高效液相色谱法测定蜜饯中的合成着色剂 3页

第28卷第3期凯里学院学报Vol.28
No.32010年6月JournalofKailiUniversityJun.2010*高效液相色谱法测定蜜饯中的合成着色剂张建炀(黔东南州质量技术监督检测所,贵州凯里
556000)摘
要:采用了用高效液相色谱
二极管阵列法测定蜜饯中的5种合成着色剂.用SymmetryC18柱,甲醇
乙酸铵溶液(0.02mol/L)为流动相,流速1.0mL/min,二极管阵列检测器选择柠檬黄428nm、苋菜红520nm、胭脂红510nm、日落黄485nm、亮蓝629nm波长进行检测,并以保留时间和光谱图定性,同时比较了不同前处理方式对测定结果的影响.不同样品的加标回收率为85%~92%.关键词:高效液相色谱;二极管阵列法;蜜饯;合成着色剂论文编码:Doi:10.3969/j.issn.1673
9329.2010.03.22

合成着色剂即人工合成的色素,作为食品添加200~700nm扫描;梯度洗脱,甲醇:20%~35%,剂广泛用于各类食品,国家对其使用有明确的限量3%;35%~80%,9%;80%,5min;进样量10
L.标准.合成着色剂的滥用会对人体造成不同程度的1.3
试样处理危害,包括一般毒性、致泻性、致突性与致癌作用.a.按GB/T5009.35
2003聚酰胺吸附法进[1]国标GB/T5009.35
2003中介绍了饮料、配制酒行处理.类、糖果蜜饯、巧克力豆及着色糖衣制品等产品的b.粉碎或剪碎后,称取10.00g左右样品,加前处理方法,并用梯度洗脱,紫外检测器在254nm入20%乙醇
氨水溶液20mL,超声波提取波长处测定各合成着色剂的含量,用该方法处理部10min,将上清经塞有玻璃纤维的漏斗抽滤,并用分蜜饯样品,样品中的果胶容易堵住G3垂融漏30~50mL20%乙醇!氨水溶液少量多次洗涤样斗,且在254nm波长处,亮蓝的色谱吸收较弱,不品过滤,并合并滤液至烧杯,并用少量水多次清洗能很好的进行定量.本文主要研究了蜜饯样品不同抽滤瓶,清洗液并入烧杯,将烧杯置电热板蒸发溶的前处理过程,并用高效液相色谱二极管阵列检测剂至30mL左右,调pH至6.0,并按a方法进行器的3D数据采集功能对各种合成着色剂进行测处理.定,简单快速,结果准确,适用于食品安全监控.1.4
标准系列和样品的测定1
材料与方法将柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝的国1.1
仪器与试剂家标准溶液配制成50.0
g/mL的混标,并稀释成Waters高效液相色谱Alliance系统(E2695、1.00,5.00,10.00,20.00,50.00
g/mL的标准系2998PDA检测器),Empower2软件,超声波清洗列;选择柠檬黄428nm、苋菜红520nm、胭脂红器,真空泵.20%乙醇
氨水溶液(99+1),乙酸铵510nm、日落黄485nm、亮蓝629nm波长处进行溶液(0.02mol/L),合成着色剂标准溶液(国家标定量根据保留时间及光谱定性,外标峰面积法准物质),实验室用水为超纯水.定量.1.2
仪器工作条件2
结果与讨论色谱柱,SymmetryC184.5mm150mm,2.1
合成着色剂最佳波长的确定5
m;柱温30;流动相,甲醇!乙酸铵溶液由图1可见,5种合成着色剂在200~700nm(002mol/L);流速1mL/min;检测波长,PDA波段中的最大吸收值所在波长分别为柠檬黄428*收稿日期:2010
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20作者简介:张建炀(1982
),男,浙江诸暨人,贵州省黔东南州质量技术监督检测所助理工程师.∀63∀ (258)nm、苋菜红520nm、胭脂红510nm、日落黄的最佳波长为428nm,日落黄的最佳波长为485(236)nm、亮蓝629nm.波长越接近末端吸收485nm.波长200nm,吸收光谱干扰越大,因此选择柠檬黄图1
柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄和亮蓝的3D图2.2
方法的专属性研究表1
5种合成着色剂的线性回归方程和相关系数为了进一步确认方法的专属性,在建立分析方标准物线性方程相关系数r法的过程中,利用了二极管阵列检测器的特性,还质名称进行了峰纯度考察.经过试验,证明所有目标峰的柠檬黄A=3.2326E+04c-5.2830E+030.99997苋菜红A=2.4158E+04c-8.6940E+020.99997纯度均大于纯度阈值,且纯度角均接近于0,即所胭脂红A=2.4496E+04c+7.3901E+020.99999有目标峰的光谱一致性均很理想,可以确保测定结日落黄A=3.1926E+04c+1.1247E+030.99996果的专属准确.亮蓝A=9.6796E+04c+1.8417E+040.999962.3
目标化合物定性研究传统的液相色谱法通常使用保留时间进行定

