温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究 57页

华中农业大学硕士学位论文温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究姓名：刘芳申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：彭抒昂201206 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究摘要温州蜜柑是我国柑橘产业的重要栽培品种，粗皮大果率高是目前温州蜜柑生产中存在的一个突出问题，一旦形成粗皮大果，则果皮厚且粗糙，可溶性固形物含量较低，风味偏淡，果形似葫芦，造成其销售困难且价格低。目前关于粗皮大果的研究主要集中在现象调查和栽培措施等方面，其形成原因的研究相对较少，特别是解剖学和营养学角度少有报道。本试验一方面调查温州蜜柑粗皮大果的结果习性及特征，另一方面以国庆一号温州蜜柑(CitrusunshiuMarc．CV．GuoqingNo．1)为材料，从解剖学和营养学角度出发，比较从盛花前到果皮停止增厚(7月初)的发育过程中粗皮大果和扁平果果蒂处果皮的显微结构差异，盛花期至果实成熟整个发育过程中的果实品质差异，并在此基础上分析了粗皮大果发生的原因和关键时期，主要结果如下：1．粗皮大果结果习性调查粗皮大果主要发生在树体顶部，春梢、短粗结果母枝，主要着生于长度在6cm以下，粗度0．4—0．6cm的有叶结果枝，同时随结果枝上果实数目的减少而发生机率增大。2．粗皮大果与扁平果的果皮解剖结构差异(1)粗皮大果在花后21d中果皮细胞排列逐渐疏松，花后28d其外果皮细胞出现凹凸不平现象，这些均与扁平果在发生时间和程度上存在显著差异，可作为解剖观察、判断粗皮大果的结构特征。(2)花后7d至28d粗皮大果的果皮细胞层数增多，细胞直径增大，较扁平果差异明显，推断该时期是粗皮大果果皮增厚的关键时期。比较细胞层数和细胞大小对果皮厚度的影响，认为果皮的厚度主要决定于细胞层数，而非细胞大小。3．粗皮大果与扁平果的果实品质差异(1)在外观品质上，包括生长曲线、单果重、果皮厚度等，粗皮大果均在花后77d至91d左右表现出与扁平果的显著差异，且随着果实发育，粗皮大果的纵横径、单果重以及果皮的厚度均显著高于扁平果。(2)果实内在品质上，果实的可溶性固形物、固酸比的变化为先下降后升高，且粗皮大果低于扁平果，而可滴定酸先升高后随果实成熟而降低，但粗皮大果未表 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文现明显差异。花后77d至91d果实内可溶性糖和淀粉含量发生明显的相互消长的变化关系，对果实品质产生明显影响。4．粗皮大果形成的原因和关键时期(1)粗皮大果的果实细胞分裂速度快、果皮细胞层数多，可能是造成果实个大、果皮厚的细胞学原因，而果实成熟过程中淀粉转化量少，可溶性糖含量低是粗皮大果风味品质差的营养学原因。(2)花后7d至28d为解剖学、细胞学上粗皮大果形成的关键时期，花后77d至91d是粗皮大果与扁平果在品质上形成差异的关键时期，该两个阶段内应及时加强栽培管理措施，以预防粗皮大果形成及品质差异的发生。关键词：温州蜜柑；粗皮大果；果皮发育；果实品质 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究ABSTRACTSatsumamandarinisanimportantcultivarofcitrusindustryinChina．Highroughfruitincidenceisanoutstandingproblemofitsproduction．Therearemanyproblemsofroughfruit，suchasthickandroughpeel，lowTSS，lessflavour,thefruitshapeofgourd，whichresultintheirsalesdifficultiesandlowerprice．Atpresent，thestudiesaremainlyconcentratedontheinvestigationandcultivationmeasures，relativelyfewstudiesonitsformation，especiallyatanatomyandnutriology．Inthispaper,wehaveinvestigatedthehabitsandcharacteristicsofroughfruit．Ontheotherhand，histologicalstructuraltraitswerecomparedbetweenthepedicelpericarpofroughfruitandflatfruitfromfullbloomtmthepeelstopthickening(earlyJuly)useingthefruitofCitrusunshiuMarc．CV．GuoqingNo．1．Andthefruitqualityoftheentiredevelopmentuntilripeningwasalsoanalyzed．Thereasonsandcriticalperiodofroughfruitoccurrencewerediscussedontllisbasis．Theresultswereasfollows：1．TheinvestigateofroughfruithabitsRoughfruitisusuallyfoundonthetopoftree，springshoots、shortandthickbearingbasalshoot．Itmainlygrowsonthebearingshootbelow6cm，0．4．0．6cmthick．Atthesametime，itsoccurrenceoftenincreaseswiththereductionoffruitsnumber．2．Histologicalstructuraltraitsofpeelofrou曲fruitandflatfruit(1)Themesocarpcellofroughfruitbecameloosefrom21dafterflower．Itwasfoundthattheexocarpofroughfruitwasroughratherthansmoothfrom28dafterflower．