紫云英与油菜模拟花蜜对黏虫蛾影响的初步研究 36页

河南农业大学硕士学位论文紫云英与油菜模拟花蜜对黏虫蛾影响的初步研究姓名：刘保玲申请学位级别：硕士专业：农业昆虫与害虫防治指导教师：王高平201205 河南农业大学硕士学位论文中文摘要黏虫』l／lythimnaseparata(Walker)是重要的农业迁飞性害虫，曾经造成我国主要农作物产量的重大损失，紫云英和油菜是黏虫春季迁飞期主要的蜜源植物，前者与黏虫暴发的关系极为密切。测定油菜和紫云英的花蜜糖含量、单花泌蜜量和游离氨基酸种类及其含量，比较分析两种花蜜氨基酸对黏虫的影响，有助于探索紫云英适合黏虫蛾的机制、阐明黏虫种群动态研究中的疑惑。本文以花期紫云英、油菜为研究对象，利用定量毛细管采集油菜和紫云英的花蜜，测定这两种花蜜的糖含量和单花泌蜜量，用氨基酸分析仪测定了油菜和紫云英花蜜中游离氨基酸的种类和含量，比较了两种蜜源植物花蜜与相应蜂蜜氨基酸组成差异。根据紫云英花蜜和油菜花蜜中游离氨基酸和糖的含量配置模拟花蜜饲喂黏虫成虫，比较黏虫对油菜和紫云英模拟花蜜的取食选择性，分析两种模拟花蜜对黏虫蛾生殖、产卵前期和成虫寿命的影响。主要研究结果如下：1．在信阳市罗山县，紫云英盛花期中午及下午的花蜜糖含量(30％--37％)均显著低于油菜花(39％--46％)，凋零期两者花蜜糖含量(25‰36％)不存在显著差异：油菜的单花泌蜜量早上最高(1．39L～1．69L)、中午(0．69L~o．91aL)和下午(O．29L~o．4IJtL)逐渐降低，紫云英的单花泌蜜量(不足0．19L)远小于油菜且保持相对稳定。2．在信阳市罗山县，油菜花蜜和紫云英花蜜中都含17种氨基酸。油菜花蜜中游离氨基酸的总含量是紫云英花蜜的2．47倍。紫云英花蜜与油菜花蜜中各游离氨基酸含量不同：油菜花蜜中除胱氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、精氨酸外，其他游离氨基酸均比紫云英花蜜相应氨基酸的含量高，其中油菜花蜜中丙氨酸、酪氨酸、丝氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、脯氨酸的含量分别是紫云英花蜜中相应氨基酸的1436f系1135倍、5．70倍、4．69倍、4．1l倍、2．32倍。紫云英蜂蜜氨基酸总量是紫云英花蜜氨基酸总量的4．29倍，花蜜和蜂蜜的氨基酸各组分比例也不相同；油菜花蜜比油菜蜂蜜多含胱氨酸Cys、亮氨酸l_eu；所以不能用油菜蜂蜜、紫云英蜂蜜代替油菜花蜜、紫云英花蜜来研究油菜花蜜、紫云英花蜜对黏虫蛾的影响。设计出以氨基酸为核心的紫云英和油菜模拟花蜜。3．黏虫A级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的取食选择存在显著差异(P<0．05)：黏虫B、C级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的取食选择不存在显著差异(P10pl；J．Lanza,1991o目前，文献上报道较多的测定烟草中氨基酸的方法主要是分光光度法(王文平，1998)和柱前衍生反相高效液相色谱法(冯雷等，2003；王文领等，2005)。分光光度法只能测定烟草中游离氨基酸的总量；高效液相色谱法虽然能够对不同种类的氨基酸定性定量，但是所测定的氨基酸的种类最多只有15—17种，且无法将His和ny分开(李丹等，2003)。氨基酸分析仪法能够分离检测烟叶中的23种游离氨基酸(除了蛋氨酸)，氨基酸分析仪法是测定烟叶中游离氨基酸较好的方法(王娟等，2008)。1．3．2．