反相梯度液相色谱法测定食品中阿斯巴甜糖精钠安赛蜜 3页

52海峡预防医学杂志2009年第15卷第4期StraitJPrevMed2009Vol.15No.4表4对巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期的影响(n=12,x?s)忘、神经衰弱等病症,取得了较好疗效。药理研究表明,五味睡眠潜伏期子的仁醇和木脂素类化学成分,能延长戊巴比妥钠所致小鼠组别初始体重(g)末体重(g)P值(min)睡眠时间;五味子醇甲为五味子仁乙醇提取物中主要有效成对照组2012?1123919?2114014?817-分之一,能有效减少小鼠自主活动,增强中枢安定药氯丙嗪及低剂量组2014?1133819?2134010?81601926利血平对自主活动的抑制作用,对抗中枢兴奋药咖啡因、苯丙中剂量组2013?1124110?1183616?71401253胺对自主活动的兴奋作用,抑制小鼠由电刺激或长期单居引高剂量组2013?1143818?2123316?614*01039起的激怒行为,且后者作用更明显,表明五味子醇甲有广泛的*:与对照组比较P<0105。中枢抑制作用和安定作用[3]。五味子对动物神经系统功能有调节作用,可改变某些脑区及其同工酶活性,影响单胺类介质212对小鼠直接睡眠作用观察结果各剂量组入睡动物数水平而改善神经系统功能,使丘脑、纹状体的小脑等脑区活性及睡眠时间均为0,与对照组类似(P>0105),见表1。表明同时降低,大脑皮层内抑制过程加强和集中,产生正诱导,使该受试物对小鼠无明显的直接睡眠作用。分化更完善,从而使大脑皮层的兴奋和抑制过程趋于平衡。213对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响中、高剂量组本研究表明,五味子能明显延长戊巴比妥钠诱导的睡眠睡眠时间长于对照组(P<0105),见表2。表明该受试物能时间,缩短巴比妥钠诱导的睡眠潜伏期,说明其具有镇静、催延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间。眠作用,并对剂量呈现一定依赖性。中药五味子供食用药用,214对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响各剂量组动具有安全、有效性,有古今中外应用基础经验与广阔开发前物入睡率与对照组类似(P>0105),见表3。表明该受试物景。未来,随着人们保健意识的不断增强,保健产业的发展将未能增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠发生率。会越来越大,五味子在保健产业上将发挥出它的更大作用。215对巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期的影响随剂量增高,动物入睡潜伏期有缩短之势,其中高剂量组短于对照组(P<参考文献:0105),见表4。表明该受试物能缩短巴比妥钠诱导的小鼠睡[1]刘郁.催眠镇静类药物的不良反应[J].辽宁医学杂志,2001,15眠潜伏期。(6):282-284.[2]李廷利,黄莉莉,郝丽莉,等.具有镇静催眠作用的中药活性成分3讨论研究[J].中医药信息,2003,20(3):18-20.睡眠是生理行为,也是保障身心健康的重要条件。长时[3]钮心懿,王维君,边振甲,等.五味子有效成分/醇甲0的中枢神经间失眠会给患者带来巨大的身心损害,严重影响人们的生活系统作用[J].药学学报,1983,18(6):416-421.和工作。一些中药对于改善睡眠具有有效且不产生依赖性的收稿日期:2009-04-13;修回日期:2009-05-27特点[2]。五味子在中医临床上常配以其它药物治疗失眠、健(本文编辑:方林)文章编号:1007-2705(2009)04-0052-03中图分类号:R155.5文献标识码:A=实验研究与检验技术>反相梯度液相色谱法测定食品中阿斯巴甜糖精钠安赛蜜卢忠魁,尚轶摘要:[目的]研究反相梯度液相色谱法测定食品中阿斯巴甜、糖精钠和安赛蜜含量。