Therearesignificantlydifferentfromflatfruitonhappentimeanddegree．Itcanbeusedasallanatomicalobservationofroughfruitstructuralcharacteristics．(2)Thenumberofcelllayersinpericarpandthecelldiameterincreasedduring7dto28dafterflower．Thereforethesedaysshouldbethekeyperiodforpericarpthickeningofroughfruit．Thethicknessofpericarpisduetothenumberofcelllayers，consideringtheinfluenceofhenumberofcelllayersandthecelldiameter．3．Thedifferencesofthefruitqualitybetweenroughfruitandflatfruit(1)Thereatesignificantdifferenceswithflatfruitontheappearancequalitiesofroughfruit，includingthegrowthcalve，fruitweight，pericarpthicknessfrom77dto91d3 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文afterflower．Theverticalandhorizontaldiameter,averagefruitweightandpeelthicknessweresignificantlyhigherthanthefiatfruitwiththefruitdevelopment．(2)TheTSSandsolid—acidratiooffruitdecreasedatfirstandthenincreased，andthecontentofroughfruitwaslessthanflatfruit．ButtheTAwasincreasedfirstthenreducedwithfruitmaturity；therewasnosignificantdifferencebetweenthetwokindoffruits．Form77dto91dafterflower,thecontentofsolublesugarandstarchperformancebecameamutualrelationshipbetweengrowthanddecline，whichmakeasignificantimpactonfruitquality．4．Thereasonsandcriticalperiodsoftheroughfruitformation(1)Thefasterfi"uitcelldivisionandmorenumberofcelllayersinpericarpmaybethecytologyreasonforbigfruitandthickpeel．Lessconversionofstarchduringfruitripeningprocessresultedinthelowcontentofsolublesugarwhichfurtherinfluencetheflavorqualityofroughfruit．(2)Theperiodof7dto28dafterflowerwascriticalforroughfruitformationatanatomyandcytology．77dto91dafterflowerwasanothercriticalperiodforroughfruittoformqualitydifferences．Cultivationmeasuresshouldbecarriedoutinthesetwoperiodstopreventtheformationandqualitydifferencesintheoccurrenceofroughfruit．Keywords：Satsuma；roughfruit；peeldevelopment；fruitquality4 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究缩略词表ABBREⅥATIoNS缩写符号英文名称中文名称DW砌FSIFSWPT明Dryweight干重Formalin-acetic福尔马林．乙酸一酒精固定acid．alcohol液Fruitshapeindex果形指数Fruitsingleweight单果重Peelthickness果皮厚度Titratableacid可滴定酸TSSTotalsolublesolid可溶性固形物5 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究1前言1．1课题的提出柑橘为芸香科(Ruatcea)柑橘亚科口uranotideiae)柑橘族(Ciertae)柑橘亚族(Cirtinae)的常绿乔木植物，主要分布于热带、亚热带地区。柑橘是世界上重要的农产品之一，全世界有135个国家和地区生产柑橘(盛文磊，2008)。柑橘的生产和出口是许多国家的重要收入来源，同时其营养价值、药用价值及保健价值都很高，被世界公认为保健食品。中国是柑橘的主要原产国之一，有4000多年栽培历史。近年来，我国柑橘产业发展很快，柑橘成为南方地区的主要经济作物。根据农业部种植业信息网数据库所列的数据显示：2010年，我国水果的种植总面积为1154．39万hm2，其中柑橘的种植面积达221．10万hm2，居所有水果首位，产量为2600多万吨，仅次于苹果，居第二位。柑橘鲜果由于品质好，营养丰富，为消费者喜爱。目前世界柑橘鲜果的生产比例约为66％(单扬，2006)，我国柑橘长期定位以鲜食为主，栽培品种主要有宽皮柑橘、橙、柚、杂柑等，其中宽皮柑橘的产量约占71％(吴厚玖，2010；中国柑橘学会，2008)。温州蜜柑属宽皮柑橘，目前已成为宽皮柑橘中世界栽植最广的一个品种。温州蜜柑的果实品质优异，是良好的鲜食果品(曾柏全等，2007)。其优质果具有果形中等且均匀，果形扁平，果皮薄，果面光滑，果肉浓甜无核，柔软化渣等特点(刘春荣等，2008)。但是温州蜜柑生产上容易出现大小年现象，小年时结果少、粗皮大果多、品质差(伍涛，2003)，另外在正常年份枝梢顶端和座果少的枝梢上也容易形成粗皮大果(Iglesiaseta1．