＪ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃＲｅｓｅａｒｃｈ２０１３７６：４９６５０１［］ｙ，，（）［１０１顾兴丽孙继红季辟？扑热息痛肝损伤机制硏究进展Ｊ．］，，［］中国临床药理学与治疗２００９５９６－学，１４５：６００，（）１０２ｈｋｅＫｎｉｈＲＭｈｅｒｏｌｅｏｆｏｘｉｄａｎｒｅｓｓａｎｄｒｅａｃｔｉｖｅｎｉｔｒｏｅｎＪａｅｓＨ．ｔＴ．．Ｂａｔ．Ｌ．Ｔｔｓｔ［］，ｇ，ｊｇ－ｓｅｃｉ的ｉｎａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ阴？２００３１４４３：２巧２８８ｐ，（）ａｎａａｎｉ－ｍｍａ１０３ＷＹ．Ｃ．ＨｕｎＫ．Ｍ．Ｉｎｖｉｔｒｏｔｉｎｆｌａｔｏｒｅｆｆｅｃｔｏｆａｉｅｎｉｎｉｎｔｈｅ［］ｇ，ｇｙｐｇｈｅ－ｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉｉｎｆｅｃｔｅｄｇａｓｔｒｉｃａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌｌｓＪ．ＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌ［］Ｔｏｘｃｏ－ｉｌｏ２０１３５３：３７６３８３ｇｙ，，１０４ＬｅｅＳ．Ｈ．ＢｌａｉｒＩ．Ａ．ＯｘｉｄａｔｉｖｅＤＮＡｄａｍａｅａｎｄｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅＴｒｅｎｄｓｉｎ［］，ｇ－Ｃ－ａｒｉｏｖａｓｃｕｌａｒＭｅｄｉｃｉ打ｅＪ．２００１１１３４：１４８１５５［］，（）－１０５ＣａｌａｆＧＭ．ＣｕｒｃｕｍｉｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒＪ，Ｃａｎｃｅｒ２０１４１５９１６９［］，，［］，，［１０６］ＭａｒｃｕｓＳ．Ｒ．ＤｈａｒｍａｌｉｎａｍＭ．ＩｒｏｎｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓａｎｄｄｉａｂｅｔｅｓＪ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ；，ｇ［］，ｎｄ－ＯｘｉｄａｔｉｖｅＳｔｒｅｓｉｓａＤｉｅｔａｒｙＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ２０１４５１５４，，０７ＫａｎａｍａｒｕＴ．ＫａｍｉｍｕｒａＮ．ＹｏｋｏｔａＴ．ｅｔａｌ．Ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｗａｃｃｅｌｅｒａｔｅｓａｍｌｏｉｄ。］，，，ｙ，ｄｅｏ－ｐｓｉｔｉｏｎａｎｄｍｅｍｏｒｙｉｍａｉｒｍｅｎｔｉｎａｄｏｕｂｌｅｔｒａｎｓｅｎｉｃｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆＡｌｚｈｅｉｍｅｒｓｐｇＮｅｕｒｏｓｃ－ｄｉｓｅａｓｅＪ，ｉｅｎｃｅＬｅｔｅｒｓ２０１５，５８７：１２６１３１［］，。０別ＫａｎｂｕｒＭ．，ＥｒａｓｌａｎＧＢｅａｚＬｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆｎ＞ａｌｅｌｌｏｎｌｉｖｅｒｄａｍａｅ，ｙ，ｙｊｙｇｉｎｄｕｃｅｄｂｙｐａｒａｃｅｔａｍｏｌｉ打ｍｉｃｅ口？ＥｘｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｄＴｏｘｉｃｏｌｏｉｃＰａｔｈｏｌｏ２００９］ｐｇｇｙ，，－６１２：１２３１３２（）１０９ＣｈｅｎＮ．