[方法]采用C185Lm310mm@250mm窄径柱为分析柱,以CH3CNB(NH4)2SO4为流动相,流速:0160ml/min,波长214nm实验,应用梯度液相色谱技术对阿斯巴甜、糖精钠、安赛蜜进行分析测定。[结果]在110~2010mg/L范围内有良好线性关系(r:019999),平均回收率为9210%~10115%。[结论]实验表明该方法具有良好的线性关系,精密度好,结果准确,实用性强。关键词:食品检验;高效液相色谱法;阿斯巴甜;糖精钠;安赛蜜阿斯巴甜(Aspartame),又名甜味素,化学名天门冬酰苯0104g/kg。安赛蜜,化学名乙酰磺胺酸钾,ADI值0~15丙氨酸甲酯,是食品添加剂中的一种甜味剂。其甜味是蔗糖mg/kg体重(WHO/FAO,1994),是目前饮料中较常用的食甜度的200倍,可溶于水、丙酮。由于它有清凉感,热量少,适品甜味剂,限量为013g/kg,为GB2760允许限量使用的食[1]宜使用于糖尿病、肥胖症及防龋食品。目前国家未规定使用品甜味剂;糖精钠很多食品有使用,在一般食品中限量为限量,但因产品中含有苯丙氨酸,故苯甲酮尿症患者禁用。0115g/kg。目前这3种甜味剂采用等度液相色谱法分别测[2-4]FAO/WHO(1984)规定用量为甜食[011%,胶母糖[定,本研究应用梯度液相色谱技术同时分离测定,得到满110%,饮料[013%,早餐谷物[015%;每日允许摄入量意结果。第一作者简介:卢忠魁,男,主管技师。从事理化检验工作。1材料与方法作者单位:吉林市疾病预防控制中心理化检验科,吉林132001。111仪器AGILENT1100高效液相色谱仪,AGILETN 海峡预防医学杂志2009年第15卷第4期StraitJPrevMed2009Vol.15No.453B01103化学工作站,在线脱气机,四元泵,紫外可变波长检测11313工作曲线分别吸取标准使用液4、8、12、16、20Lg/(美国安捷伦公司);HUMANPOWERÓ纯水机(韩国)。ml各5Ll注入液相色谱系统分离测定,以保留时间定性,以112试剂乙腈(HPLC级)过012Lm有机滤膜;0102mol/峰面定量绘制各组分标准曲线方程。各组分标准曲线方程分L硫酸铵溶液:称取21642g硫酸铵溶于超纯级水中,定容至别为:Y阿斯巴甜=412349251@amt+115478214;Y糖精钠=1000ml,过0145Lm滤膜;阿斯巴甜、糖精钠和安赛蜜标准1117652371@amt+313646169;Y安赛蜜=518723162@amt-溶液:准确称取各010500g,以流动相溶解定容至50ml,此溶110241217。液每毫升相当于1100mg。113实验方法2结果[2]11311样品的制备碳酸饮料:称取约10100g经超声波脱211流动相的选择初步实验以国标方法操作,以原国标气样品于50ml容量瓶中,加纯水至刻度,混匀后经0145Lm检验方法中流动相为基础进行调整。当按0102mol/L硫酸滤膜过滤,滤液备用。铵(740)+甲醇(170)+乙腈(90)+10%H2SO4(1ml)测定含果汁、果肉饮料:称取约10100g混合均匀样品于50时,安赛蜜峰拖尾,糖精钠出现平顶宽峰,无法定量。只有阿ml容量瓶中,加纯水至刻度,混匀,于离心机中4000r/min斯巴甜峰形较好。当按0102mol/L硫酸铵(800)+甲醇离心5min,取上清液经0145Lm滤膜过滤,滤液备用。(150)+乙腈(50)+10%H2SO4(1ml)测定时,安赛蜜峰较固体样品:称取约2100g均匀样品于25ml容量瓶中,加好,糖精钠峰很宽且托尾。阿斯巴甜峰形较宽,出峰时间过长适量纯水并于超声波振荡中振荡提取5min,以纯水定容至约20min。改用乙腈B硫酸铵、甲醇B硫酸铵为流动相测刻度,混匀,以4000r/min离心5min,取上清液经0145Lm定,三者仍不能很好分离。实验发现应用上述条件,欲获得3滤膜过滤,滤液备用。种添加剂的良好分离较难,关键是它们的容量因子k"范围较11312色谱条件色谱柱:ZORBAXEXTEND-C185Lm宽。