意大利蜜蜂春繁阶段代用花粉中适宜蛋白质水平的研究 57页

山东农业大学硕士学位论文意大利蜜蜂春繁阶段代用花粉中适宜蛋白质水平的研究姓名：郑本乐申请学位级别：硕士专业：动物营养与饲料科学指导教师：胥保华20120614 山东农业大学硕士学位论文中文摘要．蜜蜂在早春时期需要充足的蛋白质营养恢复群势，繁育新蜂。此时，外界气候条件差、无蜜粉源，需人工饲喂代用花粉满足蜂群的生长繁殖。但是，目前在配制代用花粉时缺乏科学依据，导致饲喂效果差，因此，迫切需要研究代用花粉中蛋白质适宜需要量。第一部分为意大利蜜蜂春繁阶段不含蜂花粉的代用花粉中适宜蛋白质水平的研究。早春选取蜂王质量及群势基本一致的30群意大利蜜蜂(ApismelliferaligusticaSpinola),随机分为5个试验组和1个对照组，每组5群蜜蜂。试验组分别饲喂蛋白质水平为20．O％、25．O％、30．O％、35．O％和40．0％的5种不添加蜂花粉的代用花粉，对照组饲喂油菜花粉。每隔12天测定一次蜂群群势，并检测蜂群采食量、工蜂初生重以及蜂体蛋白含量的影响。结果发现，(1)蜜蜂对于对照组油菜花粉的取食量最高，显著高于蛋白质水平为40．0％的饲料(P0．05)，饲喂蛋白质水平为35．O％、40．O％代用花粉的工蜂体蛋白含量显著高于对照组(P<0．05)。第二部分为意大利蜜蜂春繁阶段含蜂花粉的代用花粉中适宜蛋白质水平的研究。早春选取蜂王质量及群势基本一致的意大利蜜蜂(ApismelliferaL．)25群，随机分为1个对照组和4个试验组，每组5群蜜蜂。对照组饲喂油菜花粉，试验组分别饲喂蛋白质水平为25．O％、29．5％、34．O％和38．5％的代用花粉。通过试验比较不同蛋白质水平的代用花粉对工蜂存活率；各试验蜂群每隔12d测一次封盖子量及蜂群群势；待新蜂出房后。测定工蜂的初生重及体蛋白含量；工蜂血淋巴蛋白浓度及中肠蛋白酶活性；工蜂咽下腺的发育情况；测定vg、CAT、CuZnSOD和MnSODmRNA相对表达量。试验结果表明，(1)经过30天室内饲养，饲喂代用花粉的工蜂，34．O％试验组工蜂存活率最高，但是显著低于对照组(P<0．05)；(2)代用花粉蛋白质水平对蜂群群势及封盖子量均影响显著(尸O．05)：(3)34．0％试验组工蜂初生重与对照组差异不显著(尸>O．05)，工蜂头部和胸部蛋白含量随代用花粉蛋白质水平增大而增大；(4)代用花粉蛋白质水平在29．5％到38．5％之间对工蜂血淋巴蛋白浓度影响差异不显著(P>0．05)，随蛋白质水平的增大，中肠蛋白酶活性存在升高又降低的趋势，34．0％试验组活性最高；(5)29．5％和34．0％试验组工蜂咽下腺腺泡面 意大利蜜蜂春繁阶段代用花粉中适宜蛋白质水平的研究积在6、12和18日龄时均大于对照组；(6)代用花粉蛋白质水平对CATmRNA相对表达量影响不显著(胗O．05)，34．O％试验组瞻mRNA相对表达量显著高于其他代用花粉组，随蛋白质水平增大，CuZnSOD和MnSODmRNA相对表达量提高；(7)当代用花粉含25％蜂花粉、总能为17．5MJ／kg时，回归分析表明，春繁阶段饲喂意大利蜜蜂蛋白质水平为31．7％的代用花粉，可获得最大总产子量。综上所述，代用花粉中蛋白质水平显著影响春繁阶段意大利蜜蜂的群势增长、工蜂的质量，不添加花粉的代用花粉蛋白质水平在30．0"--35．O％范围内效果最佳，添加花粉的代用花粉蛋白质适宜范围为29．5"-"34．0％。关键词：意大利蜜蜂：春繁阶段：代用花粉；蛋白质水平n 山东农业大学硕士学位论文Optimallevelofproteininpollensubstituteofhoneybee(ApismelliferaL．)duringtheperiodofspringmultiplicationAbstractAnnualearlyspring，honeybeebroodlesscolonies，withthepopulationsoflong—livedworkers，recommencerearingbroodactivelybeforetheforagingseasonstart．However,honeybeeshavenoforagingopportunityonaccountofinclementweatherandlessresourcecanbegatheredduringtheearlyspring．Inthepracticalproduction，pollensubstitutesaresometimesnecessarytoproviderequirednutrientstocoloniesforrearingbroodandpopulationgrowth．Thepollensubstituteshadnotachievedtheeffectofpollen，therefore，theresearchofscientificpollensubstitutebecomesveryurgent．Panl：Optimallevelofproteininpollensubstitutes(hadnopollen)ofhoneybee(ApismelliferaL．)duringtheperiodofspringmultiplication．Intheearlyspring，30Ap／smelliferaL．colonieswhichhadequalsizeandqueenqualitywererandomlydividedinto5treatmentgroupsand1controlgroup．Thetreatmentgroupswerefedonexperimentaldietscontainingdifferentdietaryprotein(20．O％，25．0％，30．0％，35．0％，40．O％)，andthecontrolgroupwithrapepollen，respectively．Theresultsindicatedthat，1．Thefoodintakeofcoloniesthatfedonrapepollenwassignificantlyhigherthanthe40．O％group(尸0．05)，theproteinconcentrationofheadandthoraxcapsulesincreasedsignificantlywithincreasingdietaryproteinlevels妒<0．05)．