由表1可知,5种合成着色剂在1.00~性.但是在复杂样品的分析中容易产生假阳性的结50.00
g/mL范围内线性关系良好.果.因此本文利用了二极管阵列检测器的优势,使2.5
样品处理方法比较用标准品溶液建立了光谱库,随后在样品测定中进取5份含合成着色剂的不同样品,用国标法即行了光谱匹配,相对单一的保留时间定性,杜绝了a方法和改进后的b方法处理样品后测定含量,结假阳性误判的可能性,使得结果更为可靠.果见表2.配对比较显著性检验结果,p>0.05,表2.4
线性关系考察明两法测定结果无显著差异,因此可采用本文试样配制1.00,5.00,10.00,20.00,50.00
g/mL处理b法替代国标法的样品处理,且能很好解决蜜的标准溶液进行测定,以质量浓度(
g/mL)对峰饯样品前处理时果胶容易堵塞G3垂融漏斗的面积做标准曲线,回归方程和相关系数见表1.问题.表2
不同样品处理方法所得结果单位:mg/kg样品名称山桔冬瓜条梅姜酱梅橄榄处理方法ababababab柠檬黄49.7750.250.800.81!!!!5.785.96苋菜红!!!!!!67.8069.14!!胭脂红!!!!179.81180.3633.1333.73!!日落黄69.3170.21!!!!!!!!亮
蓝!!0.350.39!!!!!!2.6
加标回收试验试样处理b方法测定其含量并计算回收率(见表取2个代表性样品,制样后每个样品各取23).结果表明,回收率在85%~92%之间,符合国[2]份,其中一份加入合成着色剂标准溶液,混匀后按标规定的加标回收率在70%~95%的要求.∀64∀ 表3
加标回收试验(标准加入量50.00mg/kg,单位mg/kg)样品名称梅姜橄榄色素名称质量分数测得量回收率/%质量分数测得量回收率/%柠檬黄043.6287.245.9652.1692.40苋菜红042.5185.02042.9885.96胭脂红180.36223.1885.64043.1286.24日落黄045.5891.16043.8687.72亮蓝044.9489.88044.5389.063
结语参考文献:本文采用20%乙醇!氨水溶液溶液洗脱蜜饯样品中的合成着色剂,再进行聚酰胺吸附分离,解[1]中华人民共和国卫生部,中国国家标准化管理委员会.决了样品前处理时果胶容易堵住G3垂融漏斗的食品卫生检验方法理化部分[S].北京:中国标准出版社,2004.问题,且用二极管阵列检测器的3D数据采集功能[2]王竹天,杨大进,吴永宁,等.食品卫生检验方法(理化对5种常用合成着色剂进行测定,用光谱匹配杜绝部分):注解(下)[M].北京:中国标准出版社,2008.了假阳性的出现,同时采用各成分的最佳吸收波长进行定量,提高了数据的准确性,适用于蜜饯类食[责任编辑:孟立霞]品的合成着色剂测定.DeterminationofsyntheticcolouringlazedfruitbyhighperformanceLiquidChromatographyZHANGJian
yang(SoutheastofGuizhou,GuizhouProvinceQualityandTechnicalSupervisionandInspectionInstitution,Kaili,Guizhou,556000,China)Abstract:AnovelmethodisproposedforsimultaneousseparationanddeterminationoffivesyntheticcolourinGlazedfruitbyHighperformanceliquidchromatography
photodiodearraydetector(PDA).aSymmetryC18columnwasusedwithmethanolandAmmoniumacetatesolu
tion(0.02mol/L)asmobilephase.Theflowratewas1.0mL/min.Aphotodiodearraydetectorwasusedanddetectionwavelengthswere428nmforTartrazine,520nmforAmaranth,510nmforPonceau4R,485nmforSunsetYellow,629nmforBrilliantBlue.QualitativeanalysiswasperformedviaretentiontimeandUVspectrum.Twodifferentpertreatmentmethodswereusedandestimated.Therecoveriesofdifferentsampleswerefrom85%~92%.Keywords:HighPerformanceLiquidChromatography;PhotodiodeArrayDetector;syntheticcolour;Glazedfruit∀65∀