lc-irms糖加入法测定峰蜜中的混合物 3页

通过加入糖进行峰蜜掺假的LC-IRMS测定化学分析：新近发展的LC-IRMS（液相色谱-同位素质谱联用）分析方法是正式的AOAC（分析家协会正式分析方法）中编号为NO.998.12（蜂蜜中C-4植物糖含量的测定，1999）分析方法的进一步发展，经过几年的研究，APPLICA公司成功地完善了AOAC方法中峰蜜中组份的常规检测，并将其制定为国际认证标准方法（ISO17025）。尽管如此，某些种类的添加糖（如甜菜中C-3糖的测定）不能被检测，因此分析方法的完善显得迫在眉睫，在用户需求的推动下，APPLICA公司于2005年开始这项研究项目，并最终发展了LC-IRMS这一分析技术。这一技术弥补了AOAC方法中蜂蜜各组份如果糖、葡萄糖、二糖、三糖等13C/12C同位素比值(d13C)测定，LC-IRMS这一革新在线联用新分析方法可检测AOAC方法无法检测的各种糖。分析结果的解释是建立在AOAC分析方法及各种糖组份同位素组成的基础之上，各种糖组份同位素的含量测定与AOAC方法一致，表1列出的是纯蜂蜜中糖组份同位素含量及其变化范围：序号测定项目测定值（纯峰蜜）参考文献1蛋白质中d13C值(P)-27.5～-25.5‰White&Donera,b2峰蜜中d13C值(H)-27.5～-25.5‰White&Donera,b3蛋白质与峰蜜中d13CDelta差值(P-H)小于-1‰White&Donera,b4C-4糖含量（计算）小于7%（文献值）White&WinterscAOAC998.12d5果糖中d13C值-与葡萄糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-27.5～-25.5‰-1～+1‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰摘自no.2APPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICAAPPLICA6葡萄糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-27.5～-25.5‰-1～+1‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰摘自no.2APPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICAAPPLICA7二糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与葡萄糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-27.5～-25.5‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰摘自no.2APPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICA,Cabaneroetal.eAPPLICAAPPLICA8三糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与葡萄糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-27.5～-25.5‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰-2～+2‰摘自no.2APPLICAAPPLICAAPPLICAAPPLICA表1：纯峰蜜中糖组份d13C(LC-IRMS)测定值（测定值是通过VPDB进行校正的）近期出版的刊物中，Cabaneroetal.d用同样方法测定了蜂蜜中的掺假糖，其测定条件比APPLICA公司更为苛刻。表1中测定值的不确定度为±0.3‰。 除d13C同位素比值外，果糖/葡萄糖的比值，二糖及三糖的相对含量也可通过LC-IRMS进行测定（见表2，第9-12项）。当分析花蜜中的组份时，这些组份的含量显得非常有趣，它给出了潜在可能的掺假信息，文献f,e给出了果糖/葡萄糖比值的参考值，二糖与三糖的含量与纯峰蜜中测定值相吻合，表2给出了纯金合欢及花蜜中各组份的平均值及变化范围，由表可以看出，这些测定都在表1中所列数据范围之内。序号测定项目纯金合欢(n=60)纯花粉及蜜汁(n=196)平均值范围(最小值/最大值)平均值范围(最小值/最大值)1蛋白质中d13C值-24.7‰-25.5/-23.7‰-25.4‰-26.7/-22.7‰2峰蜜中d13C值-25.1‰-25.6/-24.1‰-25.7‰-27.3/23.0‰3蛋白质与峰蜜中Deltad13C差值0.4%-0.3/0.9‰0.3‰-0.9/1.5‰4C-4糖含量0.1‰0/1.9‰0.3‰0/5.7‰5果糖中d13C值-与葡萄糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-25.1‰-0.1‰0.2‰-1.0‰-0.4‰-25.6/-23.9‰-0.8/1.2‰-1.0/1.5‰-2.0/0.3‰-1.1/0.7‰-25.8‰-0.1‰0.2‰-0.7‰-0.3‰-27.5/-23.2‰-0.8/1.1‰1.6/2.0‰-2.0/1.1‰-1.5/1.2‰6葡萄糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-25.1‰0.1‰0.3‰-1‰-0.3‰-25.8/-23.9‰-1.2/0.8‰-0.8/1.8‰-1.8/0.4‰-0.8/0.2‰-25.7‰0.1‰0.3‰-0.6‰-0.3‰-27.2/-22.7‰-1.1/0.8‰-1.8/2.0‰-2.0/2.0‰-2.0/1.7‰7二糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与葡萄糖中d13C差值-与三糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-25.3-0.2‰-0.3‰-1.2‰-0.6‰-26.7/-23.9‰-1.5/1.0‰-1.8/0.8‰-2.0/0.3‰-1.9/0.5‰-26.0‰-0.2‰-0.3‰-0.9‰-0.6‰-27.5/-22.5‰-2.0/1.6‰-2.0/1.8‰-2.0/2.0‰-2.0/1.7‰8三糖中d13C值-与果糖中d13C差值-与葡萄糖中d13C差值-与二糖中d13C差值-与蛋白质中d13C差值-24.1‰1.0‰1.0‰1.2‰0.6‰-25.3/-22.9‰-0.3/2.0‰-0.4/1.8‰0.3/2.0‰-0.5/2.0‰-25.1‰0.7‰0.6‰0.9‰0.4‰-27.1/-22.6‰-1.0/2.0‰-1.1/2.0‰-2.0/2.0‰-1.2/1.2‰9果糖/葡萄糖比值1.611.50/1.821.201.00/1.4610二糖相对含量（％）8.95.2/13.76.11.2/14.011三糖相对含量（％）2.61.1/5.51.00/8.0表2：纯金合欢及花蜜中糖组份d13C(LC-IRMS)测定值（测定值是通过VPDB进行校正的）文献来源：aJ.Apic.Res.17(1978)94-99,bJ.Ass.Off.Anal.Chem.61(1978)746-750,cJ.Ass.Off.Anal.Chem.72(1989)907-911,dAOACOfficialMothodsofAnalysis(19999),Chapter44,27-30,eJ.Agr.FoodChem.54(2006)9719-9727,fApidologie35(2004)38-81, gSwissFoodManual(2004),Chapter23A,Table23A.7说明：表中数据是通过已有的知识获得的，其可靠性有待认证，仅供参考。备注：d13C:表示待测样品对标准样品13C/12C同位素比值的千分差