4．Themeanhemolymphproteinconcentrationincreasedwithincreasingproteinlevels，andnosignificantlydifferenceWasobservedfrom29．5％CPto38．5％CP(P>0．05)；followingthedietaryproteinlevelsincreasing，themidgutproteolyticenzymeactivityWasrespectivelyincreasedandthendecreased．5．TheareaofHPGaciniat29．5％and34．0％CPfor6d，12dand18dbeeswerealllargerthanthecontrolgroup．6．Comparedwithcontrolgroup，themRNAlevelofCATWasnosignificantchangeswithdifferentdietaryproteinlevels(尸>0．05)；themRNAlevelofVghadatrendthatfirstincreasedandthendecreasedandthe34．0％crudeproteincolonieshadthehighestmRNAlevel；themRNAlevelofCuZnSODandMnSODincreased诵tlltheincreaselevelofdietaryproteinandwerelowerthanthecontrolgroup．7．Thecumulativenumberofworkersproducedbythecoloniesrangedfrom22420to29519，asignificantfit，usingaquadraticequationestimatedmaximumpopulationgrowthtooccurat31．7％crudeprotein，whenthelevelsofpollenandGEaresetat25％and17．5MJ／kg．Theseresults。showedthat：Thepopulationgrowth，qualityandlongevityofworkerbeosweresignificantlyinfluencedbythedietaryproteinlevels(Po．05)·*Oneofthequeensws,slost,undisclosedstatisticaldata．Values(矗sE，n=5)inarowwithdifferentlettersaresignificantlydifferent(PO．05)。总体表现为随着代用花粉蛋白质水平的增大而增大的趋势。水分：各试验组与对照组之间的水分含量均差异不显著(尸>0．05)。工蜂体蛋白：35．O％试验组工蜂体蛋白含量最高，除与40．O％试验组差异不显著外(尸>O．05)，均显著高于其他各组(P<0．05)。表7不含蜂花粉的代用花粉中蛋白质水平对工蜂体成分的影响Table7Thec甜cassproximatecompositionofbeesfedpollensubstitutes(withIlOpollen)withdifferentproteinlevels处理干重(rag)水分(％)粗蛋白(％)TreatmentDryweight(mg)Moisturecontent(％)Crudeprotein(啪．17．45士O．23b17．78士O．17曲17．76士0．07．b17．82士0．24曲18．04士o-13‘0．096667．26士O．26I67．69士O．19I67．1l士0．23‘67．32士O．28‘66．92士0．1910．222824．02士O．21b23．78士O．18b24．644-0．17．24．2l士0．25曲23．77士O．14-O．03∞注；试验数据用平均值±标准误(x4．SE，n--5)表示，同一列不同上标字母表示差异显著(P<0．05)．*Values(x4-SE，n苟)inarowwithdifferentlettersalesignificantlydifferent(尸．∞．05)．●’3．2含蜂花粉的代用花粉中蛋白质水平对蜜蜂生物学性能的影响3．2．1含蜂花粉的代用花粉中蛋白质水平对蜂群取食量的影响含蜂花粉的代用花粉中蛋白水平对蜂群取食量的影响见表8，由表8可知，蜂群对粉饼和干粉料的消耗量分析结果一致，29．5％和34．O％试验组取食量较高，均显著高于38．5％试验组(PO．05)；对照组蜂群对油菜花粉的取食量均显著高于各试验组(PO．05)，但显著高于25．0％和29．5％试验组(尸O．05)。由表lO可知，在试验第12天，各试验组蜂群群势均有下降，在试验第24天，各试验组蜂群群势均基本恢复初始大小。代用花粉蛋白质水平对蜂群群势增长有显著影响(P0．05)。表ll含蜂花粉的代用花粉蛋白质对工蜂初生重和蜂体蛋白质含量的影响TableIl：Meanvaluesforconcentrationofproteininthehead，thoraxandwetweightoftheemergentworkerbeesfedthedifferentpollensubstitutes(withpollen)注：试验数据用平均值±标准误(i±sE，萨5)表示，同一列上不同上标字母表示差异显著(JP《o．05)．*Values(x士SE，n=5)inarowwithdifferentlettersarcsignificantlydifferent(尸《D．05)．3．2．3．2含蜂花粉的代用花粉中蛋白质水平对血淋巴蛋白浓度和中肠蛋白酶活性的影响由表12可知，工蜂血淋巴蛋白浓度随代用花粉蛋白质水平增大而增大，且试验组血淋巴蛋白浓度均小于对照组，但仅25．O％试验组显著小于对照组组(p0．05)；代用花粉处理组中瞻mRNA的相对表达量均小于对照组，其中仅34．O％试验组与对照组差异不显著(尸>O．05)；CuZnSOD和M彻mRNA的相对表达量均随代用花粉蛋白质水平的升高而增大，并且代用花粉处理组均高于油菜花粉组。38．5％试验组C砌．如ID和MnSODmRNA的相对表达量均显著高于对照组(尸<0．05)。3．2．5含蜂花粉的代用花粉中蛋白质水平对工蜂存活率的影响由图1l知，在室内标准的饲养环境下，代用花粉蛋白质水平对工蜂存活率有显著影响(P