，2007)。粗皮大果的果形似葫芦，果大，果皮厚且粗糙，果肉不化渣，囊衣韧，可溶性固形物含量较低，风味淡(梁云明等，2010)，这些不良品质造成粗皮大果销售困难、价格低，粗皮大果已经成为我国温州蜜柑产区普遍存在的问题。同时，目前的柑橘鲜食市场上更偏重小型优质果(伍涛，2003)，如大型果每kg的售价只有1元的话，小型果每kg的售价则达到5元左右。因此，找出温州蜜柑粗皮大果的形成原因和关键时期，可以一定程度上提高温州蜜柑品质，增加橘农收入，具有重要意义。 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文前人的研究中多从柑橘树体结果习性、栽培措施等方面(彭顺四等，1994a；彭顺四等，1994c；张云贵等，2011；梁云明等，2010)提及粗皮大果现象，但关于粗皮大果形成原因的研究并不多，且主要集中在矿质营养和同化产物分配等方面(李喜宏等，2003；李国怀和刘娟旭，1999；Monerrieta1．，2011)，有关解剖学的研究相对较少。本研究从解剖学角度入手，比较从盛花前到果皮停止增厚(7月初)(何天富，1999)的整个发育过程中，粗皮大果和扁平果果蒂处果皮的显微结构差异，从细胞学角度分析粗皮大果果皮细胞层数和细胞大小情况，同时比较发育过程中粗皮大果和扁平果的果实品质、果实矿质营养和同化物含量的变化情况，以期找出温州蜜柑粗皮大果形成的原因和关键时期，为生产上有效控制粗皮大果提供理论依据。1．2前人的研究进展1．2．1柑橘果实发育研究果实作为果树的一个重要器官、主要收获对象，其各方面的品质都被人们不断进行研究、提高。柑橘果实与其他果实相比较具有其特有的构造，其花为子房上位，由多心皮构成，果实是由子房发育而来的真果。果皮分为外果皮、中果皮和内果皮，花期前后，由内果皮向心室内长出很多突起，随后突起发育成汁胞，为柑橘的可食部位(李玲等，1998)。柑橘果实品质主要包括外在品质和内在品质，外在品质又包括果实形状、果实大小、果皮厚度、色泽等，内在品质则包括可溶性固形物含量、总糖总酸含量等(曾祥国，2005)。1．2．1．1果实生长动态一般认为，柑橘果实发育为典型的单S型生长曲线，即开始生长速度较慢，之后速度加快直至急速生长，达到生长发育高峰后，又逐渐转为缓慢生长，至停止生长，生长周期以慢一快一慢的节奏进行(沈胜男，2009)。柑橘果实的发育可以分为幼果期一果实膨大期一果实成熟期。何天富等(1988)对温州蜜柑的研究中发现，温州蜜柑果实从谢花后子房膨大形成幼果起，到果实成熟所需时间大约为140天左右，从谢花后到7月下旬生理落果基本停止为幼果期。此期间内，果实各部分组织的细胞快速分裂，细胞数量增长很快，发育成幼果，果实组织致密，果实体积和重量都增长缓慢。虽然该时期的生长速度较慢，但相对生 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究长速率最高，是果实生长能力最强的阶段(李玲等，1998)。7月至8月中旬正值果实快速发育期，该时期果实主要进行细胞增殖、积累细胞质，在胶质状的细胞质中水分被牢固地吸住，所以切开果实几乎看不到水分流出。果实膨大期从7月下旬到10月上旬果实开始着色时停止。此阶段果实内部各组织细胞迅速增大，期间出现两次生长高峰，8月末至9月，囊瓣开始急剧发育，果肉细胞中形成袋状的液胞，用来贮存由叶片合成而来的糖和细胞质中形成的柠檬酸等有机酸，液胞随这些物质的流入、存储而渐渐肥大。10月时果实生长速率减缓，该阶段果实组织逐渐变疏松，果实体积和重量均达到最大值。最后是果实成熟期，主要进行果实着色和汁胞内水分和糖酸、维生素等有机物质的积累，并完成果实成熟。1．2．1．2果实大小发育果实品质向来是人们关注的重点，但研究较多的是果实的内在品质，而对果实外在品质研究较少，研究果实外观品质的形成过程及原因，可以有效改善果实外观。果实大小是衡量果实外在品质的重要指标之一。前人关于果实大小的决定因素其研究结果相对一致，果实大小主要由果实的细胞数量、细胞体积、细胞密度及果实内的细胞间隙所决定。(SchroederCA，1953；王春飞等，2007；中川昌一，1982；Guo，2011)除了这些内在因素外，果实大小也受到很多外在因素的影响，包括果树生理、形态、营养、激素、环境和栽培措施等(李明启，1989；宋志海等，2002)Cruz等(2002)研究奇异果开花时间对果实大小的影响时得出结论，果实最终大小取决于花前因素和果实的早期生长，果实细胞分裂的活跃时期通常都在花后数周内。同种果实大果的细胞数量通常大于小果，这和“库”的大小、活性有关，在相对较低的吸收供应条件下，细胞分裂可能是限制果实生长的一个主要因素(BertinNeta1．，2001)。鳄梨果实挂树期间一直进行细胞分裂，果实的大小与细胞数目之间存在密切关系(Schroeder，1953)。果实大小与细胞数量和细胞大小的密切关系已经在梨、杏、番茄等多种果实上得到证实(李学强等，2003；王荣花等，2000；Bunger-Kiblereta1．，1982)。此外，荔枝的生长发育研究中有观点认为果肉细胞的数量不仅受细胞分裂次数的影响，还受到果肉干物质变化的影响(李建国等，2003)。营养是果实生长发育的物质基础，营养物质的转运和积累在果实发育中有重要作用。细胞分裂期幼果生长所需的有机营养均来自树体的储备，其储藏量是影响果实细胞数量的重要因子，在果实膨大期，需要大量的碳水化合物供应以保证果肉细胞的膨9 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文大。果树的碳水化合物主要通过叶片的光合作用合成，并且由叶片将营养供应给果实，所以叶果比对果实的细胞数量、果实生长有重要作用(曾骧，1990)。李劲和李学柱(1992)通过对柑橘生物学特性的研究得出，柑橘果实的最终大小与结果枝的粗度，特别是与结果枝果梗粗度存在明显的正相关。这一结论同样可以用源库理论解释，结果枝和果梗的增粗，可以增加水分和养分向果实中运输，从而促进果实增大。张云贵(1994)研究认为锦橙结果枝叶片数与叶面积呈显著正相关，与果重呈显著直线相关；枝粗与果重呈显著正相关，与果实体积呈极显著相关。栽培措施对果实大小也有明显的改变效果。例如修剪、疏花、增粗果枝等措施，都能通过提高果实的营养供应，增强“源”和“库”，来增加果实细胞数目，增大细胞体积，从而增大果实。1．2．1．3果皮发育规律及解剖结构研究柑橘的果实由子房发育而来，由多心皮构成，属于柑果。果实与果柄相连接的部分称果蒂，果蒂相对一端称果顶。