ＤｕＢ．ＷａｎＹ．ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｒｏｅｒｔｉｅｓｏｆｕｕｂｅｈｏｎｅａｎｄｉｔｓ［］ｇ，，ｇ，ｐｐｊｊｙｒｔ－ｐｏｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｃｈｒｏｎｉｃａｌｃｏｈｏｌｉｎｄｕｃｅｄｌｉｖｅｒｄａｍａｇｅｉｎｍｉｃｅＪ］．Ｆｏｏｄａｎｄ［Ｆｕｎｃｔ－ｉｏｎ２０１４５５：９００９０８，，（）［１１０］ＭｏｈａｍｅｄＭ．，ＳｕｌａｉｍａｎＳ．Ａ．，ＪａａｆａｒＨ．，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆｈｏｎｅｙｉｎ－ｃｉａｒｅｔｅｓｍｏｋｅｉｎｄｕｃｅｄ化ｓｔｉｃｕｌａｒｄａｍａｅｉｎｒａｔｓＪ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｃｉｅｎｃｅｓ２０１１１２：ｇｇ［］，，５５０８－５５２１５５ 参考文献ｍ卢巧．中国蜂蜜抗氧化活性的研究Ｄ．西安西北大学２００６［］［］，，１１２ＣａｏＧ．Ａｌｅｓｓｉｏ吐Ｍ．ＣｕｔｌｅｒＲ－Ｇ．Ｏｘｅｎｒａｄｉｃａｌａｂｓｏ比ａｎ访ｃａａｃｉ泌ｓａｆｏｒ［］，，ｙｇｐ巧ｙ－ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ．ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌＢｉｏｌｏａｎｄＭｅｄｉｃｉｎｅ１９９３１４：３０３３１１内ｇｙ，，［１１３］ＪｏｎａｔｈａｎＭ．Ｈ．，ＫｅｖｉｎＤ．Ｃ．，ＩａｎＢ．Ｐ．，ｅｔａｌ．ＳｏｙｂｅａｎｉｓｏｆｌａｖｏｎｏｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｄｕｃｔｓｉｎｈｉｂｉｔｉｎｖｉｔｒｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎｏｘｉｄａｔｉｏｎｉｎｓｅｒｕｍＪ．ＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ［］ｙ，９９６７－１（：６６４６的）－．ａｍｓｃｈＷｏｏｄｒ．．ｖｅｌｏｍｅｎｎｄｖｔｉｏｆａｎｉｍｒｏｖ１ＭＯｕＳＨｉｌｌＭ．ＰｒｉｏＲＬＤｅｔａａｌｉｄａｏｎｅｄ［，ｐ］，ｐｐｏｘｙｇｅｎｒａｄｉｃａｌａｂｓｏｒｂａｎｃｅｃａｐａｃｉｔｙａｓｓａｕｓｉｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｓｔｈｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｒｏｂｅＪ．ｙｇｐ［］ｒｎａｌｏｆ－ＪｏｕＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒ２００１４９１０：４６１９４６２ｇｙ，，（）［＂ｙ宋立霞，王向化，吴紫云等．氧自由基吸收能力测定方法的研究进展［ｊ］，食品研究８２９－与开发，２００１２：１６６１７０，（）－－ｚＳｕＰＳａ－ｌｉｉｄ１１ＡｌｖａｒｅａｒｅｚＪ．Ｍ．ＧｏｎｚｌｅｚａｒａｍｓＡ．Ｍ．ｎｔｏｓＢｕｅｌａＧ．ｅｔａ．Ａｎｔｏｘａｎｔ［，，ｇ，巧ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｎａｔｉｖｅｍｏｎｏｆｌｏｒａｌＣｕｂａｎｈｏｎｅｙｓ［Ｊ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄ］Ｃｈｅｍ２００巧苗８１７－ｉｓｔｒｙ１Ｗ２４，，１１７曹巧．