2花蜜中糖含量的测定方法李左栋等(2006)在一般的野外工作中，糖含量的测定使用便携式的折光仪。当需要较为精确的成分分析时，可以选用色谱分析的方法。其优点是要求的加样量较小而且结果精确、耗时较短。缺点是成本较高，如果色谱仪的色谱柱不全，则只能进行部分成分的分析。1．3．3糖花蜜中主要含有3种糖：蔗糖、葡萄糖和果糖。蔗糖是花蜜的主要成分，蔗糖的浓度一般在25—75％之间(Lfittge，1977)。花蜜中葡萄糖和果糖的比例在种内是一致的，而在种间却存在着很大的差异(Daviseta1．．1998)。花蜜中含有大量的糖，不同花的花蜜含糖量和种类不同。同一种花蜜(如蓝蓟Echiumvulga,"e)在一日内的不同时间里，其糖含量和含糖的浓度等也有显著的变化，这是由植物的生理状况、水分的挥发和蜂类的采集因素造成的。根据中国农业百科全书·养蜂卷(1993)中的介绍：紫云英、油菜蜂蜜蜂蜜的糖成分见表1。5 表1紫云英、油菜蜂蜜中糖的含量1．3．4氨基酸氨基酸是花蜜中一种重要的成分。大多数花蜜含有氨基酸，在20世纪中期以来已经知道花蜜中氨基酸的积累(Lnttge，1961，1962；Mostowska，1964；Naireta1．，1964；Ziegler,1956)。然而，直到第一次重大调查确定在花蜜普遍存在氨基酸(BakerandBaker,1971)。已查明在蛋白质中的20个正常氨基酸存在于各种植物花蜜里，丙氨酸，精氨酸，丝氨酸，脯氨酸，甘氨酸，异亮氨酸，苏氨酸和缬氨酸最普遍(Gottsbergereta1．，1984；RusterholzandErhardt，1998)，含色氨酸的花蜜是罕见的。各种各样的研究表明：不同授粉的植物产生含不同氨基酸浓度的花蜜(BakerandBaker,1983，1986)。环境因素能影响个别氨基酸含量(Smitheta1．，1990，Lanzaeta1．，1995)。花蜜各种氨基酸的浓度一般都变化，然而，花蜜总成分变化少(GardenerandGillman，2001a)。此外，该植物生长条件影响氨基酸的组成成分(GardenerandGillman，2001b)。Baker等人(1973)认为花蜜是朝着氨基酸的浓度不断增加、以适合特异性的传粉者需要的方向演化。根据中国农业百科全书·养蜂卷(1993)中的介绍：紫云英、油菜蜂蜜的氨基酸成分见表2。表2紫云英、油菜蜂蜜中游离氨基酸的含量mg／kg氨基酸种类紫云英蜂蜜中游离氨基酸的含量油菜游离氨基酸的含量6 河南农业大学硕士学位论文1．3．5其他组分花蜜其他组分包括有机酸(BakerandBaker，1975)，萜烯(Ecroydeta1．，1995)，生物碱(Deinzereta1．，1977)，类黄酮(Rodriguez-ArceandDiaz,1992)，配糖类(RoshchinaandRoshchina,1993)，维生素类(CanerandThomburg，2004a；GriebelandHess，1940)，酚类(Ferreresetai．，1996)，和油类(Vogel，1969)。花蜜还含有植物防卫蛋白，植物防卫蛋白的功能是保护雌蕊不受微生物入侵，微生物入侵通过风吹或授粉者把细菌转移到花蜜丰富的代谢产物中(CarterandThomburg,2000，2004a’b，c；Cartereta1．，1999；Naqvieta1．，2005；Peumanseta1．，1997；Thomburgeta1．2003)。1．3．6花蜜与蜂蜜蜂蜜是蜜蜂将采集的植物花蜜或植物细胞渗出的蜜露或昆虫排出的甘露混以蜜蜂唾腺的分泌物，经充分酿造而贮藏在蜂巢内的甜性物质(曾志将，2003)。