柑橘果皮可分为三部分，外果皮(exoearp)、中果皮(mesocarp)和内果皮(endcarp)，子房外壁发育成柑橘果实的外果皮，中壁发育成内果皮。柑橘果实的外果皮由外层表皮和下表皮组成，外层表皮是由薄壁细胞、保卫细胞等组成，厚的角质层覆盖在表皮上并渗入细胞垂周壁之间。外层表皮的细胞较小，呈多角形，排列紧密整齐，细胞随着果实发育不断增大，向椭圆形发展，且持续分裂，在果实接近成熟时细胞壁加厚。油胞层主要位于表皮下的薄壁细胞内，直至外、中果皮的交界处都有分布。油胞内有网状结构和空腔，其中分布油腺和晶异细胞。油胞周围为薄壁细胞，多为圆形、卵圆形或多边形(涂俊凡等，2010)。外果皮细胞从表皮向内逐渐增大，逐渐变为卵圆形，细胞间隙也有所增大(李聪敏，2009)。外果皮细胞先进行垂周分裂，促进果皮表面积增大，而后转为平周分裂，进而增加细胞层数。中果皮位于外果皮和内果皮之间，为白皮层，其靠近表皮和内果皮的细胞都比较小，排列紧密，但中间的细胞体积较大，排列较为疏松，细胞间隙大，在果实成熟时呈现海绵状，故也称之为海绵层。果实增大主要是中果皮细胞的分裂、增厚。幼果期，中果皮细胞大小接近，排列紧密，维管束分布于其中，当果皮逐渐成熟时，10 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究其细胞开始变形，形成网纹区，主要的维管束分布在内中果皮，环绕心皮背面和中心部，承担养分和水分的运输工作(何天富，1999)。内果皮位于心皮内侧，由内表皮和紧挨内表皮的薄壁细胞组成，细胞排列紧密。内果皮为柑橘果实的可食部分，即囊瓣。囊瓣中包含汁胞，果实成熟后汁胞中充满果汁。纵贯果实中心的海绵状组织为果心，是与果蒂相连接的维管束中心柱，运输养分和水分。但是关于中果皮和内果皮的分界目前并没有统一标准，刘孝仲(1985)引入内中果皮的称法，他认为海绵层底部的薄壁细胞与中果皮紧密相连，又属于内果皮的一部分，因而称之为内中果皮。何天富(1999)则认为海绵层为中果皮，而海绵层底部排列紧密的薄壁细胞为内果皮的一部分。从子房形成到前期的生理落果，这段时期为细胞分裂期，期间中果皮细胞分裂较快，增厚迅速。在第一次生理落果结束后，细胞的分裂基本停止，细胞开始膨大，到第二次生理落果结束(6月上旬)，该阶段果实膨大缓慢，主要为果皮增厚。8月上旬左右果实进入第二次膨大高峰，果皮海绵组织逐渐变薄(何天富，1999)。进入果实的第三次膨大高峰，果皮基本定型，并开始进入转色期。柑橘果皮在果实发育过程中的变化规律为果皮细胞先分裂增殖，后转入细胞膨大，在接近成熟过程中逐渐变薄。但是对于不同大小的果实来讲，果皮的变化规律略有差异，这种差异在甜瓜、苹果等水果上都有报道。Higashi等通过显微观察比较FuyuA和Natsu4两种甜瓜品种发育过程中的果皮结构，发现在花后3周左右果实大小和果皮厚度开始出现差异，同时大果FuyuA的果皮在发育过程中持续增厚，但小果Natsu4的果皮在花后35d出现变薄趋势(Higashieta1．，1999)。1．2．1．4果实糖酸发育规律果实中糖、酸含量和糖酸比是决定其风味最重要的指标，一般认为柑橘果实酸甜适口的指标为糖酸比在8—12之间，因此增加果实中糖的含量，降低酸含量已成为提高柑橘果实品质的主要目标。糖类物质的转化导致果实甜味增加，糖含量的高低是决定果实品质的重要因子。柑橘果实以可溶性糖积累为主，主要含有蔗糖、葡萄糖和果糖，果实膨大前期其比例为4：1：1，而膨大后期其比例则为2：1：l(文涛和熊庆娥，2001；唐鹏，2005)。其中三种糖分的甜度有所不同，以果糖最甜，蔗糖次之，葡萄糖最低。果实生长发育过程中的果实品质变化，主要是可溶性糖的变化，其总的趋势是不断增加。在果 华中农业大学201：2届硕士研究生学位论文实膨大期和成熟期，兴津温州蜜柑果汁中全糖含量持续增加，表明果实中的糖在不断积累，但是蔗糖、果糖和葡萄糖在发育过程中的变化并非完全一致。1997年Richordson的研究结果表明，盛花后温州蜜柑果实中蔗糖、果糖和葡萄糖的含量逐渐增加，而花后八周开始蔗糖含量突然下降，果糖和葡萄糖含量继续保持上升趋势，他认为在果实发育早期，糖代谢影响了糖的种类和含量的变化。柑橘果实发育过程中，其中的糖主要来自于叶片同化的光合产物，而大部分以蔗糖或山梨醇的形式，经过韧皮部的长途运输，最终卸载到果实中，并多数以淀粉的形式贮存于果肉细胞中，果实无甜味；随着果实成熟，淀粉酶、转化酶等酶活性提高，不溶性的淀粉逐渐转化为可溶性糖并在细胞质中积累，使果实甜味增加(陈俊伟等，2000)。而果皮中的糖主要来自于果皮自身的光合作用和部分叶片光合产物的输入。但多数研究认为光对果皮糖含量积累的影响并不是通过影响果实发育前期果皮自身的光合能力来增加果皮糖含量；而是主要在果实发育后期，果皮丧失了自身光合能力后，光作为一种信号，提高果皮的库强度，促进叶片的同化产物向果皮中运输，从而增加果皮中糖的积累(Komatsueta1．，1999)。果实中的酸味主要来自于有机酸，果实中的有机酸主要包括柠檬酸、苹果酸和酒石酸，不同果实积累的有机酸种类不同，苹果主要积累苹果酸，其次为枸橼酸，而成熟柑橘果实以柠檬酸为主，其次为苹果酸。柑橘果实的发育过程中有机酸的变化规律一般为果实发育时积累有机酸，果肉中的有机酸含量在发育前期增长较快，果实体积为成熟体积的一半左右时，有机酸含量达最大值，之后随果实成熟，有机酸含量下降(罗安才等，2003)。Cercos等发现柑橘果实的可滴定酸含量在花后50d左右稍有下降，到花后80d急剧增加，100d左右又急剧下降，而其中主要为柠檬酸含量下降。导致柑橘果实成熟后期有机酸含量下降的原因有很多，主要有果实体积增大，果实含水量剧增使有机酸稀释，有机酸分解量大于合成量等。光照、水分、温度、土壤、营养元素、叶果比等很多因素都会影响柑橘果实中有机酸的含量。例如，目前生产中上可以通过控水以及选择不同砧木等栽培措施，明显达到增加果实单果重，增加糖度、降低酸度的目的(Treebyeta1．，2007)。1．2．2粗皮大果的果实品质特点很多关于果实大小对果实品质的影响研究均表明，果实大小与果实品质存在一12 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究定的相关性。对杨梅的研究结果显示，杨梅果实的纵径、横径随着果实的增大或减小，也发生相应的增大或减小，而其中以横径的变化更为明显。同时，测定单果重在13．319的果实品质，发现单果重>／3lg的果实其可溶性固形物含量低只有10％，而<159果实可溶性固形物含量较高，达11．