不．，卢巧陈卫军等同种类单花蜜对人血清脂蛋白氧化修饰的抑制作用机［］，－食品科学２００７２８１２：４３５４３８，，（）［１１８ＫｉｓａｏｌｕＡ．ＯｚｏｕｌＢ．ＴｕｒａｎＭ．Ｉ．ｅｔａｌ．Ｄａｍａｅｉｎｄｕｃｅｄｂａｒａｃｅｔａｍｏｌｃｏｍｐａｒｅｄ］ｇ，ｇ，，ｇｙｐ－ａｃｅ￣ｗｉｔｈＮｔｌｓｔｅｉｎｅｐ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＭｅ出ｃａｌＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ２０１４７７：４６３４６８ｙ巧］，，ｎＢａｓｉｌｉｏＣ．Ｌ．ＳｄｃｈｅｚＰ．Ｅ．Ｊ．ＭｏｔｉｎｏＡ．ｅｔａｌ．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｅｆｅｃｔｓｏｆｓｉｌｍａｒｉｎａｎｄ［＾ｇ，，ｙｉｔｓａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｌ化ｉｎｉｎｏｎｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅｓｔａｂｉｌｉｔａｎｄｈｅａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｌｓｉｓ．ｐｙｐｙ阴Ｃｈｅｍ－ｉｌＩｉ－－ｉｃｏＢｉｏｌｏｇｃａｎｔｅｒａｃｔｏｎｓ２００９１７９２３：２９７３０３，，（）２０ＲｅｉｃｈｌｉｎｇＪ．ＪＬＫａｌａｍＭＭ．Ｃｌｉｎｉｃａｌｕ化ｏｆｓｅｒｕｍｅｎｚｍｅｓｉｎｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅＪ．。］，ｐｙ［］Ｄｉｖ－ｉｅｓｔｅＤｉｓｅａｓｅｓ犯ｄＳｃｉｅｎｃｅｓＷ１２：１６０１１６１４ｇ，（）＂２。ＮａｉｋＳ．Ｒ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓａｎｄ也ｅｉｒｒｏｌｅｉｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｆｉｍｃｔｉｏｎｓ：ａｎｏｖｅｒｖｉｅｗＪ．虹ｄｉａｎ［］Ｄｒｕｓ２００３４０５０－１５１６ｇ，，，１２２ＲｅｉｔｅｒＲ．Ｊ．ＴａｎＤ．．ＯｓｕｎａＣ．ＧＥ．Ａｃｔｉｏｎｓｏｆｍｅｌａｔｏｎｉｎｉｎｔｈｅｒｅｄｕｃｔｉｏｎｏｆｏｘｉｄａｎｔｉｖｅ［］，￣ｓｔｒｅｓｓ．Ｂｋ）ｉｎｅｄＳｃｉｅｎｃｅ２０００７：４４４４５８口］，，１２ＮａｋｉＳＲＰａｎｄａＶＳｉｉｄａｎａｎｄｈｅａｒｉＧｉｎｋｏｂｉｌｏｂａ．．．．Ａｎｔｏｘｔｔｏｏｔｅｃｔｖｅｅｆｅｃｔｓｏｆ［引，ｐｐｇｈｅ－ｐｙｔｏｓｏｍｓｉｎｃａｒｂｏｎ化ｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎｄｕｃｅｄｌｉｖｅｒｉｎｕｒｉｎｒｏｄｅｎｔｓＪ．ＬｉｖｅｒＩｎｔ２００７ｊｙ［］，，２７－巧９：巧３１２４ＪｕｎｇＫ．ＨｅｎｋｅＷ．Ｄｅｖｅｌｏｍｅｎｔａｌｃｈａｎｅｓｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｅｎｚｍｅｓａｃｔｉｖｉｔｉｎｋｉｄｎｅ［］，ｐｇｙｙｙｌｉｖｅｒ－ｆｒｏｍｒｒｅｅａｄｃａｉｏｌｉｎｅ：ａｎｄａｔｓＪ．ＦＲｉｌＢｏｇｃａｌａｎｄＭｅｄｉｃｉ１９９６２０６１３６１７［］，，１２５杨娟．