蜂蜜是一种高度复杂的糖类饱和溶液。蜂蜜含有人体所需的丰富营养，历来被人们认为是天然的滋补品。国内外研究发现蜂蜜中含有水分、碳水化合物、酸类化合物、微量的维生素、矿物质、蛋白质生物酶、轻甲基糠醛、芳香类化合物等多种成分。蜂蜜的主要成分是碳水化合物，碳水化合物中(95-99．9)％是糖分。蜂蜜中糖分含量约为(69．86)％。蜂蜜中糖分以单糖为主，双糖次之，还含有少量三糖及低聚糖。一般蜂蜜不含淀粉，但含有微量的糊精。虽然蜜蜂可以直接食用花蜜，但是它们通常首先将花蜜转化为成熟的蜂蜜(Winston，1987)。蜜蜂在将花蜜转化为蜂蜜的过程中，工蜂的咽下腺能够分泌一些酶参加了食物的处理(Kuboeta1．，1996；Ohashieta1．，1999；Pontoh&Low，2002)。主要葡萄糖苷酶和淀粉酶等，这些糖解酶能够将花蜜中的多糖转化为葡萄糖和果糖(Winston，1987)。蜜蜂加工过的蜂蜜，带蜜腺的花部组织，都是与天然花蜜有差别的。1．4糖和氨基酸对鳞翅目成虫的影响1．4．1糖对鳞翅目成虫的影响花蜜中的糖类对昆虫的取食和发育有重要作用，糖类提供了昆虫生命活动所需的能量(Reillyeta1．，1995)。一方面，糖影响黏虫蛾的生殖能力，有研究表明，黏虫蛾生殖腺在蛹期已经发育完成，但雌蛾卵粒内卵黄尚未沉积，需要取食糖类作为补充营养后才能发育成熟。黏虫蛾成熟食物中已小需要无机盐、蛋白质、脂肪等，只要碳水化合物作为唯一的营养物质来源卵巢即可完成发育(郭郛等，1963)。粘虫能取食葡萄糖、果糖、甘露糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、海藻糖、棉子糖、甘油、甘露醇等，能完成正常生殖活动，产下数百粒卵或上千粒卵，卵能孵化；但取食水、木糖、山梨糖、乳糖、糊精、淀粉、糖原等后，只能产下几粒卵，卵不能孵化(郭郛等，1964)。另一方面，糖影响黏虫蛾的飞翔能力，黏虫蛾飞行初期主要动用糖类物质(海藻糖、糖原)，30min以后主要以甘油三酯为能源物质(王宗舜等，1995)。成虫需要从花蜜中获取糖分生成脂类(罗晨，2000)作为能量进行迁飞。7 1．4．2氨基酸对鳞翅目成虫的影响花蜜中的氨基酸对昆虫的取食和发育有重要作用，氨基酸的存在可促进昆虫的取食(Reillyeta1．，1995)。花蜜对昆虫的吸引，可能受到特定氨基酸的味道或感觉的影响(GardenerandGillman．2002；ShimishiandKuwabara,1970)。植食性昆虫取食植物叶片后，花蜜中氨基酸的含量增加，这样可以增加植物对传粉昆虫的引诱作用(Smithela1．，2000)。有研究表明，花蜜中的氨基酸是丝网蜘蛱蝶Araschnialevana重要的营养来源，不仅是因为丝网蜘蛱蝶在幼虫期饲喂低质量的幼虫食料，成虫饲喂含氨基酸的花蜜比饲喂不含氨基酸的食物的产卵量多，而且丝网蜘蛱蝶在幼虫期饲喂低质量的幼虫食料，成虫饲喂含氨基酸的花蜜与其幼虫期饲喂高质量的幼虫食料的产卵量一样多。丝网蜘蛱蝶取食和利用花蜜中的氨基酸，能弥补幼虫食物营养不良的影响，花蜜中的氨基酸有利于蝴蝶的生殖力(Mevi-SchQtz&Erhardt，2005)。8 河南农业火学硕士学位论文2．引言黏虫Mythimnaseparata(Walker)属鳞翅目、夜蛾科，主要以小麦、玉米、高粱、水稻等禾谷类粮食作物及棉花、豆类、蔬菜等植物为食。具有群聚性、迁飞性、杂食性、暴食性，是全国性重要农业害虫。蜜源的丰欠可能是影响黏虫迁飞扩散距离和卵巢发育与抱卵数量的重要因素之一(李光博，1995)。