5％，东魁杨梅果实总糖和总酸的变化随果实大小的递增出现下降的趋势(龚洁强等，2007)。贾惠娟等(2003)研究果实大小对白肉桃果实品质的影响时得出结论，在相同品种白肉桃中，大果与中等大小的果实相比，甜味和酸味均低、香气弱、风味淡、肉质也差。在柑橘中，果实大小同样与果实的品质存在相关性。张云贵等(2011)研究甜橙果实大小对果实品质的影响：可溶性固形物和可滴定酸含量随果实的增大均呈下降趋势，固酸比随果实的增大呈上升趋势。锦橙较大的果实皮厚、酸低、可食率较低，但固酸比高；较小的果实皮薄、酸高、可食率较高(丁志祥等，1993)。前人对温州蜜柑的研究中也得出相似的结论，温州蜜柑的果实含酸量随着单果重的增加而降低(Hirano，1979；彭四顺等，1995)。通过对不同大小等级的兴津温州蜜柑果实品质初步调查，结果显示，随果实横径由大到小，早熟温州蜜柑果实的果形指数呈现逐渐增大的趋势，可溶性固形物含量表现逐渐降低的趋势，而含酸量之间的差异不显著(王华利等，2006)。库尔勒香梨中存在一种粗皮果，属于一种梨果实的生理病害。粗皮果多发于树势旺、座果少的树。粗皮果外观品质表现果形不正、个头小、萼部突出等缺点，内在表现果肉硬度大，其水分、可溶性固形物、还原糖和维C含量均低于正常果，含酸量高于正常果，风味和品质均较差(邵月霞，2007)。橘农将温州蜜柑粗皮大果俗称为大泡桔或葫芦果，一般指横径65mm以上的果实，在市场上属次等果。温州蜜柑的粗皮大果与正常果实相比，外在品质表现为果个更大，果实皮厚、硬度小；内在品质差，果肉纤维含量高，不化渣，可溶性固形物低，极不耐贮藏，容易枯水。测定同一株10年生宫川温州蜜柑，其细皮小果可溶性固形物可达12％。而粗皮大果则只有9％，相差达3％。1．2．3粗皮大果形成原因的研究进展1．2．3．1结果部位、结果枝类型等结果习性因素柑橘的结果母枝种类很多，有春、夏、秋梢一次枝，春夏、春秋、夏秋梢等二次枝和两年生以上的老枝，均能抽生出结果枝，一次枝结果性好，座果率明显高于 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文二次枝。温州蜜柑以春梢母枝占绝对优势，春梢中有效结果母枝也最多，同一树冠不同生态部位结果母枝均以春梢为主，生态部位由树体下部向上，母枝座果率逐渐增加。同样刘孝仲(1985)对锦橙全部结果母枝的分析统计结果显示，结果母枝的长度和粗度与结果数目密切相关。结果数目多的植株以4-6cm长的结果母枝占优势，结果母枝较细；而结果少的植株8．10cm长的结果母枝多，枝梢较粗。另外，结果母枝类型对果实大小也有影响，刘孝仲统计锦橙的610个结果母枝，其中春梢母枝果实横径在6-8cm范围内的最多，秋梢母枝上的果实较小，多果结果母枝上的果实也较小。柑橘枝干的分枝角度和分枝级数对结果有极大的影响。直立枝顶端优势较强，含赤霉素、氮素和水分都较多，生长旺盛，同时营养和水分转运快，不利于花芽分化；而水平枝或者下垂枝梢则相反，枝梢上的叶片制造出的营养物质通过韧皮部向下流动时，在枝干转弯处受到阻碍，枝条开张能够积蓄更多营养物质，从而促进花芽分化(陈杰忠，2005)。根据中国农科院柑橘研究所对成年锦橙树的观察，只有具有适宜粗度的健壮结果枝才能形成花芽或着果。结果母枝越粗，越能够促进结果枝增粗，从而产生大果。果梗的粗度也是影响果实品质的一项重要栽培因素。果梗是各种养分进出果实的通道，果梗越粗，果形越大，果梗粗细与果实品质也具有一定的相关性(李劲等，1992)。徐建国调查(2006)宫川早生温州蜜柑，以果梗粗度在3．5rnm以下的品质为好，其可溶性固形物含量、总糖、还原糖含量均较高，并以3．1．3．5mm梗粗的品质最优。张云贵(1994)报道，锦橙结果枝的叶片数与果实单果重呈显著的直线相关关系，但与果实总糖、总酸、可溶性固形物含量无明显相关性；0．5片叶的结果枝，枝粗与单果重呈显著正相关；枝粗与果实体积呈极显著相关。前人关于影响桠柑果实品质的相关因素所做的综合研究结果表明，树冠外围所结桠柑果实的单果重和果实横径均极显著的大于树冠中部果，同时树冠中部果又极显著的大于内膛果，可见由树冠外围向内果实有逐渐减小的趋势，果皮厚度和果皮重量百分率也是由树冠外围至内逐渐减小，即碰柑树冠外围所结果实与冠中和内膛相比，果个偏大，果皮偏厚。同时，果实大小、果皮厚度及果皮重量百分率均依着生部位升高而显著增加(彭顺四等，1994a)。 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究彭顺四等(1994b)分析结果枝类型和结果枝叶片对槛柑果实品质的影响，认为柑橘结果枝类型以及结果枝叶片数目对果形有明显的影响。无叶结果枝所结果实的果形为近球形，而有叶结果枝所结果实与无叶结果枝相比果形较扁，并且随着叶片数增加，果形变扁程度不断加大，果实单果重以及果实横径均显著增大，果皮不断增厚。库尔勒香梨中的粗皮果、突顶果主要发生在座果少、树势旺盛的树上，而座果多、树势较弱的树上发生概率低。同一株树的树冠上部、顶花芽、短果枝和直立生长旺枝突顶果多，而树冠下部腋花芽、中长果枝、平伸或下垂枝结粗皮果、突顶果少。同一花序中先开花并座果的花朵，突顶果发生多(邵月霞，2007)。温州蜜柑果实的品质依结果部位或结果状态，即结果枝的方向、粗细等均有明显差异。从树体的各个部位来看，树冠内部或者下部枝梢所结果实易为有效果，其果皮虽然光滑，但多呈黄色，糖度低，品质差。相反，树冠外部的果实一般多生长在向上而且粗壮的枝梢上，容易形成大果，果皮厚且粗糙，着色虽浓，但同样糖度低，品质不好。另外从枝干的粗壮度而言，凡是向上或斜向上的结果枝一般粗壮的多，吸收营养的能力强，其上所着生的果实易肥大，但果皮厚粗糙，果实味淡。反之，向下或斜向下生长的结果枝一般细的多，其上所生果实果个小，即使是着生在树冠外部，也难以形成大果，以中等大小果实较多，且大部分果皮薄且光滑，果皮橙红，糖多酸少(吴耕民，1989)。陕西城固县对柑橘粗皮大果产生情况的调查数据显示，从栽培管理方面看，初结果桔园及管理粗放且肥水条件较好的柑橘园粗皮大果产生比例大，盛果期柑橘园和管理较好的橘园比例小(敖义俊等，2009)。树体营养生长旺盛，挂果少的柑橘树，因叶果比大、肥水充足，多产生粗皮大果。另外，由于橘园树体修剪不科学，导致结果部位分布不均或外移，树冠外围果实在果实膨大期争夺水分养分的能力优于树冠内膛果实，从而形成局部果实强势生长，导致果大、皮厚。1．2．3．2矿质营养因素营养是果树生长和结果的物质基础，矿质营养水平与果树生长发育密切相关。