生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验研究的论文 6页

　　生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体肠平滑肌运动作用机制的实验研究的论文作者：鲍荟竹王建吴晖晖赵海平田徽张媛【关键词】生远志；,,总皂苷；,,蜜远志；,,离体肠肌　　摘要：目的探讨生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体十二指肠平滑肌的作用机制。方法采用离体肠肌实验，用生物机能分析系统记录生远志及其皂苷与蜜远志对正常肠肌及工具药乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致离体肠肌收缩的影响，采集肠肌的振幅与频率，计算出各抑制率。结果生远志和远志皂苷均能显著抑制正常肠肌运动，其抑制率显著高于蜜远志(p＜0.01)；且生远志与总皂苷还能显著抑制乙酰胆碱（ach）、组织胺、氯化钡所致的肠肌收缩，并与蜜远志相比有极显著差异(p＜0.01)；蜜远志对正常肠肌和氯化钡所致的离体肠肌兴奋性收缩也有抑制作用(p＜0.05)。结论生远志及其所含的总皂苷对家兔离体肠平滑肌运动具有抑制作用；其抑制机制，可能系其与乙酰胆碱、组胺竞争，阻断m，h1受体以及直接抑制肠肌兴奋有关，且其抑制作用是不可逆的。蜜远志对正常肠肌运动有直接抑制作用，但显著小于生远志及其皂苷。　　关键词：生远志；总皂苷；蜜远志；离体肠肌　　experimentalresearchofcruderadixpolygalaeanditssaponinandhoney-stir-bakedradixpolygalaeontheexvitrointestinemovementmechanismtodomesticrabbit 　　abstract:objectivetoapproachthecruderadixpolygalaeanditssaponinandhoney-stir-bakedradixpolygalaemechanismofinvitrointestinemovementofdomesticrabbit.methodsusedtheinvitrointestinemovementexperiment,ineandbariumchloride;gottheex-intestinesamplitudeandthefrequency,andcalculatedtheinhibitionratio.resultsparedarkablyinhibittheexintestines'movements,theinhibitionratiosarkablylargerthanthatofhoney-stir-bakedradixpolygalae(p＜0.01);andthecruderadixpolygalaeanditssaponincouldallremarkablyinhibitthemovementsoftheintestinesineandbariumchloride;theinhibitionratiosarkablylargerthanhoney-stir-bakedradixpolygalae(p＜0.01);honey-stir-bakedradixpolygalaealsoinhibitedtheexcitabilitycontractchloride(p＜0.05).conclusion①cruderadixpolygalaeanditssaponincaninhibittheexvitrointestine'smovementofthedomesticrabbit;themechanismispossiblyrelatedineandblockm,h1receptor;thenextisdirectinhibitionofexvitrointestineexcitability,andtheinhibitoryactionisinreversible.②honey-stir-bakedradixpolygalaecandirectlyinhibittheex-intestinemovementbuttheinhibitoryactionisremarkablylessthancruderadixpolygalaeanditssaponin.　　key前期研究发现远志对胃肠运动有明显抑制作用，毒性较大。同时发现蜜远志对胃肠运动的抑制作用小于生远志，且毒性较小。基于上述研究结果，该研究拟考察生远志及其皂苷与蜜远志对家兔离体十二指肠平滑肌运动的影响，以探讨远志抑制胃肠运动的作用机理。　　1材料与方法　　1.1药材及被检药制备　　1.1.1生远志购于成都市五块石中药材市场，经本校卢先明教授鉴定为polygalatenuifoliain，煎煮1h，过滤。重复煎煮3次，合并滤液，浓缩为1∶2（即每毫升药液中相当于含原生药2g）药液，高温灭菌,置冰箱内供实验备用。　　1.1.5远志总皂苷参考相关文献［1］,将生远志粗粉300g经石油醚脱脂后抽滤，药渣挥干，用95%的乙醇回流提出，趁热抽滤，重复4次，合并滤液，并浓缩至约300ml，加入3倍量乙醚沉淀，放置过夜，倾去上清液，将沉淀减压干燥，称重，含量为2.21%。　　1.2动物普通健康家兔，体重2~3kg,由成都中医药大学实验动物中心提供。合格证号:scxk(川)2004－14。　　1.3药品1×10－5g/ml氯化乙酰胆碱溶液（上海化学试剂总厂所属上海试剂三厂）、10％氯化钡溶液（成都化学试剂厂）、1×10－5g/ml磷酸组胺溶液（sigma 公司，批号16h0653）。　　1.4试剂台氏液，配置方法参考相关文献［2］。　　1.5器材hl可调式移液枪等。　　1.6统计学处理所有数据依据spss12.0版统计软件进行t检验分析处理。　　2方法与结果　　取家兔猛击头部致死，迅速剖腹，取近幽门端十二指肠约10cm，置于盛有冷台氏液之器皿中，沿肠壁剪去肠系膜，将肠管剪成1.5~2cm的小段备用。