为使3种物质得到合适的分离,根据tg/tG>0125时需采[5]310mm@250mm;检测器:紫外可变波长检测器;波长:214用梯度分析的色谱要求,采用梯度分离。分别应用CH3CNnm;柱温:25e;流动相:CH3CNB(NH4)2SO4=5B95;流B(NH4)2SO4(0102mol/L)=5:95为起点,按表1条件作线速:0160ml/min;进样量:5Ll;梯度条件:乙腈,0~3min,5%性梯度和分段梯度分离,结果见下表1,本试验选用条件3进~5%;3~12min,5%~45%。行分段梯度实验,获得满意结果。色谱见图1。表1线性梯度和分段梯度条件及分离结果序号CH3CN体积分数分离结果15%~65%0~12min3种分离较好,但出峰时间较短,易受干扰25%~5%0~5min5%~50%5~12min只有安赛蜜分离较好35%~5%0~3min5%~45%3~12min3种分离较好,出峰时间较适宜45%~5%0~2min5%~55%2~13min3种分离较好,但安赛蜜处不够理想添加剂甜蜜素,各有机酸(柠檬酸、苹果酸、酒石酸)和焦糖色等均不干扰实验测定;常用防腐剂如山梨酸和苯甲酸不干扰实验;维生素合成剂等亦不干扰测定。215线性范围、检出限、精密度及回收率试验在本实验条件下,阿斯巴甜、糖精钠和安赛蜜在110~2010mg/L范围内有良好线性关系。最低检出限:安赛蜜01002g/L、糖精钠01001g/L、阿斯巴甜01005g/L。加标回收率试验测定10次,结果见表2。表2阿斯巴甜、糖精钠、安赛蜜回收率试验结果(n=10次)本底含量加标量测量值回收率RSD试验项目(Lg)(Lg)(Lg)(%)(%)图13种组分的色谱图样品:安赛蜜02018150921501121糖精钠8617040124140941251182212分析波长的选择分别选用不同波长进行分析测定。阿斯巴甜151102033150921001117由于各种组分的紫外最大吸收波长不同,摩尔吸光系数差距质控:安赛蜜181802037150931501178较大,为获得各组分相对均衡的响应,以及对各组分最大允许糖精钠02018190941501132浓度的限量,本试验最终先择214nm为分析波长,使3组分阿斯巴甜020201301011502115均有较高的响应值。213色谱柱温的选择在试验条件下,以20、25、30、40e进3讨论行分离,结果显示柱温的改变对分离无显著的影响,只改变分实验应用反相梯度液相色谱技术,通过查阅相关的技术析时间,即随温度升高,分析时间偏短。故本试验选择柱温箱文献建立了同时测定饮料中阿斯巴甜、糖精钠和安赛蜜的梯温度为25e。度液相色谱方法。应用于实际样品测定,实验结果满意。方214干扰试验在实验条件下,饮料中可能存在的常用食品法具有稳定的回收率,良好的线性关系及精密度,在市售饮料 54海峡预防医学杂志2009年第15卷第4期StraitJPrevMed2009Vol.15No.4的日常检测中未见有对分析产生干扰的物质;由于采用了[3]GB/T22254-2008.食品中阿斯巴甜的测定[S].ZORBAX窄径柱为分析柱,以大大节约流动相的消耗,可完[4]骆和东,贾玉珠,朱宝平.高效液相色谱法多波长同时检测饮料全满足同时测定此3种甜味剂的需要。中的5种食品添加剂[J].海峡预防医学杂志,2005,11(2):12-14.[5]施奈德LR,格莱吉克JL,王杰,等.实用高效液相色谱法的建立参考文献:[M].北京:化学工业出版社,2000:158-160.[1]卫生部食品卫生监督检验所.食品卫生标准使用手册)))食品收稿日期:2009-01-23;修回日期:2009-05-06卫生标准分册[M].北京:中国标准出版社,1996:229.(本文编辑:方林)[2]中华人民共和国卫生部.食品卫生检验方法)))理化部分(二)[M].北京:中国标准出版社,2003:203-207.文章编号:1007-2705(2009)04-0054-02中图分类号:R12311文献标识码:A=实验研究与检验技术>离子选择性电极法测定生活饮用水中氨氮12朱克清,谢鹏摘要:[目的]研究一种适合基层使用的生活饮用水中氨氮测定方法。