尽管栽培品种和栽培条件是提高果树产量、改善果实品质的主要手段，但果树的营养与施肥条件也是影响其产量和果实品质的重要因素。在各种矿质元素中，以N、P、K三种元素与树体发育和果实成长的关系最为密切。 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文氮素是构成生命的要素之一，是植物生长必不可少的营养元素，在植物整个生命活动过程中起重要作用，被喻为“生命之素”。氮是构成细胞的重要组分，对植物的器官建造、物质代谢、生化过程等都有不可替代的作用。同样，氮素对果树的生长发育、产量形成以及果实品质好坏起着极为重要的作用。柑橘叶片贮存大量氮素，叶片含氮量约占全株的40％，枝干占30％，果实20％，其余主要在根中(庄伊美，1994)。柑橘春季抽梢和花果发育消耗较多的氮，其对氮的吸收全年都有较高的需求，但周年波动不大。周学伍和李质怡(1989)对先锋橙叶片含氮量的年变化分析，表明在花期和幼果期，随植株的生长和根系对氮吸收量的增加，叶片含氮量显著提高，并达到高峰期；生理落果后7月初叶片含氮量略有下降，之后维持在较高水平；花芽分化后期，叶片含氮量逐渐下降，尤以采果后的下降更甚。程湘东等(1990)对温州蜜柑果实中10种矿质元素含量的年周期变化进行了研究，指出果实与叶片元素含量的年周期变化规律不同，果实中矿质元素含量比叶片低，同时果实矿质元素浓度的最高峰期比叶片来得早。针对氮元素的含量变化而言，在果实生长发育过程中，果肉中氮含量总的趋势是逐渐降低，且果皮和果肉的变化趋势相似，到果实发育中期含量趋于稳定。氮是叶绿素的主要组成元素，适宜范围内随氮素水平的提高，植物体光合速率提高。氮元素含量对树体的营养生长包括树冠大小、一年生枝条长度、叶面积等均有影响。氮肥在果树生长季通过增加各器官干物质量以及器官内氮的浓度增加了树体的氮素含量；当年营养生长的干物质积累量受氮素影响最大。但过量的氮素含量可能会导致树体营养生长过旺，引起成龄树树冠郁闭，芽体质量差，使幼树花芽分化延迟，减少花芽数量，座果率下降，最终导致产量降低(李付国，2006)。在苹果、梨等多种果树中的研究结果一致，认为氮能促进花芽分化、增加成花数和提高座果率(Kabneta1．，2011；姜喜，2007)。关于氮素对果实品质的影响也有很多报道，缺氮的条件下适量施加氮肥可以提高柑橘果实的糖含量，但施氮过多则会使果实含糖量下降(赵智中等，2003)，Embleton(1973)认为在高产水平范围内，随着树体氮元素含量的增加，对甜橙品质会产生负面影响。当氮肥用量超过一定量时，会导致其果实变大，果皮增厚，果面粗糙，果汁减少，果实含糖量降低，着色推迟等问题(秦巧平等，2004)。越橘、番茄、甜瓜等果实发育营养生理的研究中均发现，～定范围内增施氮肥可以改善果形，增大果个，但是过量的氮可能导致果实偏大，单 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究果重增加，果皮增厚变粗(赵爽，2007；Mishraeta1．，2004；宋世威，2008)。柑橘果实发育前半期施氮肥过多，果皮变厚而粗糙，果实发育后半期施氮肥过多，则不仅果皮厚、粗糙，且着色不良，易形成浮皮(吴耕民，1989)。磷是植物必需的大量元素，在植物体内以多种形式存在，是磷脂和核酸的必要成分，也是核蛋白、卵磷脂及许多辅酶的组分，在植物的呼吸作用、光合作用等代谢及许多生理生化反应中起重要作用。柑橘植株中磷的分布与氮相似，以分生组织最丰富，花器、种子以及新梢、新根生长点和细胞分裂活跃部位聚集较多量的磷(庄伊美，1994)。叶片含磷量年周期变化比较平稳均衡。有报道成年温州蜜柑的枝梢和果实氮磷钾三要素季节变化，枝梢从4月开始迅速吸收氮、磷、钾，6月达到最高峰，7．8月下降，氮、磷在9．10月再次上升，钾在10．11月再次升高，12月基本停止。磷对果实品质产生的功效较稳定，包括使果皮变薄，果汁率增加，可溶性固形物减少，含酸量降低，糖酸比提高，维C含量降低，但对果实大小并无明显影响(庄伊美，1994)。前人研究指明，适量增施磷肥可以促进树体营养生长，促进花芽分化，提高座果率，使果实皮薄汁多，增糖降酸。在7月上中旬以磷肥作为壮果肥施用，可以一定程度上促进果实后期膨大，同时提高果实可固含量，但大量施用磷肥也可能造成果实变小，出现果面粗糙、果实皱皮、产量下降等现象。柑橘磷元素缺乏会导致果径增加，果皮增厚，尤其是果皮和果肉结构疏松，产生浮皮和空心，其含酸量提高，果皮色淡，果汁减少(鲁剑巍等，2004；Yudaeta1．，1983)。钾是影响柑橘果实产量和品质的重要元素之一。在植株中钾主要以离子状态存在，具有很强的移动性。柑橘对钾的需求量较大，开花前钾主要集中在叶片；花期树体中的钾向花器官转移，主要富集于花器官中；幼果期维持较高的钾水平；果实成熟期，叶片中的钾大量向果实转移。可见，钾营养与柑橘果实生长发育具有密切关系(李国怀等，1999)。吕斌(1993)的研究表明：钾不仅主要分配于果实，也是果实的优势组分，柑橘果实含钾量占树体总钾量的40％左右，在果实的各种矿质养分中，又以钾含量最高，占灰分总量的25％一43％。柑橘钾元素的周年动态较氮素的波动大，在12月至1月期间几乎停止吸收，3月急剧增多，4．5月钾素含量达全年最高值，6月和9月出现两次下降，在10．11月 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文出现第二个最高峰(Royeta1．，1943)。钾在每个果实中的绝对含量随着果实生长而不断增加(何天富，1999)柑橘的钾素含量与果实的体积大小呈极显著的正相关关系，钾素促进柑橘果实的细胞分裂和膨大；钾素含量与果实的含酸量正相关，而与固酸值呈负相关，钾促进柠檬酸的合成；钾素还能促进果肉、果皮的细胞分裂，减少裂果，使果皮坚实，促进果汁中维C含量增加(陈守一等，2001)。适量供钾可以提高树体钾营养水平，促进植株的同化作用，使枝梢生长和树势正常，座果增加，果实增大，促进果皮发育，增加果皮厚度，增强果皮抗破裂能力，提高果实耐贮性，但降低果实可溶性圆形物含量(Bar-Akiva，1975)。施用钾肥后，提高了叶片的含钾量，随着果实生长，叶片中的钾向果实中转移，促进细胞膨大而成大果；叶片与果实的钾含量变化基本同步，叶片内钾含量高的果实中也高(姜喜，2007)。果皮厚度、粗皮率随钾含量增加而增加。植株钾含量过剩会出现果实大，皮厚而粗糙，果肉粗，汁少，味酸，固形物含量低和延迟成熟等症状(董燕和王正银，2004；CicalaandCatura，1992；Lestereta1．，2010)。不同果实发育过程中氮磷钾的含量变化规律并不一致。