调节恒温平滑肌槽，使水温保持在（37±0.5）℃。将压力换能器与bl-420生物机能实验系统连接。取兔肠一段，两端各穿一线，其中一线固定于l型通气管上，放入有50ml台氏液的浴漕内，固定l型通气管，并调节恒温平滑肌槽，缓慢通入气泡（2个气泡/s）。肠管另一端与压力换能器相连，加1g负荷，打开bl-420生物机能实验系统，待肠管运动恢复正常后，记录一段肠管正常活动曲线，开始滴加给药。　　2.1给药以及观察记录方法正常肠肌活动→被检药（分别记录生远志、皂苷、蜜远志对正常肠肌的影响）→正常肠肌活动→工具药（乙酰胆碱、组胺、氯化钡）→被检药（同前）→工具药（同前）。　　2.2给药浓度和剂量被检药所含浓度均为2g/ml，滴加0.2ml（即换算成50ml台氏液浓度为7.97×10-3g/ml）；工具药乙酰胆碱浓度为1×10－5g/ml，氯化钡浓度为10％，磷酸组胺浓度为10－5g/ml，各工具药滴加量均为0.2ml。778论文在线/ 　　2.3计算方法及结果根据生物信号处理系统，按给药后各段肠肌的收缩平均振幅与频率之乘积与正常肠肌或给予工具药（氯化乙酰胆碱溶液、氯化钡溶液和磷酸组胺溶液）后的收缩平均振幅与频率之乘积之差，再与正常肠肌或给予工具药后的肠肌收缩平均振幅与频率之乘积之比计算出抑制率。结果见表1~3及图1~4。　　表1生远志及其皂苷与蜜远志对正常家兔离体肠肌运动的影响（略）　　与生远志组比较,**p＜0.01；与远志皂苷组比较,δδp＜0.01；n=6　　图1生远志及其皂苷与蜜远志对正常家兔离体肠肌运动的影响（略）　　结果表明:生远志组和远志皂苷组对正常肠肌有明显的抑制作用，其抑制率分别为62.58％和30.67％，蜜远志的抑制率则为6.31％；蜜远志组、皂苷组与生远志组比较，均有极显著差异（p＜0.01）；蜜远志组与远志皂苷组比较，亦具有极显著差异（p＜0.01）。　　表2生远志及其皂苷与蜜远志对乙酰胆碱致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　与生远志组比较,*p＜0.05,**p＜0.01；与远志皂苷组比较,δp＜0.05，δδp＜0.01;n=6　　图2生远志及其皂苷与蜜远志对乙酰胆碱所致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　结果表明:生远志组和远志皂苷组对乙酰胆碱所致的离体肠肌的兴奋性收缩有抑制作用，其抑制率分别为60.34％和37.44％，蜜远志的抑制率则为11.66％。蜜远志组与生远志组、皂苷组比较，有极显著差异(p＜0.01)。远志皂苷组与生远志比较亦有显著性差异(p＜0.05)。　　表3生远志及其皂苷与蜜远志对组胺致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　与生远志组比较,*p＜0.05；与远志皂苷组比较,δδp＜0.01;n=6 　　结果表明:远志皂苷组和生远志组对组胺所致的离体肠肌的兴奋性收缩均有抑制作用，其抑制率分别为72.36％和52.95％，蜜远志的抑制率则为25.73％；蜜远志组与生远志组、远志皂苷组比较，均有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。　　表4生远志及其皂苷与蜜远志对氯化钡致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　与生远志组比较,*p＜0.05；与远志皂苷组比较,δδp＜0.01;n=6　　图3生远志及其皂苷与蜜远志对组胺致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　图4生远志及其皂苷与蜜远志对氯化钡致家兔离体肠肌收缩的影响（略）　　结果表明:生远志组及其远志皂苷组对氯化钡所致的离体肠肌的兴奋性收缩均有抑制作用，其抑制率分别为23.52%和23.18%，蜜远志的抑制率则为12.05％。蜜远志组与生远志组、远志皂苷组比较,有显著性差异(p＜0.05或p＜0.01)。　　3讨论 　　远志为远志科植物远志polygalatenuifolia胆碱受体激动剂，可以明显兴奋胃肠道，使其收缩幅度、张力增加，胃肠平滑肌蠕动增加。实验表明，生远志能协同阿托品拮抗m受体而发挥抑制作用。组胺可作用于分布在胃肠平滑肌上的h1受体，以打开细胞膜上允许na+,k+,ca2+通透的离子通道,导致细胞膜去极化,进而使电压依赖性钙通道开放,胞内游离钙离子浓度增高,从而引起胃肠平滑肌收缩［6］，结合生远志能显著抑制胃肠ca2+-atp酶活性，推测其可能通过影响细胞膜ca2+的通透性，使胞内游离ca2+浓度降低而抑制肠肌的收缩。因氯化钡有直接刺激胃肠黏膜、引起胃肠平滑肌收缩的作用，生、蜜远志对正常肠肌均有抑制作用，其中生远志及其皂苷对肠肌运动的抑制作用显著高于蜜远志。结果提示，远志对肠肌的抑制机理是多方面的，既对平滑肌有直接抑制作用，同时又通过拮抗m胆碱能受体、h1受体而发挥多方面抑制作用。实验还发现，滴加各被检药液使肠肌呈现持续抑制状态时，又继续滴加同体积的工具药，发现生远志和皂苷均不能使肠肌重新恢复收缩，依然呈现抑制状态，故推测生远志及其皂苷对肠肌的抑制是不可逆的。而蜜远志组虽然对正常肠肌和给予工具药后的肠肌有一定的抑制作用，但抑制约1～2min后可以使肠肌的舒缩活动恢复用药前的正常收缩状态，提示蜜远志可能对肠肌运动有调节作用。实验过程中还发现远志皂苷对正常肠肌和乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致兔离体肠肌收缩作用均呈现先兴奋后抑制，这与彭文铎［7］报道的远志皂苷h对离体兔回肠平滑肌有兴奋作用部分相似，故推测其与远志皂苷的刺激性有关。综上表明，生远志及其皂苷对肠肌的抑制机制，可能系其与乙酰胆碱、组织胺竞争，阻断m、h1受体，并直接抑制肠肌兴奋性有关，且其抑制作用是不可逆的；蜜远志对肠肌抑制作用小，且可逆。