迁飞中转地(湖南、江西、浙江、江苏、湖北、安徽、河南)的主要蜜源植物对粘虫自华南虫源地迁飞至黄淮流域我国小麦主产区起重要作用，该区域面积较大的蜜源植物是人类栽培的紫云毙4stragalussinicusL．和甘蓝型油菜BrassicanapusL．(王高平，2006)。1950-1992年间我国小麦粘虫发生面积与迁飞中转地紫云英种植面积呈显著正相关关系，而与该区域油菜面积没有相关关系(Wangela1．，2006)。赵丹等(2009)用紫云英和油菜蜂蜜成分的配方溶液饲喂黏虫成虫，比较两者对黏虫蛾的生殖力效应以及对其产卵前期和成虫寿命的效应差异，结果表明饲喂油菜蜜的黏虫蛾的产卵量比紫云英蜜多；该研究中饲喂黏虫蛾所用到的配方液只是根据蜜蜂加工过的紫云英蜜和油菜蜜配制而成，模拟紫云英和油菜花蜜对黏虫蛾的影响有待阐明。丝网蜘蛱蝶Araschnialevana取食和利用花蜜中的氨基酸，能弥补幼虫食物营养不良的影响，花蜜中的氨基酸有利于蝴蝶的生殖力(Mevi—Schntz&Erhardt，2005)，那么是不是紫云英和油菜花蜜中的游离氨基酸对黏虫的生殖力有不同的影响，才导致黏虫种群大小与紫云英种植面积达极显著相关水平呢?测定油菜和紫云英花蜜中游离氨基酸的种类和含量，是澄清这个问题的基础。另一方面，由于采集天然花蜜方法的局限，难以获得大量花蜜来研究蜜源植物对补充营养期黏虫的影响：能否以蜜蜂酿制的紫云英和油菜的单花蜂蜜对黏虫生殖的影响来评价两种蜜源天然花蜜氨基酸的效应?需要比较紫云英花蜜与蜂蜜、油菜花蜜与蜂蜜之间游离氨基酸种类和含量的差异。通过研究紫云英和油菜花蜜中的游离氨基酸对黏虫生殖力的影响，为探讨黏虫蛾生殖与迁飞中转地蜜源植物关系提供依据。蜜源植物花蜜的糖含量、单花泌蜜量、适口性和花的气味均可影响黏虫的补充营养，测定并比较紫云英和油菜花蜜中的糖含量、单花泌蜜量和游离氨基酸种类与含量，分析模拟花蜜对黏虫成虫的影响，是阐明紫云英对黏虫适合性机制的基础工作。9 3．材料与方法3．1材料3．1．1虫源和供试植物黏虫在实验室长期饲养，在温度(20-a：1)*C，相对湿度85％，光照14L：10d的人工气候箱内用玉米和小麦饲养多代。老熟幼虫于装有湿润松散土的瓶子内化蛹，化蛹后称取蛹重，根据重量分为三个重量等级：A．O．15—0．209；B．0．21-0．259；C．0．26-0．309，分瓶收集，于室温下放入装有湿润细土的塑料筒内，土深5．10cm，保持一定的湿度直至羽化。单头置于养虫笼中，记录各黏虫羽化日期，0-24h作为一日龄黏虫，以24h为单位，黏虫日龄增。夜间以5％蜂蜜水饲喂1．2小时补给营养。供试植物为信阳市罗山县油菜(图1)、紫云英(图2)。图1花期油菜图2花期紫云英3．1．2仪器与试剂Hirschmann定量毛细管(19L和59L)，北京万成北增精密仪器有限公司O．30％便携式折光仪WZl03和0．80％便携式折光仪WZl08。温度计，塑胶手套。玻璃棒，2000ml的烧杯，1000M1的白细口瓶，一次性注射器，人工气候箱。L一8900氨基酸自动分析仪，柠檬酸钠、浓盐酸、氢氧化钠(天津化学试剂J一)。L．甘氨酸、L一蛋氨酸、L一缬氨酸、L．酪氨酸、L一赖氨酸、L．异亮氨酸、L一丝氨酸、L一脯氨酸、L．亮氨酸(北京索莱宝)，L．苏氨酸、L一丙氨酸、L．精氨酸、L．胱氨酸、L一天冬氨酸，L一组氨酸(上海惠兴)，L一苯丙氨酸(天津光复)，L一谷氨酸(上海政翔)，蔗糖(广东金华)。3．1．3自制仪器吸虫管：选用长度为40．50cm的硅胶管(内径为50mm)、长度为30cm的玻璃管(内径49．00mm，外径49．50mm)和沙网(网孔为0．03mm)三种材料。