梨果实发育过程中N、P、K含量一般随果实生长而逐渐降低；甜柿果实中N含量在发育前期含量最高，随果实膨大呈下降趋势，P、K的浓度在果实近成熟期，随着糖分的增高而升高(姜喜，2007；刘勇等，2000)。果实大小与果实矿质元素含量有密切的关系。缺氮会导致苹果、梨等果实变小；磷缺乏会引起果肉细胞数目减少；钾含量与柑橘、苹果、梨、桃等果实的大小呈正相关关系；缺乏Ca、S、Fe会使柑橘果实变小；Mg、Zn,B含量与苹果等果实的大小呈正相关(宋志海等，2002)。施用磷、钾肥促进了果实膨大，提高单果重，进一步提高柑橘产量，磷钾配施的增产效果较单独施用磷肥或钾肥更为明显(林咸永等，2006)。1．2．3．3同化产物因素源．库理论及源．库单位的可变性是果树栽培中整枝、环割、摘心、疏果等技术的生理基础。源是光合产物的生产者，是库的营养基础；库是积累、需求、消耗光合产物的器官，对源具有反馈调节作用。源．库单位是指同化物供求上有对应关系的 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究源与库的合称，源．库单位的概念是相对的，其组成并不是固定不变的，而是随生长条件而变化(王忠，2001)。柑橘枝梢中碳水化合物的含量在花芽分化时期即11月至次年2月间达到较高水平。从花期开始，淀粉和可溶性糖含量有短期升高，在果实细胞分裂时期基本保持在较低水平，而进入细胞膨大期，可溶性糖开始积累(Mehouachieta1．，1995)。温州蜜柑果实中淀粉含量的变化，从谢花期到7月下旬，单位鲜重的淀粉含量都处于较高水平，之后随着果实发育进入迅速膨大期，淀粉含量迅速下降。杨正荣等(2011)研究实生桃树中可溶性糖、淀粉含量变化关系时得出观点，可溶性糖作为光合作用的直接产物与淀粉在植物树体内的累积呈反方向。可溶性糖合成淀粉从而导致树体体内可溶性糖含量下降，淀粉含量增加：相反，淀粉水解形成可溶性糖而使淀粉含量下降，可溶性糖含量增加。可溶性糖是构成果实品质的最大要素，果实生长发育过程中通常伴随着的果实品质变化，主要是可溶性糖的变化。淀粉是果树植物中最常见的贮藏碳水化合物，其水平可以代表植物总体上或者局部上的有机营养水平。柑橘是柑果类水果，成熟果实的淀粉含量很低，虽然一般果树的最终产物水果中淀粉含量很少，淀粉含量也不是评价其质量的主要指标，但是果实中可溶性糖和淀粉的含量在树体内的变化会直接影响果树树体的生长发育，从而最终影响果实的产量和品质。前人调查宽皮柑橘隔年结果与碳水化合物的关系，结果表明淀粉、总可溶性糖等几种碳水化合物的含量，大年结果树显著低于小年结果树，表明大年结果树存在碳水化合物胁迫，说明在大年负载过重的情况下，果实过量地消耗了碳水化合物，而小年结果树碳水化合物充足。促花促果措施提高淀粉和可溶性糖含量，抑花措施降低其碳水化合物的含量(周家容和周俊辉，2004)。McFadyell等研究枝梢修剪后，由于碳水化合物的供给量改变而对澳洲坚果的产量及品质产生影响。下部枝梢结果数量多于顶部枝梢，同样进行枝梢修剪处理后，果实明显增大，且抽发新枝的树体比去除新枝所结的果实大。大多数有花植物都需要一定量的叶数、碳水化合物含量和糖浓度才能成花，叶片中的淀粉和可溶性糖浓度增加促进花芽分化，果实中的淀粉和可溶性糖浓度促进果实发育，对幼果期的柑橘进行摘叶处理，会造成果个减小，果重下降。 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文果实与叶片是果树中典型的源．库单位。叶果比影响果实发育，也是影响果实大小及糖酸含量的一个重要因素，叶果比能改变源(叶)内光合产物、水分和营养元素向库(果实)的供应，从而影响果实外在和内在品质。许多研究显示，叶果比与单果重的相关性十分明显，叶果比越大，单果重越大，叶果比偏小，则果实偏小(胡敏等，2009；徐建国，2006)。叶片可溶性糖含量正相关地反映树体养分运输与利用状况，表明树体在这一时期营养代谢情况(周开兵等，2002)。Simmons(1998)研究了不同叶果比对芒果品质的影响，发现随叶果比增加，可溶性固形物含量显著增加，但可滴定酸含量差异不大。1．3研究目的与内容综上所述，前人在柑橘果实发育过程的解剖结构和品质动态变化方面的研究已经很多，关于粗皮大果形成原因也有部分报道，但主要集中在栽培措施和施肥水平方面。目前还未对粗皮大果形成过程中解剖学结构变化及其形成的关键时期进行研究，对于粗皮大果形成原因的系统研究尚显不足。鉴于此，本研究以国庆l号温州蜜柑(CitrusunshiuMare．CV．GuoqingNo．1)为实验材料，重点比较果实发育过程中粗皮大果和对照扁平果的果皮解剖结构差异，果实品质、NPK含量、同化物含量变化规律及差异，以期探究粗皮大果形成的原因和形成关键时期，为预防粗皮大果产生奠定理论基础。本研究的内容主要包括以下几个方面：(1)粗皮大果与扁平果结果习性调查调查常规果园中粗皮大果与扁平果的结果部位、结果母枝特性、结果枝特性等内容，反映粗皮大果的主要结果习性，同时为粗皮大果样品采集提供依据。(2)粗皮大果与扁平果的果实生长曲线测定；(3)粗皮大果与扁平果果蒂处果皮的显微结构及发育动态观察本实验以粗皮大果和扁平果果蒂处的果皮为试验材料，观察由花期到果皮停止增厚过程中果蒂处果皮的解剖结构特征及变化，分析果皮细胞的动态变化过程，探究粗皮大果形成的解剖学原因及形成关键时期。(4)粗皮大果与扁平果发育过程品质、营养等变化的比较本实验同样以发育过程中的粗皮大果和扁平果为材料，比较单果重、果皮厚度、可溶性固形物、可滴定酸等常规品质指标的变化；同化物可溶性糖、淀粉的含量变化，分析粗皮大果对果实品质的影响，并探讨粗皮大果形成的营养学原因。 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究2材料与方法2．1粗皮大果结果习性调查在果实接近成熟期时(9月份)，调查宜昌宽皮柑橘综合试验站果园中的盛果期温州蜜柑，分别统计100个粗皮大果与扁平果的主要结果习性。调查项目主要包括：粗皮大果结果部位、结果母枝类型、结果母枝粗度、结果枝长度粗度、粗皮大果有叶结果枝与无叶结果枝比例、结果数量等，并做百分数的差异显著性分析。2．2．果皮发育过程显微结构观察2．2．1试验材料本试验在华中农业大学国家种质资源圃内进行，以盛果期国庆1号温州蜜柑(CitrusunshiuMare．CV．GuoqingNo．1)为试验材料。选取生长势一致的5株国庆1号，分别在花期和幼果期对树体左半部进行大幅度疏花疏果处理，减少座果量，促进粗皮大果形成；而右半部不做处理，促成密集结果，视为扁平果对照。