芹菜素对扑热息痛致急性肝损伤的保护作用及其机制研究Ｄ．苏州［］，苏州］［５６ ＼，西北大学硕±学位论文＼’大学之０１３５７ 攻读硕±期间取得的科研成果攻读硕±期间取得的科研成果＊＊１．ＮｉＣｈｅｎＹｕａｎＷａｎＨｕｉＧａｏＪｉａｌｉｎＹｕａｎＦａｎＦｅｎＷｅｉＧａｏＪｉａｎｂｉｎＺｈｅｎ．，ｇ，ｇ，，ｇ，ｇ，ｇＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｒａｔａｅｇｕｓｉｎｎａｔｉｆｉｄａｏｌｌｅｎｏｎＤＮＡｄａｍａｅＫｓｏｎｓｅｔｏｐｐｇｐｏｘ－ｏｘｉｄａｔｉｖｅｓｔｒｅｓｓＦｏｏｄａｎｄＣｈｅｍｉｃａｌＴｉｃｏｌｏ２０１３９５９：７０９７１４…，ｇｙ，，（）Ｗ幸东２．ＮｉＣｈｅｎｇｉ打ＤＵＹｕａｎＷａｎＨｕｉＧａｏ，ｅｉＣａｏ，ＫａｎｂｉｎＺｈｅｎ，ＦａｎＦｅｎ．，Ｂｇｊｇ，ｇｇＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｒｏｅｒｔｉｅｓｏｆｕｕｂｅｈｏｎｅｙａｎｄｉｔｓｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｃｈｒｏｎｉｃｐｐｊｊｐａ－ｌｃｏｌｉｏｋｉｎｄｕｃｅｄｌｉｖｅｒｄａｍａｅｉｎｍｉｃｅ机．ＦｏｏｄａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎ２０１４５５：９００９０８ｇ，，（）３．．．王远贾歌赵静蜂蜜抗氧化活性研究进展ｍ食品与发酵工，王萌程妮曹姊，，，，业２０１４４０７－。９：１２６，，（）５８ 西北大学硕±学位论文致谢时光甚巧，转眼间Ｈ年的研究生生活已经接近尾声，在西北大学这所古朴美丽的大学里，我度过了人生中最美好的岁月，留下了许多难忘的回忆，在硕±毕业论文完成一、么际，我想要说声感谢，给所有帮助和关屯过我的老师同学、家人和朋友。首先要感谢我的导师曹巧教授，他工作认真负责，生活态度积极向上，用他高尚的一品德感染着身边每一个人，作为曹巧教授的名研究生，我不仅在科研学习上获得了他悉也的教导和帮助，也在生活中体会到师长的关也，他教导我们成长，教育我们为人处事的道理和准则。曹巧老师对本论文的选题、实验、写作和修改都倾注了也血，在此我！想向敬爱的曹老师致最衷也的感谢在未来的工作生活中，我要继续学习曹老师从真严谨的工作作风，关也身边的同事和朋友。感谢程妮老师在我的实验和论文写作中给予的极大关也和帮助！程妮老师从我刚入一直关也和帮助我的学业和生活学到毕业，教会我各种实验技能，带领我学习理论知识，热情为我答疑解惑，给我许多有益的指导，在我陷入低谷时给我鼓励和安慰，她不仅是我学业上的导师，也是生活中的知也姐姐和真擎朋友。感谢高慧老师、王毕妮老师、邓建军老师和吕新剛老师，给我专业知识的教导和学业上的帮助！也要感谢实验室的贾琪、王锦梅、朱红娟、任乃艳等师姐师兄给我无私的帮助和真诚的关也！感谢同窗好友贾歌和周厚报＾１，向他们致最诚擎的感谢和最真也的祝福，希望他们（＾一切顺利！感谢王萌、赵静、杜冰、黄庆援等师妹在Ｗ后工作生活中，平安幸福，因为，兰年的研究生生活才如此丰富多彩有你们的陪伴，让人难忘和不舍，希望你们学业进！步，健康快乐一感谢好友潘柳依、郝芳芳和朱娜，Ｈ年的舍友情难Ｗ忘怀，我们起度过的日子里点点滴滴的欢笑和泪水都会永远留在我的记忆中！，衷也祝愿你们未来生活安宁美满感谢我的父母和兄长，为我创造最好的条件让我能够快乐安也的学习，给我鼓励和！支持，让我在最温馨和谐的家庭中成长，愿你们身体健康、工作顺利、生活美满甜蜜最后，感谢评审专家和参加本次论文答辩的专家们，感谢你们对论文提出的宝贵意见和建议！，谢谢你们５９