将纱网套在玻璃管的一端，然后把硅胶管的一端紧紧套在有网纱的玻璃管的端口，套入的长度大约lcm。养虫笼：透明塑料制成圆筒形，长15cm，直径6cm。上口处用皮筋绑上医用脱脂纱布，lO ．一翌塑奎些奎兰堡主兰篁笙兰—___-_-——-●_____——-____-—●—______——-—-___●--—_●_______-__________--_____●_●—-_____-——●___———-——————————————一。以培养皿作为底。每个养虫笼底部放入矿泉水瓶盖一个，矿泉水瓶盖放入蘸有蜂蜜水的医用脱脂棉的。制作15．20个。自制毛细管专m的-*L胶头：用定量毛细管(1p．L和51．tL)、2501aL簸JPCR管、吸耳球60组合的自制毛细管专用的乳胶头(图3)，其作用是将毛细管的花蜜挤出。图3自制毛细管专用的乳胶头3．2试验方法3．2．1花蜜采集、单花泌蜜量和糖含量测定3．2．1．1紫云英和油菜花蜜采集使用毛细管法(李左栋等，2006)于2010年4月到信阳市罗山县采集紫云英花蜜和油菜花蜜，用Hirschmann定量毛细管51．tL采集油菜花蜜，Hirschmann定量毛细管l儿采集紫云英花蜜，将油菜花或者紫云英的花瓣撕开，使它们的蜜腺露出，戴上塑胶手套，将毛细管的一端插入蜜腺附近吸取花蜜(油菜的蜜腺外露，容易观察到)。3．2．1．2紫云英和油菜的单花泌蜜量的测定采集花蜜时，记录采集满Hirschmann定量毛细管5RL的油菜花朵数和采集满Hirschmann定量毛细管l此的紫云英花朵数。测定上午(7：00．9：00)、中午(1l：00．13：00)、下午(16：00一18：00)、傍晚(18：00．19：00)的初花期、盛花期、凋零期紫云英和油菜单花泌蜜量，各做3次重复。单花泌蜜量的计算：单花泌蜜量=花蜜量／花朵量分析初花期、盛花期和凋零期单花泌蜜量在上午、中午、下午和傍晚的变化。3．2．1．3紫云英和油菜花蜜中糖含量的测定方法糖含量的测定比较简单，可以在花蜜采集现场完成。采用便携式折光仪测定法(李左栋等。2006)测定上午(7：00—9：00)、中午(1l：00．13：00)、下午(16：00—18：00)、傍晚(18：00一19：00)的初花期、盛花期、凋零期紫云英和油菜花蜜糖含量，各做3次重复。具体操作步骤如下：(1)用蒸馏水对折射仪调零：将折射仪的前部对准光亮的方向，用调节手轮调节目镜的折光度，直到分化板上的刻度可以被清楚地看到为止。打开盖板，用折射仪专用的滴管吸取蒸馏水，在镜头上滴加2滴蒸馏水，盖上镜头盖，将镜头对准光线较强的方向，观察目镜；调节调零旋钮，使目镜视野中的明暗分界线与零刻度线重合；调零成功；用擦镜布将镜头擦拭干净，即可进行实际测定(调零和测量必须在同一温度范围内，如果温度变化很大，需待30分钟后重新调节一次零点再测量)。 (2)打开盖板，将棱镜表面用棉布擦拭干净。将花蜜转移到折射仪镜头上(注意在转移过程中，挤压乳胶头的力度～定要缓慢，如果力度过大或过猛，会造成花蜜从毛细管中喷出或者流不出来)。(3)将采集满花蜜的毛细管一端插入自制毛细管专用的乳胶头，另一端对准折射仪镜头中央位置，缓慢挤压乳胶头，使花蜜缓慢流出到折射仪镜头上，连续转移3～5管即可(注意在转移过程中，挤压乳胶头的力度一定要缓慢，如果力度过大或过猛，会造成花蜜从毛细管中喷出或者流不出来。花蜜一定要加在镜头的中央位置，这样观察最有效。连续Jun3-s管花蜜，尽量使几次转移的花蜜在镜头上聚集在一起，以减少下一步操作中气泡的产生)。(4)缓缓盖上折射仪镜头盖，并轻轻的压平，将折射仪镜头对准光线明亮的地方，用目镜观察，即可从明暗分界线的刻度上读出数值。