2．2．2样品采集与处理从4月19日(花前7d)起，每隔1周采样1次。从第二次生理落果(花后35d)开始，采样间隔为2周1次，至花后77d(果皮基本不再增厚)结束。粗皮大果材料取自树体左半部，直立枝、徒长枝及树冠外围枝梢的顶端或座果少的枝梢。对照组果实选取扁平果，采自树体右半部枝梢中部、座果较多枝梢。采下的果实立即放入白封袋中，带回实验室。果实样品用水冲洗干净后，用解剖刀在果蒂部位切取长宽为0．5cm×O．2cm，深至白皮层结束的果皮数块，投入FAA固定液中，利用循环水式真空泵抽真空30rain，在4"C冰箱内固定24h，并在该条件下储存备用。2．2．3试验方法2．2．3．1主要试验器材LeciaRM．2255自动切片机，OLYMPUSBX61显微摄影机，SHZ—D(III)循环水式真空泵，KD—H生物组织烘片机，石蜡切片所需一般器材。 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文2．2．3．2显微制片法采用常规石蜡切片方法(李和平，2009)，切片厚度为8．10urn，甲苯胺蓝染色，中性树胶封片。2．2．4测量方法OLYMPUSBX61显微摄影机进行显微结构观察和摄影。应用Image-ProPlus6．0软件进行显微测量和细胞学统计。测量油胞横向和纵向直径，以横向和纵向直径的乘积作为油胞大小(李建国等，2002)；测定果皮至果实中心柱维管束放射线方向上的果皮细胞直径和细胞层数；统计半径为200um的圆形视野中细胞的数目为细胞密度(李蕾，2006；Schroeder，1953)。2．3果实发育过程品质及营养分析2．3．1试验材料试验材料采用石蜡切片切取果皮后的剩余部分。测定同化物含量的样品，超纯水洗净擦干后，105℃杀青30min，之后75℃烘3．5d，干燥器中保存备用。每棵树作为一个重复。2．3．2主要试验器材手持折光仪WVT(0％．80％，成都光学厂)，AvantiJ．26XP型离心机(Beckman，USA)，紫外分光光度计(岛津UV-1800)2．3．3测定项目与方法2．3．3．1果实大小测定从第二次生理落果结束开始，每棵树随机选取5个粗皮大果，5个扁平果，分别挂红绳标记，定期测定果实的纵横径。如果遇到有果实脱落，则选择附近相近大小的果实代替并重新标记。用百分之一电子天平测单果重。2．3．3．2可溶性固形物和可滴定酸的测定将每棵树所采果实分别榨汁，三层纱布过滤，将滤汁混合后用手持折光仪测定其中可溶性固形物含量。吸取5ml过滤后的果汁，定容至100ml，吸取5ml果汁稀释液，用NaOH中和滴定的方法测得可滴定酸含量(李锡香，1994)。 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究2．3．3．3可溶性糖和淀粉含量测定采用葸酮硫酸法联合测定果实中的可溶性糖和淀粉含量，参考李合生(2000)和秦长平(2006)的方法，略有改动。称取50—100mg过100目筛的果实干样于15ml离心管，加入7ml80％乙醇，80℃水浴提取30min后取出离心(3000rpm，5min)，收集上清液，重复提取两次，每次10rain，离心，将三次上清液合并于烧杯中，85。C恒温水浴，使乙醇蒸发至2-3ml，转移至25ml容量瓶，定容，用于可溶性糖测定。沉淀中加入3ml蒸馏水，搅拌均匀，放入沸水浴中糊化15min，冷却后加2ml冷的9．2mol／L高氯酸，不时搅拌，提取15rain后加蒸馏水至10ml，混匀离心10min，上清液转入50ml容量瓶，再向沉淀中加入2ml4．6mol／L的高氯酸，搅拌一提取．力口水．离心．移上清液，水洗沉淀2次，合并上清液于50ml容量瓶，定容，用于淀粉含量测定。与葸酮试剂反应后，分别在630nm和620nm波长测定可溶性糖和淀粉含量。2．3．4统计分析方法用Excel软件处理数据，计算平均值和标准偏差，绘制图表，应用SAS软件ANOVA过程分析粗皮大果与扁平果的差异显著性。23 华中农业大学2012届硕士研究生学位论文3结果与分析3．1粗皮大果与扁平果的结果习性调查3．1．1粗皮大果结果部位调查口树体顶部目树体中部宙树体下部囡树体内膛15％69％图l粗皮大果结果部位分布比例Fig．1TheProportionofSettingFruitPositionofroughfruit调查100个温州蜜柑粗皮大果在树体上的着生位置，将柑橘树主要分为树体顶部、树体中部、树体下部和树体内膛四个部分，统计粗皮大果的主要结果部位。由图1可以看出，温州蜜柑的粗皮大果主要着生在树体顶部，约占70％左右，而树体中、下部共占26％，树体内膛所占比例最小。可见树体顶部所结的果实比其他部位更容易形成粗皮大果。3．1．2结果母枝类型调查表1粗皮大果与扁平果各类型结果母枝比例Table1TheProportionofbearingbasalshootofroughfruitandfiatfrua从表1中看出，温州蜜柑粗皮大果主要形成在春梢和秋梢结果母枝上，其中以春梢为主，夏梢结果母枝上形成比例很低。扁平果的结果母枝类型同样以春梢和秋 温州蜜柑粗皮大果的解剖形态和品质变化研究梢为主，夏梢较少。在结果母枝类型上粗皮大果和扁平果差异不显著，只有在夏梢结果母枝上分布差异显著，粗皮大果在夏梢上的分布显著低于扁平果。3．1．3结果母枝长度和粗度口粗皮大果roughfruit70厂一扁平果flatfruit口粗皮大果roughfruit■扁平果flatfruitArr_r_。厂厂-l10．O以下i0．0-15．015．0以上结果母枝长度Bearingbasalshootlength(era)0．30以下0．30—0．450．45以上结果母枝粗度Bearingbasalshootcoarseness(era)图2粗皮大果(A)和扁平果(B)结果母枝长度和粗度分布比例Fig·2Theproportionofbearingbasalshootlengthandcoarsenessofroughfruitandflatfruit结果母枝是越年生长的枝梢，其上抽枝开花结果。结果母枝分类标准为，长结果母枝长度在15cm以上，粗0．45cm以上，中结果母枝长10—15cm，粗0．3一O．45cm，短结果母枝长在lOcm以下，粗0．3cm以下。结果母枝粗度是指自母枝基部lcm处测量所得粗度。通过统计结果母枝的长度和粗度(图2)，可以看出粗皮大果与扁平果在各类型结果母枝上的分布趋势相近，长度方面，以短结果母枝结果最多，长结果母枝结果最少，中结果母枝居中；粗度方面，粗度