[方法]采用离子选择性电极法测定,并与纳氏试剂分光光度法比较。[结果]该法具有操作简单、快速、准确、干扰少等优点。测定3份合成水样,相对标准偏差为0150%~2144%,检出限(3D)01032mg/L,回收率9510%~10617,结果两法类似。[结论]此法实用性强,适合基层用于生活饮用水中氨氮的测定,结果满意。关键词:饮用水卫生;离子选择性电极法;氨氮测定;卫生检测氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮可反映生活饮用水受污染11311标准曲线制作分别吸取氨氮标准使用液0、0110、程度及自洁程度,是生活饮用水监测的重要指标之一。生活0150、1100、5100和10100ml于25ml烧杯中,各加纯水至饮用水中氨氮测定方法主要有纳氏试剂分光光度法、酚盐分10ml,此标准系列浓度分别为0、0110、0150、1100、5100和[1]光光度法和水杨酸盐分光光度法。我们采用离子选择性电10100mg/L(以NH3-N计)。放入搅拌子于电磁搅拌器上搅极法直接测定生活饮用水中氨氮含量,其准确度较高,试剂容拌,插入氨气敏电极,再加入1ml离子强度缓冲液,搅拌下读易配制,稳定性好,且对环境不造成2次污染,适合基层实验取平衡电位值(1min内变化不超过1mV时,即可读数)。室使用,介绍于下。11312水样测定吸取10ml水样于25ml烧杯中,以下步骤与11311相同(溶液中氨氮含量过高时,需稀释后测定)。1实验部分11313求氨氮质量浓度以电位值为纵坐标,氨氮活度[Q111仪器PHS-3C型酸度计,上海雷磁仪器厂;电磁搅拌(NH3-N)=-logA(NH3-N)]为横坐标,在半对数纸上绘制标器;501型氨气敏电极,江苏电分析仪器厂。准曲线。在标准曲线上查得水样中氨氮的质量浓度。或用计112试剂所用试剂均用纯水)))新鲜去离子水配制(电阻算器计算电位值)))氨氮活度的拟合方程,代入方程回归,再率1812M8#cm)。求得氨氮的质量浓度。11211电极内充液0101mol/L氯化铵和011mol/L氯化[2]钠:称取氯化铵015349g及氯化钠51844g,用纯水定容至2结果与讨论1000ml。采用上述方法,我们对3份不同浓度的合成水样进行了11212离子强度缓冲液氢氧化钠(5mol/L)-Na2EDTA6次测定,并与纳氏试剂分光光度法进行比较,结果显示曲线(015mol/L)-乙醇(1+9)混合溶液[3,4]:称取氢氧化钠2010g线性良好,试验精密度、回收率均较满意。及Na2EDTA#2H2O1816g溶于100ml乙醇溶液(1+9),211标准曲线的建立GB5749-20065生活饮用水卫生标贮于聚乙烯瓶中。准6将氨氮的安全指标限定为015mg/L,远小于生活污水中11213氨氮标准储备液[Q(NH3-N)=1100mg/ml]将氯的氨氮含量。故我们将标准曲线的测定范围定的较低,可适用于废水及生活污水中氨氮的测定,如浓度超出上限可稀释化铵置烘箱内,105e烧烤1h,冷却后称取318190g,溶于纯水,于容量瓶内定容至1000ml。后再测定。氨氮工作曲线见表1。11214氨氮标准使用液[Q(NH3-N)=10100mg/L]吸取212检出限按试验方法测定全程序空白样20次,统计其标准偏差,以3倍标准偏差计算,检出限为01032mg/L。10100ml氨氮标准储备液(11213),用纯水定容至1000ml。213无氨水的制备无氨水可用蒸馏水的重蒸馏法制得,也113试验方法可用离子交换法制得,试验证明这种新鲜去离子水完全可以第一作者简介:朱克清(1971)),男,主管技师。主要从事食品、环境达到无氨水的效果,且更经济、方便。卫生理化检验工作。214电极内充液的选择在参考文献的基础上,选择了作者单位:11丰县疾病预防控制中心,江苏221700;21丰县食品药0101mol/L氯化铵-011mol/L氯化钠缓冲液作电极内充液,品监督管理局,江苏221700。线性更好,相关系数达019999以上,提高了曲线的斜率。