该数值直接说明了被测花蜜的糖度(盖上镜头盖的时候动作要轻缓，否则会使花蜜液层中产生气泡，影响观察效果)。f5)加样后应该迅速读数，并记录。同时还要记录当时的温度(因为便携式折光仪读取的数据是在20。C调零的基础上读取的，所以测得花蜜糖浓度的误差应该是读取数据的误差和外界温度引起的误差之和)，在测量花蜜糖浓度的过程中，加样后随着时间的推移仪器的读数都会上升，而测量蔗糖则没有这种情况。原因可能是水分蒸发或花蜜中某些酶的作用所致，故加样后应该迅速读数(李左栋等，2006)。f6)测量完后，将棱镜和盖板表面的粘着物用湿纱布擦干净。待干了之后，将折射仪正确保存好。分析初花期、盛花期和凋零期紫云英、油菜花蜜糖含量在上午、中午、下午和傍晚的变化。3．2。2游离氨基酸种类及含量的测定紫云英与油菜花蜜的采集：2010年4月采用毛细管法(李左栋等，2006)在信阳市罗山县朱湾村随机选取油菜和紫云英，各采集花蜜50．】00此。pH2．2的柠檬酸钠缓冲液的配制：称取19．69柠檬酸钠(Na3CnH507．2H20)和16．5mL浓盐酸加水稀释到1000mL，用浓盐酸或5009／L的氢氧化钠溶液调节PH至2．2。天然花蜜中游离氨基酸的种类及含量测定：准确称取试样0．08508的花蜜，准确加入0．5mLpH2．2的柠檬酸钠缓冲液，充分摇匀，用0．45lam滤膜过滤，滤液作为试样溶液，商接用氨基酸自动分析仪测定花蜜中游离氨基酸的组成，外标法定量。3．2．3紫云英、油莱模拟花蜜配制由于自然界花蜜的糖含量不一样，为了研究紫云英、油菜花蜜中游离氨基酸对粘虫的影响，配制的紫云英、油菜模拟花蜜中糖含量设置为同一值，33．6％(w／w)蔗糖是天蛾适合粘性和吸收率最大值(RoxanaB．JosensandWalterM．Farina,2001)，紫云英、油菜模拟花蜜中蔗糖的含量定为33．6％(w／w)。由紫云英盛花期花蜜中的糖含量，换算紫云英模拟花蜜的蔗糖含量为33．6％(w／w)时，紫云英模拟花蜜游离氨基酸的含量；同理换算油菜模拟花蜜游离氨基酸的含量。12 河南农业大学硕士学位论文公式如F：油菜模拟花蜜游离氨基酸的含量=油菜花蜜游离氨基酸含量x33．6％／油菜盛花期花蜜糖含量。紫云英花蜜模拟游离氨基酸的含量=紫云英花蜜游离氨基酸含量x33．6％／紫云英盛花期花蜜糖含量。换算好的紫云英、油菜模拟花蜜各自的特有游离氨基酸成分按比例组合，加入33．6％(w／w)蔗糖，加入适量蒸馏水配成饲养液，配制成紫云英、油菜模拟花蜜。将配成的紫云英、油菜模拟花蜜饲养液分别盛在经过湿热灭菌的1000M1白细口瓶内，贴上标签，写上日期、饲养液名称。放入冰箱(0-4℃)保存。3．2．4紫云英、油菜模拟花蜜对黏虫蛾取食选择的影响从A、B、C三个蛹重级里各取2头雌蛾、2头雄蛾，将24小时以内羽化的成虫，雌雄配对单笼饲养，各个蛹重级做2次重复；每个养虫笼里同时放油菜、紫云英模拟花蜜饲养液，每天17：00时将饲养液用注射器注入小器皿(高1．Scm，直径3cm)中，用封口膜(parafilm)封口(封口膜用专用打孔器2mm打上孔)，称重后放入饲养笼中，同时做不放黏虫蛾的对照，每天9：00称重，17：00开始供新鲜溶液。每天分别记录每个养虫笼里黏虫蛾对油菜模拟花蜜饲养液的净取食量和紫云英模拟花蜜饲养液的净取食量。分析黏虫蛾A、B、C三个蛹重级对紫云英、油菜模拟花蜜的净取食量的日动态，黏虫蛾A、B、C三个蛹重级对紫云英、油菜模拟花蜜的累计净取食量。3．2．5紫云英、油菜模拟花蜜对黏虫蛾产卵前期、产卵量和寿命的影响用紫云英、油菜模拟花蜜饲养液分别饲养黏虫蛾成虫，同时设置含33．6％(w／w)蔗糖的溶液为对照。从B蛹重级里各自采集6头雌蛾、6头雄蛾，雌雄配对单笼饲养，做2次重复；从C蛹重级里各自采集12头雌蛾、12头雄蛾，雌雄配对配单笼饲养，做4次重复。每天17：00时将饲养液用注射器注入小器皿(高1．5cm，直径3cm)中，用封口膜(parafilm)封口(封口膜用专用打孔器2mm打上孔)，每天17：00开始供新鲜溶液。用土黄色毛边纸折成层叠状放入饲养笼中，每天检查更换，分别记录雌蛾的产卵前期、产卵量和成虫寿命。以上处理所得数据均用excel进行t测验统计分析。13 4．结果与分析4．1紫云英、油菜的单花泌蜜量和花蜜的糖含量4．1．1紫云英、油菜的单花泌蜜量在信阳市罗山县，盛花期和凋零期的油菜单花泌蜜量均有从早到晚降低的规律：在早晨可高达1．61aL，而中午、下午泌蜜量急剧减少(表3)。而紫云英的单花泌蜜量无论是中午、下午以及盛花期、凋零期均相差不大，远低于油菜，一般不足0．1乩。表3油菜与紫云英的单花泌蜜量(河南罗山)注：表中数据为平均数士标准误，同一列内同一字母表示t测验差异不显著，po．05)；凋零期花蜜糖含量低于盛花期糖含量；油菜盛花期花蜜糖含量41．98％，紫云英盛花期花蜜糖含量33．45％。表4油菜与紫云英花蜜的糖含量(河南罗山)注：表中数据为平均数4-标准误，同一列内同一字母表示t测验差异不显著，p黏虫C级蛹羽化蛾>黏虫A级蛹羽化蛾。黏虫A级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量高于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量，黏虫B级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量低于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量，黏虫C级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量高于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量。：一t￡=三～=醛+黏虫A、B、c级蛹锕化峨对紫云英模襁茈赛的景计狰取禽壁．—▲．黏虫^、B、c级蛹锕化峨对：；瞳蔡模拟花餐的景计障取禽星唁量子图9黏虫A、B、C级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的累计净取食量注：A、B、C代表蛹重级别。19 表7表明：黏虫A级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的取食选择存在显著差异(P<0．05)；黏虫B、C级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的取食选择不存在显著差异(P黏虫C级蛹羽化蛾>黏虫A级蛹羽化蛾。黏虫A级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量高于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量，黏虫B级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量低于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量，黏虫C级蛹羽化蛾对油菜模拟花蜜的累计净取食量高于对紫云英模拟花蜜的累计净取食量。黏虫A级蛹羽化蛾对紫云英、油菜模拟花蜜的取食选择存在显著差异(P